| 研究課題/領域番号 |
11838018
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究機関 | 東海大学 |
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研究代表者 |
中澤 博江 東海大学, 医学部, 教授 (20110885)
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| 研究分担者 |
一守 康史 東海大学, 医学部, 講師 (60184636)
石田 英之 東海大学, 医学部, 講師 (20222424)
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| 研究期間 (年度) |
1999 – 2000
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| 研究課題ステータス |
完了 (2000年度)
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| 配分額 *注記 |
3,600千円 (直接経費: 3,600千円)
2000年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1999年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
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| キーワード | NO合成酵素 / nNOS / iNOS / eNOS / ノックアウト / LDL酸化 / マクロファージ |
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| 研究概要 |
本研究の目的は、動脈硬化巣形成に対するiNOSの影響を明らかにし、病巣におけるNO、スーパーオキサイド、ONOO^-の相互反応の解析に基づいて、動脈硬化巣での活性小分子の役割を明確にすることである。iNOSのノックアウトマウス(iNOS^<-/->)と野生型のマウス(iNOS^<+/+>)を用いて下記の項目を検討した。
1.マクロファージによるLDL酸化とのアポトーシス誘導の両群における比較
2.マクロファージのLDL酸化能とチオール放出能の両群での比較
3.高脂肪食摂取後の大動脈起始部硬化巣の両群における面積の比較
4.動脈硬化巣内の集積細胞分布の両群における比較
5.両群におけるiNOS発現とニトロチロシン生成の有無と生成細胞
11年度においてiNOS^<-/->とiNOS^<+/+>の2群で目的1と2の実験が終了した。
12年度の検討で下記の項目が明らかになった。
1.高脂肪食投与15週目に大動脈起始部に両群とも有意な動脈硬化巣が見られた。
2.硬化巣の面積は、iNOS^<-/->:285±73×10^3μm^2,n=10で、iNOS^<+/+>:293±82×10^3μm^2,n=10と両群で差がなかった。
3.大動脈のHomogenateではiNOS^<+/+>ではiNOSが誘導された(iNOS^<-/->では陰性)。これはmRNA、iNOS蛋白、iNOSの組織染色全てで示すことが出来た。
4.ニトロチロシン染色もiNOS^<+/+>のみ認め、iNOS染色陽性部と一致していた。
5.iNOSとニトロチロシンは主としてにマクロファージに認められた。
6.動脈硬化巣のコラーゲン染色によってiNOS^<+/+>ではiNOS^<-/->に比較しコラーゲン組織が有意に減少していた。
コラーゲン線維の有無は動脈硬化巣の脆弱性を決める重要な因子である。コラーゲン線維の減少は、動脈硬化巣が破綻し易い事を示し、acute coronary syndrome(急性冠不全症候群)に結びつく事が分かっている。したがって、本研究の成果は、心筋梗塞の予防に関する臨床的にも有用な新知見である。
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