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遺伝子発現を利用した照射効果測定

研究課題

研究課題/領域番号 11670870
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 放射線科学
研究機関東京薬科大学 (2000)
東京大学 (1999)

研究代表者

平野 和也  東京薬科大学, 薬学部, 講師 (80251221)

研究分担者 別府 正敏  東京薬科大学, 薬学部, 教授 (60114633)
鈴木 紀夫  東京大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (10010050)
松本 義久  東京大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (20302672)
研究期間 (年度) 1999 – 2000
研究課題ステータス 完了 (2000年度)
配分額 *注記
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2000年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
1999年度: 2,800千円 (直接経費: 2,800千円)
キーワードMUC1 / Radiation / Tumor antigen / MUCl / 放射線 / 腫瘍抗原 / 放射線応答 / ムチン / X線
研究概要

In vivoでの腫瘍の放射線応答、照射効果の解析を行うため、担がん動物(ヌードマウス)を用いて、これまで確立してきたWestern法、FCM法(血中腫瘍細胞用)をHT29大腸癌細胞のMUC1 mucinの定量に応用した。さらにGFP標識細胞を利用してin vivoでの照射後、少数のGFP標識細胞を回収し、MUC1等の放射線応答遺伝子の発現の変化を解析を行った。
まずヒト大腸がんHT29細胞。照射装置:X線は当教室の島津製(Pantak)X線発生装置より得られる200kVp,20mAX線を用いた。
1)GFP標識細胞株の作製。GFP(Green fluorescent proteins)遺伝子ベクターをヒト腫瘍細胞株(HT-29)にトランスフェクトし、蛍光を発するGFP蛋白を安定に発現する細胞株を蛍光顕微鏡、flowcytometerで確認、選択した。
HT-29/GFP細胞をヌードマウスに移植し、40日後にマウスを全身照射0,6,10,20,30,50Gy照射し、Tumor suspensionを作製し、解析した。その結果、照射後1〜4日まで細胞のMUCl量は生存率の減少に応じて、線量および時間依存的に増加した。またin vivoでの照射後、約8〜10時間にMUC1量の増加が認められた。これによりMUC1のin vitroとin vivoでの応答パターンを比較することが可能となったが、さらに慎重な解析が必要である。さらに他の細胞系、応答分子、測定系について解析をすすめる予定である。本年度は、特定の細胞株、特定の放射線応答分子についてではあるが、in vivoでX線照射した後にGFP標識細胞選択回収し、放射線応答分子の発現を解析する系を確立することができた。以上により、本研究においてMUC1の発現に注目することとした。その結果、in vitroとin vivoで応答に違いのあった遺伝子については、さらにその原因を調べ、in vivoでの照射効果判定への応用の可能性を検討する。

報告書

(3件)
  • 2000 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1999 実績報告書
  • 研究成果

    (4件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (4件)

  • [文献書誌] Y.Kang,K.Hirano,N.Suzuki et al.: "Increased expression after X-irradiation of MUCl in cultured human colon carcinoma HT-29 cells."Jpn.J.Cancer Res.. 91. 324-330 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yun Kang, Kazuya Hirano, Norio Suzuki, Atsushi Enomoto, Akinori Morita, Tatsuro Irimura, and Kazuo Sakai: "Increased expression after X-irradiation of MUC1 in cultured human colon carcinoma HT-29 cells."Jpn.J.Cancer Res.. 91. 324-330 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Kang,K.Hirano,N.Suzuki et al.: "Increased expression after X-irradiation of MUCl in cultured human colon carcinoma HT-29 cells."Jpn.J.Cancer Res.. 91. 324-330 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Y. Kang, K. Hirano, N. Suzuki, A. Enomoto, A. Morita, T. Irimura, and K. Sakai: "Increased expression after X-irradiation of MUCI in cultured human colon carcinoma HT-29 cells"Jpn. J. Cancer Res.. 91(in press). (2000)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書

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公開日: 1999-04-01   更新日: 2016-04-21  

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