| 研究概要 |
現在までにサルモネラの上皮細胞の侵入にはType3secretion sysytemという蛋白を分泌する細菌の機能が非常に重要であることが明らかになった。Type3secretion sysytemは多くの病原細菌に共通の蛋白分泌装置と考えられ、その働きは病原性を発揮するのに必要な蛋白の分泌と考えられている。サルモネラのType3secretion sysytemからはSipA,SipB,SipC,sipDなどの宿主細胞の侵入に必要な蛋白が分泌される。さらに、分泌されたSipB,SipCは宿主の細胞に注入されることが明らかになった。私たちの研究では、これらの分泌性蛋白に注目し、SipB,SipCが宿主の細胞内に入ってから細胞内での働きを明らかにすることを目的としている。酵母を用いたTwo-Hybrid Systemを利用してSipB,SipC等の蛋白が宿主の細胞内に入ってからどのような蛋白と相互作用があるかを探すことよりこれらの蛋白の宿主細胞内での働きを明らかにしたいと考えている。現在、酵母を用いたTwo-Hybrid Systemを利用してsipCと相互作用がある宿主の蛋白をスクリーニングした結果、ある細胞内器官がSipCと相互作用があるという結果が得られた。実際に細胞内で相互作用があるかを免疫沈降法を用いて解析したところ、実際にSipCと細胞内器官は細胞内で結合していることがウエスタンブロットにより確認できた。この結果より、サルモネラ分泌蛋白SipCはサルモネラの上皮細胞への侵入だけでなく、宿主細胞に侵入後細胞内器官に結合し、このあとに続く宿主細胞の形態の変化や、免疫応答に影響を与えていることを明らかにすることができた。
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