DNAメチル化によって発現制御され胃がんの発生・進展に寄与する遺伝子の単離

• 研究課題/領域番号: 11770108
• 研究種目: 奨励研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 人体病理学
• 研究機関: 国立がんセンター
• 研究代表者: 金井 弥栄 国立がんセンター, 研究所・病理部, 室長 (00260315)
• 研究期間 (年度): 1999 – 2000
• 研究課題ステータス: 完了 (2000年度)
• 配分額: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円); 2000年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円); 1999年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
• キーワード: DNAメチル化 / 5-azacytidine / 発現制御 / がん抑制遺伝子 / 多段階発がん / Wip1 / TROP2 / B4-2 / HIC-1 / ヘテロ接合性喪失 / 前がん状態、胃がん / 慢性胃炎 / 腸上皮化生

研究概要

DNAメチル化によって発現が制御されヒトがんの生物学的特性の決定に寄与する遺伝子の単離を試みるため、DNAメチル化阻害剤である5-azacytidine処理により増殖が抑制された培養胃がん細胞株においてdifferential display法を施行した。5-azacytidine処理によりWip1,TROP2,B4-2,BRCA-2 region transcription unit CG005,cofilin,ROCK,CD44ならびにinterferon-inducible protein 6-16 mRNA発現の経時的な変化を認め、5-azacytidine処理によって発現の変化する未知遺伝子も単離し得た。これらの遺伝子のmRNA発現を臨床手術材料においても検討したところ、非がん粘膜に比し胃がんにおいてWip1,B4-2ならびにcofilinの、非がん粘膜に比し大腸がんにおいてWip1,B4-2,BRCA-2 region transcription unit CG005,cofilinならびにROCKの、非がん肝組織に比し肝細胞がんにおいてTROP2,B4-2ならびにBRCA-2 region transcription unit CG005のmRNA発現の有意な低下を認め、大腸がんにおいてTROP2発現は有意に亢進していた。Wip1ならびにBRCA-2 region transcription unit CG005の発現低下は肝細胞がんの分化度と有意に相関し、門脈侵襲を伴う肝細胞がんにおいて特に発現が低下していた。TROP2発現は正常肝組織に比し前がん状態にある慢性傷害肝において有意に亢進し、肝細胞がんの悪性進展に伴って逆に低下していた。B4-2の発現は特にB型肝炎ウイルス感染に伴って低下していた。これらの知見は、DNAメチル化がこれらのがん関連遺伝子の発現を直接または間接に制御してヒトの多段階発がんに寄与する可能性を示している。

研究成果

• [文献書誌] Kanai Y,Hui AM,Sun L,Ushijima S,Sakamoto M,Tsuda H,Hirohashi S: "DNA hypermethylation at the D17S5 locus and reduced HIC-1 mRNA expression are associated with hepatocarcinogenesis."Hepatology. 29. 703-709 (1999)
• [文献書誌] Kanai Y,Ushijima S,Nakanishi Y,Hirohashi S: "Reduced mRNA expression of the DNA demethylase, MBD2,in human colorectal and stomach cancers."Biochem. Biophys. Res.Commn.. 264. 962-966 (1999)
• [文献書誌] Kanai Y,Ushijima S,Tsuda H,Sakamoto M,Hirohashi S: "Aberrant DNA methylation precedes loss of heterozygosity on chromosome 16 in chronic hepatitis and liver cirrhosis."Cancer lett.. 148. 73-80 (2000)
• [文献書誌] Kondo Y,Kanai Y,Sakamoto M,Mizokami M,Ueda R,Hirohashil S: "Genetic instability and aberrant DNA methylation in chronic hepatitis and liver cirrhosis."Hepatology. 32. 970-979 (2000)
• [文献書誌] Kanai Y,Ushijima S,Kondo Y,Nakanishi Y,Hirohashi S: "DNA methyltransferase expression and DNA methylation of CpG islands and pericentromeric satellite regions in human colorectal and stomach cancers."Int.J.Cancer. 91. 205-212 (2001)
• [文献書誌] Saito Y,Kanai Y,Sakamoto M,Saito H,Ishii H,Hirohashi S: "Expression of mRNA for DNA methyltransferases and methyl-CpG-binding proteins and DNA methylation status on CpG islands and pericentromeric satellite regions during human hepatocarcinogenesis"Hepatology. (In press). (2001)
• [文献書誌] Yae Kanai, et al.: "Reduced mRNA expression of the DNA demethylase, MBD2, in human colorectal and stomach cancers"Biochem. Biophys. Res. Commn.. 264. 962-966 (1999)
• [文献書誌] Yae Kanai, et al.: "DNA hypermethylation at the D17S5 locus and reduced HIC-1 mRNA expression are associated with hepatocarcinogenesis"Hepatology. 29. 703-709 (1999)
• [文献書誌] Yae Kanai, et al.: "Aberrant DNA methylation precedes loss of heterozygosity on chromosome 16 in chronic hepatitis and liver cirrhosis"Cancer lett.. 148. 73-80 (2000)
• [文献書誌] Tohru Harabayashi, Yae Kanai, et al.: "Reduction of integrin β4 and enhanced migration on laminin in association with intraepithelial spreading of urinary bladder carcinomas"J. Urol.. 161. 1364-1371 (1999)
• [文献書誌] Yutaka Kondo, Yae Kanai, et al.: "Microsatellite instability associated with hepatocarcinogenesis"J. Hepatol.. 31. 529-536 (1999)
• [文献書誌] Atsushi Saito, Yae Kanai, et al.: "Disruption of E-cadherin-mediated cell adhesion systems in young patients with gastric cancers"Jpn. J. Cancer Res.. 90. 993-999 (1999)
• [文献書誌] Atsushi Ochiai, Yae Kanai, et al.: "Multiple mechanisms for inactivation of E-cadherin cell adhesion system in cancer. In : Epithelial Morphogenesis in Development and Disease"Harwood Academic Publishers gmbh, Amsterdam. 427-444 (1999)