| 研究概要 |
アデノウイルスベクターを用いて、p53蛋白質群がメラノーマ細胞株にアポトーシスを誘導することを確認し、チロシナーゼプロモーターによって発現するp53蛋白質群を用いてメラノーマに対する遺伝子治療の基礎的研究を行った。1)6株のヒトメラノーマ細胞株のうち、1株(70W)のみにp53のミスセンス変異を見い出した。6株中、3株(SK-mel-23,SK-mel-118,70W)にp53蛋白質群によるアポトーシス誘導を認めた。すなわち、p53蛋白質群は、変異型だけでなく野生型p53を発現するメラノーマ細胞にもアポトーシスを誘導した。p53ファミリーのなかでも、p51Aがメラノーマ細胞に最も強いアポトーシス誘導活性を示した。p51Aを発現するSK-mel-118細胞にのみ、明らかなCaspase3の活性化を認めた。2)チロシナーゼはメラニン合成過程の最初のステップで働く酵素で、メラノサイト特異的に転写され発現する。チロシナーゼ遺伝子の5'上流配列3.6キロ塩基対(kb)の配列を決定し、この3.6kbのチロシナーゼプロモーターをp53とp51Aの上流に結合した組み換えプラスミド(p3.6-p53,p3.6-p51A)を作製した。さらに、これらの転写単位を組み込んだアデノウイルスを作製した。p3.6-p53はメラノーマ細胞に細胞死を誘導したが、p51Aは逆にメラノーマ細胞の増殖を促進した。すなわち、p51Aは発現量によってメラノーマ細胞の増殖に対し異なる効果を示すことが示唆された。以上の結果から、p53蛋白質群のなかでは、p51Aがメラノーマの遺伝子治療に有用であることが示唆されたが、メラノサイト特異的な高発現にはさらなる工夫が必要であると考えられた。
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