| 研究課題/領域番号 |
11J05444
|
|---|
| 研究種目 |
特別研究員奨励費
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 国内 |
|---|
| 研究分野 |
応用分子細胞生物学
|
|---|
| 研究機関 | 京都大学 |
|---|
研究代表者 |
安居 佑季子 京都大学, 生命科学研究科, 特別研究員(DC2)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2011 – 2012
|
| 研究課題ステータス |
完了 (2012年度)
|
| 配分額 *注記 |
1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
2012年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
2011年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
|
|---|
| キーワード | フィトクロム / FT / 花成 / シロイヌナズナ / 光質 |
|---|
| 研究概要 |
花成時期決定は、種の存続を懸けた重要イベントであり、植物は光環境を敏感に認識することで最適なタイミングを測っている。これまでに、赤色光・遠赤色光受容体フィトクロムB(phyB)が、フロリゲンとして知られる花成促進因子FTの発現を抑制することが知られている。研究員は、酵母ツーハイブリット法によるスクリーニングにより単離したシロイヌナズナの新規phyB相互作用因子VASCULAR PLANT ONE-ZINC FINGER1 (VOZ1)とVOZ2の機能解析をおこない、これまでに、VOZがphyB下流で機能すること、長期の低温を感知する経路で機能するFT抑制因子FLCの発現を抑制することで花成を促進することを示していた。今年度はVOZがどのようにphyBからの制御を受けるかを明らかにするため、細胞内におけるVOZタンパク質の挙動を中心に解析した。まず、in vivoにおけるphyBとVOZの相互作用を、一過的発現系を用いたBiFC法と共免疫沈降法により示した。また、野生型において分画実験を行い、VOZの細胞内局在を詳細に解析した。その結果、VOZタンパク質は主に細胞質に局在しているが、一部が核にも局在していることがわかった。これまでに、VOZが核内で機能することを示していたため、VOZはシグナル伝達時に一部が核移行することが考えられた。次に、VOZタンパク質の光質に対する応答を、核・細胞質それぞれに局在化させたVOZタンパク質を発現する株を用いて解析したところ、核に局在するVOZタンパク質のみがphyBが不活性型となる遠赤色光条件下において分解されることがわかった。また、核に局在するVOZタンパク質がリン酸化修飾を受けていることが明らかなったことから、VOZを介したシグナル伝達にリン酸化修飾が関わることが考えられた。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
これまでに、解析が比較的困難であった、VOZタンパク質の細胞内局在と、in vivoにおけるphyBとVOZの相互作用の解析を行い、それぞれ結果を得たため。細胞内局在の解析では、細胞分画の実験により、'ごくわずかな核局在のVOZタンパク質を検出した。相互作用の解析においても、二種類の方法で矛盾しない結果を得た。
|
