| 研究課題/領域番号 |
11671396
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
脳神経外科学
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| 研究機関 | 東京女子医科大学 |
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研究代表者 |
川俣 貴一 東京女子医科大学, 医学部, 助手 (90204768)
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| 研究分担者 |
中村 聡 東京女子医科大学, 医学部, 助手 (20266779)
中島 宏 東京女子医科大学, 医学部, 助手 (80227800)
堀 智勝 東京女子医科大学, 医学部, 教授 (60010443)
山口 知子 東京女子医科大学, 医学部, 講師 (90075276)
光山 哲滝 東京女子医科大学, 医学部, 助手 (80318104)
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| 研究期間 (年度) |
1999 – 2001
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| 研究課題ステータス |
完了 (2001年度)
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| 配分額 *注記 |
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2001年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
2000年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
1999年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
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| キーワード | vasic FGF / cerebral ischemia / EGF / NGF / MAP kinase / PI3-kinase / Ras / apoptosis / basic FGF / 実験的脳梗塞 / neurotrophic factor |
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| 研究概要 |
basic fibroblast growth factor(bFGF)の神経保護作用の詳細なmolecular mechanismを解明する目的にて、PC12細胞を用いた培養系で実験を施行した。各細胞内signaling transduction pathwayの阻害剤を使用し他のnerve growth factor(NGF)、epidermal growth factor(EGF)と比較検討した。MAP kinase系のinhibitor(MEK inhibitor)であるU0126とPD98059、あるいはPI3-Kinase系のinhibitor(p70のinhibitor)であるRapamycinなどを用いてcell survivalへの影響を調べた。
まず、bFGFのcell survivalの増強作用には、MEK-1,-2が強く関与していることが判明した。3者間の比較では、その関与の仕方はbFGF、EGF、NGFの順であった。Rapamycinを用いた場合、NGFのcell survivalに対する作用は強く抑制されたが、bFGF、EGFではさほどでもなかった。このことよりbFGFの作用機序にはNGFほどPI3-Akt pathwayが関与していない可能性が示唆された。さらにcyclic nucleotide-dependent protein kinasesおよびprotein kinase C(PKC)の抑制剤であるK252aを用いたところ、EGFの作用は全く抑制されず、bFGFの作用はNGFと同程度に影響を受けた。このことから、bFGFのcell survivalの作用機序にはNGFと同程度にcyclic nucleotide-dependent protein kinasesが関与していると考えられた。
また、KClによる脱分極によって誘発される細胞死をbFGFが抑制するかどうか検討した。15mMのKClによりPC12細胞の細胞死が5分以内に誘発されたが、bFGF(200ng/ml)はこの細胞死を完全に抑制した。そのメカニズムとしてMAP kinaseやP13-kinaseが関与している可能性が示唆された。
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