| 研究課題/領域番号 |
11671850
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
機能系基礎歯科学
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| 研究機関 | 岩手医科大学 |
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研究代表者 |
客本 斉子 岩手医科大学, 歯学部, 講師 (90118274)
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| 研究分担者 |
永井 雅純 岩手医科大学, 歯学部, 助手 (00217960)
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| 研究期間 (年度) |
1999 – 2000
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| 研究課題ステータス |
完了 (2000年度)
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| 配分額 *注記 |
2,900千円 (直接経費: 2,900千円)
2000年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
1999年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
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| キーワード | レチノイン酸 / レチノイン酸レセプター / コアクチベーター / コレプレッサー / COUP-TF / ヒストンアセチルトランスフェラーゼ / 唾液腺細胞 / CBP / ヒストンアセチル化酵素 |
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| 研究概要 |
本年度は、前年度にひきつづきヒト唾液腺細胞株(HSG)におけるレチノイン酸(RA)レセプターによる転写調節に関与するcofactorの検索を行った。coactivatorであるCREB(cAMP response element binding protein)-binding proteinすなわちCBPがcofactor complexの中心的役割を担うことは前年度に既に報告したので、本年度はその他のcoactivatorについて検索を行った。その結果、steroid receptor coactivator-1(SRC-1),p300/CBP-integrating protein (p/CIP)ならびにp300/CBP-associating factor(p/CAF)の発現がイムノブロット法によりそれぞれ明らかになった。またこのうちp/CIPとp/CAFにはヒストンアセチルトランスフェラーゼ(HAT)活性が認められた。また、レチノイン酸レセプター(RAR)の特異抗体による免疫沈降物もHAT活性を示したが、これは細胞内でRARに結合しているこれらcoactivatorによるものと推察された。現在、RARと結合しているcoactivator複合体の構成を免疫沈降イムノブロット法により同定中である。
つぎに、私共がHSG細胞でクローニングした転写抑制因子COUP-TFIのRAR転写制御系への関与を調べるために、COUP-TFIをHSG細胞に一過的に導入しRARによる転写活性化への関与をレポータジーン法により検討した。この結果、COUP-TFIの導入によりRA依存性レポーター活性は顕著に抑制され、またこの抑制はCOUP-TFIのアンチセンスオリゴの導入により解除された。これらの結果はレポーター安定導入細胞を用いた実験でも同様であった。RAによる増殖抑制効果に対しては、COUP-TFIの導入はRA依存性[^3H]チミジンの取り込み抑制に対し有意に影響しなかったものの、アンチセンスオリゴの導入はこの抑制を解除、ないしは対照以上に取り込みを増加させた。これらよりCOUP-TFIの増殖抑制経路にはRARの転写活性化を抑制する間接的経路とともに直接にtransrepressする経路があることが示唆された。一方、corepressorのNcoRとSMARTの発現を認めたので、COUP-TFIとこれらcorepressorとの複合体形成を現在検討中である。
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