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給換えアデノウイルス系を用いたインスリン感受性PDEキナーゼ活性化機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号 11671122
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 代謝学
研究機関愛媛大学

研究代表者

牧野 英一  愛媛大学, 医学部, 教授 (50009578)

研究分担者 大沼 裕  愛媛大学, 医学部, 助手 (00294794)
大澤 春彦  愛媛大学, 医学部, 助教授 (90294800)
研究期間 (年度) 1999 – 2000
研究課題ステータス 完了 (2000年度)
配分額 *注記
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2000年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
1999年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
キーワードインスリン / PDE3B / アデノウイルス / Akt / PI3-K / PKB / PKCλ
研究概要

インスリンはinsulin-sensitive phosphodiesterase(PDE3B)を活性化しcAMPを低下させることにより抗脂肪分解作用を発揮する。申請者らはcell free系でのPDEキナーゼアッセイ系を確立しインスリンにより活性化されるPDEキナーゼはPI3-キナーゼの下流にある未知のキナーゼであることを明らかにした。そこで本研究ではPI3-キナーゼ及びその直下にあると考えれるAktをアデノウイルス系を用いて脂肪細胞に遺伝子導入し、PDEキナーゼ活性化機構におけるこれらの役割を明らかにすることを目的とした。昨年度は神戸大学医学部第2内科小川博士らにより提供された組換えアデノウイルス(dominant negative Akt,dominant negative PI3-K)及びβ-GALを発現するコントロールウイルスをそれぞれ293細胞に感染させ高力価ウイルス液を調整した。そこで本年度はこれらのウイルスを3T3L1脂肪細胞に感染させ、β-GALの発現及びAktまたはまたはPI3-K蛋白の発現をウェスタンブロットにより確認し最適のウイルス力価を算定した。現在これらの組み換えウイルスを3T3L1脂肪細胞に感染させ、インスリンとともにインキュベートし、PDE活性、PDEの燐酸化、PDEキナーゼ等を解析しAktまたはPI3-KがPDEキナーゼ活性化系に関与するかどうか解析を進めているところである。

報告書

(3件)
  • 2000 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1999 実績報告書
  • 研究成果

    (38件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (38件)

  • [文献書誌] Tang Y.: "Improvement in insulin resistance and the restoration of reduced PDE3B gene expression by pioglitazone in adipose tissue of obese, diabetic KKAy mouse."Diabetes. 48. 1830-1835 (1999)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yamada,K: "Human ZHX1 : cloning, chromosomal location, and interaction with transcription factor NF-Y."Biochem Biophys Res Commun. 261. 614-621 (1999)

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  • [文献書誌] Niiya,T.: "A complete defficiency of coagulation factor XIII A-subunit due to a novel compound heterozygote of Ser 413 Leu missense and an nt 389 (ins G) frame shift mutations."Br J Haematol. 107. 772-775 (1999)

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  • [文献書誌] Yamada,K: "Identification of proteins that interact with NF-YA."FEBS Lett. 460. 41-45 (1999)

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  • [文献書誌] Ishizuka N.: "Tumor necrosis factor alpha signaling pathway and apoptosis in pancreatic beta cells."Metabolism. 48. 1485-1492 (1999)

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  • [文献書誌] Kuramoto N: "Effect of ACE gene on diabetic nephropathy in NIDDM patients with insulin resistance."Am J Kidney Dis. 33. 276-281 (1999)

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  • [文献書誌] Sakurai K.: "Mutations in the hepatocyte nuclear factor-4alpha gene in Japanese with non-insulin-dependent diabetes : a nucleotide substitution in the polypyrimidine tract of intron 1β."Horm Metab Res. 32. 316-320 (2000)

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  • [文献書誌] Wang,J-C.: "Transducin-like enncer of split proteins, the human homologs of drosophila groucho, interact with hepatic nuclear factor 3β."J Biol Chem. 275. 18418-18423 (2000)

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  • [文献書誌] Osawa,H.: "Identification of novel C253Y missense and Y864X nonsense mutations in the insulin receptor gene in type A insulin resistant patients."Clin Genet. (in press). (2001)

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  • [文献書誌] 大澤春彦,大沼裕,牧野英一: "HbA1cの活用.軽症糖尿病 早期発見・早期管理."河盛隆造,門脇孝 編,中外医学社、東京、. 92-98、 (1999)

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  • [文献書誌] 大澤春彦,牧野英一: "臨床診断の進め方 プラクティカル内科シリーズNo.6糖尿病"岩本安彦 編,南江堂、東京. 21-27 (1999)

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  • [文献書誌] 大澤春彦,大沼裕,長谷川雅昭,牧野英一: "HbA1,HbA1c検査値のみかた 改訂2版"中井利昭 編,中外医学社 東京、. 439-442 (2000)

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  • [文献書誌] 大澤春彦,牧野英一: "日本糖尿病療養指導士受験ガイドブック2000.日本糖尿病療養指導士認定機構編"メヂカルビュー社、東京. (2000)

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  • [文献書誌] Tang Y.: "Improvement in insulin resistance and the restoration of reduced PDE3B gene expression by pioglitazone in adipose tissue of obese, diabetic KKAy mouse."Diabetes. 48. 1830-1835 (1999)

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  • [文献書誌] Yamada, K: "Human ZHX1 : cloning, chromosomal location, and interaction with transcription factor NF-Y."Biochem Biophys Res Commun. 261. 614-621 (1999)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Niiya, T.: "A complete defficiency of coagulation factor XIII A-subunit due to a novel compound heterozygote of Ser 413 Leu missense and an nt 389 (ins G) frame shift mutations."Br J Haematol. 107. 772-775 (1999)

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  • [文献書誌] Yamada K: "Identification of proteins that interact with NF-YA."FEBS Lett. 460. 41-45 (1999)

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  • [文献書誌] Ishizuka N.: "Tumor necrosis factor alpha signaling pathway and apoptosis in pancreatic beta cells."Metabolism. 48. 1485-1492 (1999)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kuramoto N.: "Effect of ACE gene on diabetic nephropathy in NIDDM patients with insulin resistance."Am J Kidney Dis. 33. 276-281 (1999)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sakurai K.: "Mutations in the hepatocyte nuclear factor-4alpha gene in Japanese with non-insulin-dependent diabetes : a nucleotide substitution in the polypyrimidine tract of intron 1β."Horm Metab Res. 32. 316-320 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Wang, J-C.: "Transducin-like enncer of split proteins, the human homologs of drosophila groucho, interact with hepatic nuclear factor 3β."J Biol Chem. 275. 18418-18423 (2000)

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    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Osawa, H.: "Identification of novel C253Y missense and Y864X nonsense mutations in the insulin receptor gene in type A insulin resistant patients."Clin Genet. (in press). (2001)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tang Y.: "Improvement in insulin resistance and the restoration of reduced PDE3B gene expression by pioglitazone in adipose tissue of obese, diabetic KKAy mouse."Diabetes. 48. 1830-1835 (1999)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Yamada,K: "Human ZHX1 : cloning, chromosomal location, and interaction with transcription factor NF-Y."Biochem Biophys Res Commun. 261. 614-621 (1999)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Niiya,T.: "A complete defficiency of coagulation factor XIII A-subunit due to a novel compound heterozygote of Ser 413 Leu missense and an nt 389 (ins G) frame shift mutations."Br J Haematol. 107. 772-775 (1999)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Yamada,K: "Identification of proteins that interact with NF-YA."FEBS Lett. 460. 41-45 (1999)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Ishizuka N.: "Tumor necrosis factor alpha signaling pathway and apoptosis in pancreatic beta cells."Metabolism. 48. 1485-1492 (1999)

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      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Kuramoto N: "Effect of ACE gene on diabetic nephropathy in NIDDM patients with insulin resistance."Am J Kidney Dis. 33. 276-281 (1999)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Sakurai K.: "Mutations in the bepatocyte nuclear factor-4alpha gene in Japanese with non-insulin-dependent diabetes : a nucleotide substitution in the polypyrimidine tract of intron 1β."Horm Metab Res. 32. 316-320 (2000)

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      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Wang,J-C.: "Transducin-like enncer of split proteins, the human homologs of drosophila groucho, interact with hepatic nuclear factor 3β"J Biol Chem. 275. 18418-18423 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Osawa,H.: "Identification of novel C253Y missense and Y864X nonsense mutations in the insulin receptor gene in type A insulin resistant patients."Clin Genet. (in press). (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 大澤春彦,大沼裕,牧野英一: "HbA1cの活用.軽症糖尿病 早期発見・早期管理."河盛隆造,門脇孝 編、中外医学社、東京、. 92-98 (1999)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 大澤春彦,牧野英一: "臨床診断の進め方 プラクティカル内科シリーズNo.6糖尿病"岩本安彦 編、南江堂、東京. 21-27 (1999)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 大澤春彦,大沼裕,長谷川雅昭,牧野英一: "HbA1,HbA1c 検査値のみかた 改訂2版"中井利昭 編、中外医学社 東京、. 439-442 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 大澤春彦,牧野英一: "日本糖尿病療養指導士受験ガイドブック2000.日本糖尿病療養指導士認定機構編"メヂカルビュー社、東京. (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Tang Y.et al.: "Improvement in insulin resitance and the restoration of reduced PDE3B gene expression by pioglitazone in adipose tissue of obese,diabetic KKAy mouse."Diabetes. 48. 1830-1835 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Niiya T.et al.: "A complete defficiency of coagulation factor XIII A-subunit due to a novl compound heterozygote of Ser 413 Leu missense and an nt 389 (ins G)frame shift mutations."Br.J.Haematol.. 107. 772-775 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Ishizuka N.et al.: "Tumor necrosis factor alpha signaling pathway and apotosis on pancreatic βcells."Metabolism. 48. 1485-1492 (1999)

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      1999 実績報告書

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公開日: 1999-04-01   更新日: 2016-04-21  

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