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内分泌攪乱物質検出用トランスジェニックメダカの開発

研究課題

研究課題/領域番号 11839014
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究機関大阪大学

研究代表者

西川 淳一  大阪大学, 薬学研究科, 助教授 (90218131)

研究期間 (年度) 1999 – 2000
研究課題ステータス 完了 (2000年度)
配分額 *注記
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2000年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
1999年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
キーワード内分泌攪乱物質 / エストロゲン / トランスジェニックメダカ
研究概要

近年、内分泌攪乱物質と呼ばれる一群の化学物質がヒトおよびその他の生物の内分泌系を攪乱することにより、生殖の異常や癌の発症などの原因となっていることが問題となっている。本課題では、内分泌攪乱物質の新規試験法の開発を目的に、簡便にホルモン様作用を測定できるトランスジェニックメダカの作製を行なった。内分泌撹乱作用のうちエストロゲン作用に着目し、エストロゲン刺激に応じてGFP(Creen Fluor escent Protein)を発現するトランスジェニックメダカの作製を試みた。平成11年度において、GFP遺伝子上流にエストロゲン応答配列(ERE)を挿入したレポーターDNAを構築し、培養細胞へのトランスフェクションにより、このコンストラクトが目的通り働くことを確認した。また、メダカ受精卵へのDNA注入法を改良し、効率良く染色体上に外来DNAを挿入する方法を確立した。引き続き平成12年度において、メダカ受精卵へレポーターDNAのマイクロインジェクションを行い、得られたトランスジェニックメダカがエストロゲン刺激に応じてGFPを発現するかどうかについて検討した。様々な方法を用いて調べたが、期待通りの結果は得られなかった。これは、外部から導入された遺伝子はメダカ染色体上のランダムな位置に挿入されるため、その挿入位置によって発現が抑えられるためと考えられた。今後、さらに多くのトランスジェニックメダカを創出して、本研究目的に適した個体を選別する必要がある。また実験途上において、メダカがもともと持っている自家蛍光が問題となることも判明したので、これを克服するため自家蛍光の少ない変異種の検索も合わせて行っていく必要がある。

報告書

(3件)
  • 2000 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1999 実績報告書
  • 研究成果

    (9件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (9件)

  • [文献書誌] Shiraishi,F.: "Development of a simple operational estrogenicity assay system using the yeast two-hybrid system."J.Environ.Chem.. 10. 57-64 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Saito,K.: "Molecular evidence of complex tissue-and sex-specific mRNA expression of the rat a_<2u>-globulin multigene family."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 272. 337-344 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishihara,T.: "Estrogenic activities of 518 chemicals by yeast two-hybrid assay."J.Health Sci.. 46. 282-298 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shiraishi, F.: "Development of a simple operational estrogenicity assay system using the yeast two-hybrid system."J.Envirom.Chem.. vol.10. 57-64 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Saito, K.: "Molecular evidence of complex tissue- and sex-specificm RNA expression of the rat α_<2u>-globulin multigene family."Biochem.Biophys.Res.Commun.. vol.272. 337-344 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishihara, T.: "Estrogenic activities of 518 chemicals by yeast two-hybrid assay."J.Health Sci.. vol.46. 282-298 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shiraishi,F.: "Development of a simple operational estrogenicity assay system using the yeast two-hybrid system."J.Environ.Chem.. 10. 57-64 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Saito,K.: "Molecular evidence of complex tissue- and sex-specific mRNA expression of the rat α_<2u>-globulin multigene family."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 272. 337-344 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Nishihara,T.: "Estrogenic activities of 518 chemicals by yeast two-hybrid assay."J.Health Sci.. 46. 282-298 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書

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公開日: 1999-04-01   更新日: 2016-04-21  

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