| 研究課題/領域番号 |
11671372
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
脳神経外科学
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| 研究機関 | 大分医科大学 |
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研究代表者 |
森 照明 大分医科大学, 医学部, 助教授 (60124632)
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| 研究分担者 |
阿部 竜也 大分医科大学, 医学部, 助手 (40281216)
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| 研究期間 (年度) |
1999 – 2000
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| 研究課題ステータス |
完了 (2001年度)
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| 配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
2000年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1999年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
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| キーワード | glioma / NFxB / IxB / gene therapy / angio genesis / gene Therapy / angiogenesis / VEGF / NFκB / IκB / Glioma |
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| 研究概要 |
悪性脳腫瘍における血管新生をターゲットとした遺伝子療法の研究を行う上で、我々は以下の4項目を柱においた。すなわち、増殖因子の発現制御、転写因子の制御、ブロテアーゼの制御、および内因性抗血管新生因子の発現誘導である.これらの中で、転写因子制御による血管新生、脳腫瘍病理標本におけるVEGF発現を検討した.転写因子制御による血管新生においてはwildt type(W)およびdominant negative(ΔN)IκBα遺伝子導入glioma細胞の樹立を試みた.周知のようにIκBはNFκBのp65サブユニツトと結合してそのDNA結合を阻害し、NFκBのダウンレギュレーションに関与している可能性が示唆されている。まず、Dr.Barrardより寄贈されたWおよびΔNIκBα遺伝子をpcDNA plasmid(Invitrogen)のCMV promoterの下流に挿入した.このIκBα遺伝子の挿入されたplasmidをリポフェクチン法にてglioma細胞株に遺伝子導入した。使用した細胞株はIN157と、このIN157のvincristinおよびVP-16耐性株、さらにU251細胞株である。遺伝子導入後、ampicillin selectionにて耐性クローンを拾い上げた。今後これらの細胞を用い、我々の開発したin vitro血管新生モデルにて血管新生能のスクリーニングを行う予定である。脳腫瘍標本におけるVEGF発現は、悪性脳腫瘍患者のパラフィン包埋切片を免疫組織学的に検討したが、ごく少数例の悪性腫瘍患者においてVEGF陽性細胞が見られたのみであった。この件については今後症例の選択、抗体の選択等課題があるものと考えられた。さらにアンギオスタチン,Tie1,2の抗血管新生因子の発現も検討した。
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