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神経細胞K^+チャネルのサブユニット構成

研究課題

研究課題/領域番号 11780580
研究種目

奨励研究(A)

配分区分補助金
研究分野 神経科学一般
研究機関大阪大学

研究代表者

宋 文杰 (宗 文杰)  大阪大学, 大学院・工学研究科, 助教授 (90216573)

研究期間 (年度) 1999 – 2000
研究課題ステータス 完了 (2000年度)
配分額 *注記
2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
2000年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1999年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
キーワードpotassium channels / α subunit / β subunit / channel localization / cell culture / cholinergic interneuron / striatum / transfection / αsubunit / βsubunit
研究概要

K+チャネルは神経細胞の発火パターンを決定する重要なイオンチャネルであり、その機能の分子基盤の解明は神経科学に於ける重要課題のひとつである。K+チャネルはαサブユニットとβサブユニットから構成されるが、いずれのサブユニットにも多数の種類が存在する。しかし、神経細胞におけるK+チャネルがどのようなαとβサブユニットの組み合わせで形成されるかは不明である。線条体コリン作動性細胞(以下ではコリン細胞と略す)ではKv4とKv1のαサブユニットとβ1-β3が同時に発現されており、Kv1は軸索に、Kv4は細胞体に局在を示す。本研究では、βサブユニットのコリン細胞における部位局在を可視化することによってβとαサブユニットの結合パタンを探ることにした。そのために、まず線条体細胞の培養標本を確立した。培養にはE18〜E20のラットを用いた。アセチルコリンの合成酵素であるChATに対する抗体を用いた免疫染色によって、培養標本にコリン細胞の存在を確認することができた。この染色より、3週間前後培養すれば、コリン細胞はその形態的な特徴を獲得し、染色せずに顕微鏡観察で確認できることが分かった。βサブユニットを導入する前に、緑色蛍光蛋白のプラスミド(Gibco plasmid pGreen)の導入でコリン細胞への遺伝子導入の可能性を検討した。その結果、多くの線条体ニューロンに緑色蛍光蛋白が導入されたが、コリン細胞への導入は観察できなかった。その理由は恐らくコリン細胞の密度が低いからだと思われる(コリン細胞は線条体の2〜3%)。今後培養標本におけるコリン細胞の密度を上げることが必要となる。αとβサブユニットの結合パタンを探る別のアプローチとして、発生に伴うαとβサブユニットの発現とカリウム電流との関係を調べる実験も開始した。本研究に関連した研究課題で成果が得られたので、論文(研究発表)にまとめた。

報告書

(2件)
  • 2000 実績報告書
  • 1999 実績報告書
  • 研究成果

    (8件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (8件)

  • [文献書誌] Wen-Jie Song: "Characterization of Ca2+ channels in rat subthalamic nucleus neurons."J Neurophysiol. 84. 2630-2637 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Wen-Jie Song: "Adenosine receptor expression and modulation of Ca2+ channels in rat striatal cholinergic interneurons."J Neurophysiol. 83. 322-332 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Robert C Foehring: "Unique properties of R-type calcium currents in neocortical and neostriatal neurons."J Neurophysiol. 84. 2225-2236 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Shinichi Maeda: "Separation of signal and noise from in vivo optical recordings using independent component analysis."Neurosci Lett. (in press). (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 宋文杰: "大脳基底核のリズムと視床下核"脳の科学. (印刷中). (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 宋文杰: "単一神経細胞のmRNAの定量方法の開発"生物物理. (印刷中). (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Wen-Jie Song: "Adenosine receptor expression and modulation of Ca2+ channels in rat striatal cholinergic interneurons"J Neurophysiol. 83. 322-332 (2000)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Mermelstein PG: "Properties of Q-type calcium channels in neostriatal and cortical neurons are correlated with beta subunit expression"J Neurophysiol. 19. 7268-7277 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書

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公開日: 1999-04-01   更新日: 2016-04-21  

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