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魚類胚の凍結保存技術開発に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号 11F01092
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分外国
研究分野 水産学一般
研究機関東京海洋大学

研究代表者

STRUSSMANN C. A. (2013)  東京海洋大学, 海洋科学技術研究科, 教授

STRUSSMANN C.A. (2011-2012)  東京海洋大学, 海洋科学技術研究科, 教授

研究分担者 RAHMAN S. M.  東京海洋大学, 海洋科学技術研究科, 外国人特別研究員
RAHMAN S.M.  東京海洋大学, 海洋科学技術研究科, 外国人特別研究員
研究期間 (年度) 2011 – 2013
研究課題ステータス 完了 (2013年度)
配分額 *注記
1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
2013年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
2012年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
キーワード凍結保存 / 魚類 / 受精卵 / 胚 / 凍結保護物質 / シロギス / DMSO / 超音波ソニケーション / チルド耐性 / エレクトロポレーション / 配偶子 / トレハロース / CaCl_2・MgCl_2
研究概要

本研究では、絶滅の危機にある魚類の保全や貴重な魚種の遺伝子の保存・有効利用を最終目的として、魚類胚の凍結保存技術の確立を目指す。凍結保護物質浸漬条件の開発に加え、生物学的手法やアルギン酸ナトリウムのマイクロカプセル、凍結保護物質のマイクロインジェクション、液体窒素・液化冷媒を用いた急速凍結による凍結保存条件を検討する。本年度(平成25年4月~平成25年9月)では、モデル魚種のシロギス(海産魚)を用いて卵膜の凍結保護剤透過性の向上を目指すため、超音波ソニケーションによる凍結保護物質の浸透促進効果を検討した。その結果、1~3分間で37.5W/cm2の超音波ソニケーション処理を施したシロギス受精卵(体節期胚)内の凍結保護物質濃度が、ソニケーションを行わなかった対象区に比べて、10%DMSO処理区で19.4%、20%DMSO処理区で31.7%、30%DMSO処理区で112.5%まで有意に増加した。さらに、前処理として受精卵を20分間10%DMSOに浸漬した後に20%DMSOで3分間超音波ソニケーションを行ったところ、受精卵は高い生存率を維持しながらも前処理を行わなかった区に比べて約40%のDMSO浸透の増加が確認された。また、尾鰭伸長期の胚を用いた同様の実験では、さらに高い効果が得られた。以上の結果から、超音波ソニケーションにより魚卵の膜透過性が向上し、凍結保護物質の浸透が促進されることが判明した。これらの結果は今後、凍結保存の専門科学雑誌Cryobiologyに投稿する予定である。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

最初に挙げられた課題について確実に成果を上げていることと、本研究の成果を学術論文および学会発表にて公開しているから。

今後の研究の推進方策

現時点で特に推進方策の変更が必要はないと判断しているので、概ね当初計画の通りで実施する予定。

報告書

(3件)
  • 2013 実績報告書
  • 2012 実績報告書
  • 2011 実績報告書
  • 研究成果

    (6件)

すべて 2014 2013 2012

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (4件)

  • [雑誌論文] Surrogate production of eggs and sperm by intrapapillary transplantation of germ cells in cytoablated adult fish2014

    • 著者名/発表者名
      S. K. Majhi, R. S. Hattori, S. M. Rahman, and C. A. Strüssmann
    • 雑誌名

      PLoS ONE

      巻: 9 号: 4 ページ: e95294-e95294

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0095294

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Electroporation enhances permeation of cryoprotectant (dimethyl sulfaxide) into Japanese whiting (Sillago japonica) embryos2013

    • 著者名/発表者名
      S.M. Rahman, C.A. Strtlssmann, T. Suzuki, and M. Watanabe
    • 雑誌名

      Theriogenology

      巻: 79 ページ: 853-858

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Effect of electroporation on the permeation of the cryoprotectant dimethyl sulfoxide into Sillago japonica embryoS2013

    • 著者名/発表者名
      Sk.M. Rahman, C.A. StrUssmann, Toru Suzuki, and Manabu Watanabe
    • 学会等名
      AQUACULTURE2013
    • 発表場所
      Nashville, Tennessee, USA
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] Effect of sonication on the permeation of cryoprotectant dimethl sulfoxide into Japanese whiting embryos2013

    • 著者名/発表者名
      C.Astrussmann, Sk.M.Rahman, T.Susuki, S.K.Majhi, and M.Watanabe
    • 学会等名
      The 3rd International Congress on Controversies in Cryopreservation of Reproductive Cells, Tissue and Organs
    • 発表場所
      Berlin, Germany
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] Development of cryopreservation protocols for Japanese whiting (Sillago japonica) embryos2012

    • 著者名/発表者名
      Sk.Mustafizur Rahman, Carlos Augusto Strussmann, Toru Suzuki, Manabu Watanabe
    • 学会等名
      6^<th> World Fisheries Congress
    • 発表場所
      Edinburgh, Scotland
    • 年月日
      2012-05-09
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] Development of cryopreservation protocols for Japanese whiting (Sillago japomca)embryos2012

    • 著者名/発表者名
      Sk.M. Rahman, C.A. StrUssmann, T. Suzuki and M. Watanabe
    • 学会等名
      6th World Fisheries Congress
    • 発表場所
      Edinburgh・ Scotland
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書

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公開日: 2013-04-25   更新日: 2024-03-26  

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