| 研究概要 |
本研究では、多数のPLA2分子種の中から特に分泌性PLA2(sPLA2)に焦点を絞り、その肥満細胞における発現と機能に関する解析を実施した。
(1)マウス骨髄由来肥満細胞に内在的に発現しているPLA2分子種の検索を行った結果、従来より報告のあるcPLA2,sPLA2-IIA,sPLA2-Vに加え、新たにsPLA2-IIC,sPLA2-IID,sPLA2-IIE,sPLA2-IIF,iPLA2の発現を確認した。
(2)ラット肥満細胞腫RBL-2H3に各種sPLA2のcDNAを遺伝子導入し、各分子種の肥満細胞の機能に及ぼす影響を検討した。その結果、以下の二点を明らかにした。
i)ヘパリン結合性sPLA2であるIIA,V,IIDは脱顆粒増強因子として機能する。これらの酵素は細胞が未刺激の状態では分泌顆粒に貯蔵されており、細胞活性化に伴い、顆粒膜と形質膜の融合部に集積する。おそらくこの特定のコンパートメントで膜融合に関わる脂質分子(リゾリン脂質)の産生を行っているものと予想される。
ii)sPLA2-Vはエイコサノイド産生増強因子として作用する。この作用はsPLA2のホスファチジルコリン(PC)加水分解能と相関していた。更に、強いPC分解活性を持つsPLA2-Xを強制発現した場合にもエイコサノイド産生の強い亢進が見られた。以上の結果から、脱顆粒に伴って細胞外に放出されたsPLA2-Vが形質膜外層を覆うPCからアラキドン酸を遊離し、これがエイコサノイドに代謝されるものと予想している。
iii)sPLA2-V,XはPAFの産生を増強する。
(3)ヒト臍帯血由来培養肥満細胞におけるsPLA2分子種の発現を検討した結果、マウス骨髄由来肥満細胞とは異なり、sPLA2-IIDの発現のみが認められた。
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