自己免疫性再生不良性貧血における自己抗原の同定

• 研究課題/領域番号: 11670987
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 中尾 真二 (中尾 眞二) 金沢大学, 医学部, 教授 (70217660)
• 研究分担者: 中畑 龍俊 東京大学, 医科学研究所・癌病態研究部, 教授 (20110744)
• 研究期間 (年度): 1999 – 2000
• 研究課題ステータス: 完了 (2000年度)
• 配分額: 4,000千円 (直接経費: 4,000千円); 2000年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円); 1999年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
• キーワード: 再生不良性貧血 / 細胞傷害性T細胞 / 発作性夜間血色素尿症 / GPIアンカー膜蛋白 / ペプチドライブラリー / SEREX / αグロビン / ribosomal protein

研究概要

再生不良性貧血(再不貧)は造血幹細胞に対する免疫学的な攻撃によって発症すると考えられているが,免疫反応の標的となる自己抗原はまったく分かっていない.われわれは,免疫学的機序の関与が濃厚な再不貧患者の骨髄から,病態に密接に関与するCD4陽性T細胞クローンZN1を単離した.そこで,平成11年度はcombinatorialなランダムペプチドライブラリーを用いてZN1の標的ペプチドの同定を試みた.その結果,ZN1の増殖を促すいくつかのペプチドが同定されたが,血液細胞に関連の深い分子の同定には至らなかった.現在,新たに開発されたCLIP置換型ペプチドライブラリーを用いてZN1の標的ペプチドを検討中である.一方,このプロジェクトに関連して,再不貧患者の骨髄から単離した別の細胞傷害性T細胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)クローンNT4.2を用いて,自己B細胞に対する細胞障害活性のメカニズムを検討した.その結果,細胞傷害活性が起こるためには,CD58やCD59などのglycosylphosphatidylinositol(GPI)アンカー膜蛋白を標的細胞が発現している必要があることが示された.再不貧の発症に造血幹細胞に対するCTLが関与しているとすれば,このようなGPIアンカー膜蛋白を欠失しているparoxysmal nocturnal hemoglobinureia(PNH)形質の幹細胞はCTLの攻撃を免れて生き残る可能性がある.そこで,100人の再不貧患者末梢血について,CD55・CD59を欠失している顆粒球の有無を高感度のフローサイトメトリーを用いて検討したところ,発症後間もない再不貧患者の88.6%にこのようなPNH顆粒球の増加が認められた.このPNH顆粒球の割合は,免疫抑制療法後の血液学的回復にともなってほとんどの例で著明に減少した.したがって,造血幹細胞に対するCTLは多くの再不貧患者で造血不全の発症に関与していると考えられた.

研究成果

• [文献書誌] Zeng W et al: "Characterization of T-cell repertoire in the bone marrow of immune mediated aplastic anemia : evidence for the in involvement of antigen-driven T cell response in cyclosporine-dependent aplastic anemia"Blood. 93. 3008-3016 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Takami A et al: "High inducibility of heat shock protein 72 (hsp72) in peripheral blood mononuclear cells of aplastic anaemia patients a reliable marker of immune-mediated aplastic anaemia responsive to cyclosporine therapy"Br J Haematol. 106. 377-384 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Takami A et al: "Cytotoxicity against Lymphoblastoid cells mediated by a T-cell clone from an aplastic-anaemia patient role of CD59 on target cells"Br J Haematol. 107. 791-796 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Takami A et al: "Successful treatment of B-cell lymphoma associated with hemophagocytic syndrome using autologous peripheral blood CD34 positive cell transplantation followed by induction of autologous graft-versos-host disease"Ann of Hematol. 79. 389-391 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Miura Y et al: "Induction of autologous graft-versos-host disease with cyclosporin A after peripheral blood stem cell transplantation : Analysis of factors affecting induction"J Allergy Clin Immunol. 106. S51-S57 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Wang H et al: "Relative increase of granulocytes with a paroxysmal nocturnal haemoglobinuria phenotype in aplastic anaemia patients : the high prevalence at diagnosis"Eur J Haemaol. (in press). (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Shinj Nakao: "Role of T-lymphocytes in the pathophysiology of aplastic anemia. Aplastic anemia"Edited by Hubert Schrezenmeier and Andrea Bacigalupo, Cambridge University Press. 17 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] 中尾真二: "再生不良性貧血および不応性貧血における「NHクローンの意識」Annal Review血液"高久史磨,溝口秀昭,小宮山淳,坂田洋一,金倉譲 編,中外医学社. 6 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Zeng W, Nakao S, Takamatsu H, Takami A, Kondo Y, Sugimori N, Yamazaki H, Miura Y, Shiobara S, Matsuda T: "Characterization of T-cell repertoire in the bone marrow of immune-mediated aplastic anemia : evidence for the involvement of antigen-driven T cell response n cyclosporine-dependent aplastic anemia."Blood. 93. 3008-3016 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Takami A, Nakao S, Tatsumi Y, Wang H, Zeng W, Yamazaki H, Yasue S, Shiobara S, Matsuda T, Mizoguchi H: "High inducibility of heat shock protein 72 (hsp72) in peripheral blood mononuclear cells of aplastic anaemia patients : a reliable marker of immune-mediated aplastic anaemia responsive to cyclosporine therapy."Br J Haematol. 106. 377-384 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Takami A, Zeng W, Wang H, Matsuda T, Nakao S: "Cytotoxicity against Lymphoblastoid cells mediated by a T-cell clone from an aplastic anaemia patient : role of CD59 on target cells."Br J Haematol. 107. 791-796 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Takami A, Nakao S, Ueda M, Miura Y, Matsuda T, Kawamura Y: "Successful treatment of B-cell lymphoma associated with hemophagocytic syndrome using autologous peripheral blood CD34 positive cell transplantation followed by induction of autologous graft-versus-host disease."Ann of Hematol. 79. 389-391 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Miura Y, Ueda M, Zeng W, Wung H, Takami A, Yamazaki H, Kawamura Y, Shiobara S, Nakao S: "Induction of autologous graft-versus-host disease with cyclosporin A after peripheral blood stem cell transplantation : Analysis of factors affecting induction."J Allergy Clin Immunol. 106(1). s51-s57 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Wang H, Chuhjo T, Yamazaki H, Shiobara S, Teramura M, Mizoguchi H, Nakao S: "Relative increase of granulocytes with a paroxysmal nocturnal haemoglobinuria phenotype in aplastic anaemia patients : the high prevalence at diagnosis."Eur J Haemaol. (in press).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Wang H et al.: "Relative increase of granulocytes with a paroxysmal nocturnal haemoglobinuria phenotype in oplastic anaemia patients : the high prevalence at diagnosis"Eur J Haemaol. (in press). (2001)
• [文献書誌] Chuhjo T et al: "Successful treatment of persistent erythroid aplasia caused by parvovirus B19 infection in a patient with variable immunodeficiency with low-dose immunoglobulin"Am J Hematol. 60. 222-224 (1999)
• [文献書誌] Takami A et al: "Cytotoxicity against lymphoblastoid cells mediated by a T-cell clone from an aplastic annemia patient : role of CD59 on target cells"Br J Haematol. 107. 791-796 (1999)
• [文献書誌] Azenishi Y et al: "CD59-deficient blood cells and PIG-A gene abnormalities in Japanese patients with aplastic anemia"Br J Haematol. 104. 523-529 (1999)
• [文献書誌] Zeng W et al: "Characterization of T-cell reperroire in the bone marrow of immune-mediated aplastic anemia : evidence for the involvement of antigen-driven T cell response in cyclosporine-dependent aplastic anemia"Blood. 93. 3008-3016 (1999)
• [文献書誌] Takami A et al: "Impaired response of granulocyte-committed progenitor cells to stem cell factor and granulocyte Colony-stimulating factor in human cyclic neurropenia"78. 197-199 (1999)
• [文献書誌] Zeng W,et al.: "Characterization of T-cell repertoire of the bone marrow in immune-mediated aplastic anemia: evidence for the involvement of antigen-driven T-cell response in cyclosporine-dependent aplastic anemia"Blood. 93・9. 3008-3016 (1999)
• [文献書誌] Takami A,et al.: "Cytotoxicity against lymphoblastoid cells mediated by a T-cell clone from an aplastic anaemia patient: role of CD 59 on target cells"Br J Haematol. 107・4. 791-796 (1999)
• [文献書誌] Takami A,et al.: "High inducibility of heat shock protein 72(hsp72) in peripheral blood mononuclear cells of aplastic anaemia patients: a reliable marker of immune-mediated aplastic anemia responsive to cyclosporine therapy"Br J Haematol. 106・2. 377 (1999)
• [文献書誌] 中尾 眞二: "Aplastic anemia pathophysiology,epidemiology,clinical presentation and treatment.(Editors: Schrezenmeier H,Bacigalupo A.)"Cambridge University Press,London. (2000)