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ガラスチップに集積したミクロ生化学分析実験システムの構築と単一細胞生化学

研究課題

研究課題/領域番号 11794006
研究種目

地域連携推進研究費

配分区分補助金
研究分野 応用微生物学・応用生物化学
研究機関東京大学

研究代表者

山崎 素直  東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (00011982)

研究分担者 中尾 政之  東京大学, 大学院・工学系研究科, 助教授 (90242007)
庄子 習一  早稲田大学, 理工学部, 教授 (00171017)
北森 武彦  東京大学, 大学院・工学系研究科, 教授 (60214821)
渡慶次 学  (財)神奈川科学技術アカデミー, インテグレーテッドケミストリープロジェクト, 研究員 (60311437)
木村 博子  順天堂大学, 医学部, 講師 (00053299)
久本 秀明  東京大学, 大学院・工学系研究科, 講師 (00286642)
研究期間 (年度) 1999 – 2000
研究課題ステータス 完了 (2000年度)
キーワード集積化化学実験室 / マイクロチップ / マイクロトータルアナリシスシステム / イオン対抽出 / イムノアッセイ / 溶媒抽出 / 重金属イオン分析 / 単一細胞計測 / 単一細胞分析 / 熱レンズ顕微鏡 / 集積化学実験室 / μTAS / マイクロ・トータル・アナリシス・システム / 免疫分析
研究概要

(財)神奈川科学技術アカデミーの研究開発プロジェクトと連携し、生化学分析をマイクロチャネル上で実現するために不可欠な要素技術を確立し、生化学分析へと応用した。本研究により、マイクロチップを用いた溶媒抽出とそれを利用したイオン分析、混合・反応を利用したフローインジェクション分析、レーザーを用いた反応温度制御と酵素反応解析、イムノアッセイ、超高感度検出器である熱レンズ顕微鏡と、その単一細胞イメージングへの応用などを実現した。
マイクロチップ内の微小空間では分子拡散による移動距離が著しく短く、比界面積が大きいという特長があるため、溶媒抽出や溶液の混合が通常の実験系に比べて飛躍的に短い時間で分析することが可能であることを明らかにした。この現象を利用することにより、内径100ミクロンオーダーのマイクロチャネルを持つチップを用いてコバルトや鉄などの重金属イオンの湿式分析を従来法よりはるかに短い時間で実現することに成功した。加えて、チップ内部に固定した微小固相表面で行うイムノアッセイについても同様に効率よく短時間で分析可能であることを明らかにした。モデル試料の分析だけではなく、従来法では2日程度かかっていた腫瘍マーカーCEAの定量をわずか35分にまで短縮することができ、実際の患者血清を用いた分析において従来法と高い相関を得ることができ、実用性も高いと考えられる。
一方チップ内で分析する場合には微小領域で測定可能な検出器が必要であり、それに適した超高感度検出器として熱レンズ顕微鏡を開発した。熱レンズ顕微鏡は1ミクロンオーダーの空間分解能で非蛍光性分子を単一分子レベルの高感度定量することが可能である。この特長を生かし、チップ内に培養した単一細胞内のシトクロームcのイメージングとアポトーシス過程における分布変化の計測に成功した。
本研究をさらに発展させることによりマイクロチップはバイオ研究を飛躍的に発展させる新たな手法となると期待できる。

報告書

(3件)
  • 2000 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1999 実績報告書
  • 研究成果

    (20件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (20件)

  • [文献書誌] 佐藤記一: "Integration of an Immunosorbent Assay System: Analysis of Secretory Human Immunoglobulin A on Polystyrene Beads in a Microchip"Analytical Chemistry. 72. 1144-1147 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 渡慶次学: "Integration of a Microextraction System on a Glass Chip: Ion-Pair Solvent Extraction on Fe(II) with 4.7-Diphenyl-1,10-phenanthrolinedisulfonic Acid and Tri-n-octylmethylarnmonium Chloride"Analytical Chemistry. 72. 1711-1714 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 渡慶次学: "Integration of a Microextraction System Solvent Extraction of Co-2-Nitroso-5-dimethylaminophenol Complex on a Microchip"Journal of Chromatography A. 894. 19-23 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 田中有希: "Non-Contact Photothermal Control of Enzyme Reaction on a Microchip by Using a Compact Diode Laser"Journal of Chromatography A. 894. 45-51 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hussein M Sorouraddin: "Integrated FIA for the Determination of Ascorbic Acid and Dehydroascorbic Acid in a Microfabricated Glass-Channel by Thermal-Lens Microscopy"Analytical Sciences. 16. 1033-1037 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 火原彰秀: "Integrated Multilayer Flow System on a Microchip"Analytical Sciences. 17. 89-93 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kiichi Sato et al.: "Integration of an Immunosorbent Assay System : Analysis of Secretory Human Immunoglobulin A on Polystyrene Beads in a Microchip"Analytical Chemistry. 72. 1144-1147 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Manabu Tokeshi et al.: "Integration of a Microextraction System on a Glass Chip : Ion-Pair Solvent Extraction on Fe(II) with 4,7-Diphenyl-1, 10-phenanthrolinedisulfonic Acid and Trin-octylmethylammonium Chloride"Analytical Chemistry. 72. 1711-1714 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Manabu Tokeshi et al: "Integration of a Microextraction System : Solvent Extraction of Co-2-Nitross-5-dimethylaminophenol Complex on a Microchip"Journal of Chromatography A. 894. 19-23 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yuki Tanaka: "Non-Contact Photothermal Control of Enzyme Reaction on a Microchip by Using a Compact Diode Laser"Journal of Chromatography A. 894. 45-51 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hussein M. Sorouraddin: "Integrated FLA for the Determination of Ascorbic Acid and Dehydroascorbic Acid in a Microfabricated Glass-Channel by Thermal-Lens Microscopy"Analytical Sciences. 16. 1033-1037 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Akihide Hibara: "Integreted Multilayer Flow System on a Microchip"Analytical Sciences. 17. 89-93 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Sato et al.: "Integration of an Immunosorbent Assay System : Analysis of Secretory Human Immunoglobulin A on Polystyrene Beads in a Microchip"Anal.Chem.. 72. 1144-1147 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] M.Tokeshi et al.: "Integration of a Microextraction System on a Glass Chip : Ion-Pair Solvent Extraction on Fe (II) with 4,7-Diphenyl-1,10-phenanthrolinedisulfonic Acid and Tri-n-octylmethylammonium Chloride"Anal.Chem.. 72. 1711-1714 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] K.Sato et al.: "Molecular Transport between Two Phases in a Microchannel"Anal.Sci.. 16. 455-456 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] M.Tokeshi et al.: "Integration of a Microextraction System : Solvent Extraction of Co-2-Nitroso-5-dimethylaminophenol Complex on a Microchip"J.Chromatogr.A. 894. 19-23 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Y.Tanaka et al.: "Non-Contact Photothermal Control of Enzyme Reaction on a Microchip by Using a Compact Diode Laser"J.Chromatogr.A. 894. 45-51 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] K.Sato et al.: "Determination of Carcinoembryonic Antigen in Human Sera by Integrated Bead-Be Immunoassay in a Microchip for Cancer Diagnosis"Anal.Chem.. (印刷中). (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] K. Sato et al.: "Integration of an Immunosorbent Assay System : Analysis of Secretory Human Immunoglobulin A on Polystyrene Beads in a Microchip"Analytical Chemistry. (in press). (2000)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] M. Tokeshi et al.: "Integration of a Microextraction System on a Glass Chip : Ion-Pair Solvent Extraction of Fe (II) with 4,7-Diphenyl-1, 10-phenanthrolindisulfonic Acid and tri-n-octylmethylammonium Chloride"Analytical Chemistry. (in press). (2000)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書

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公開日: 2001-10-23   更新日: 2016-04-21  

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