リンパ球の初期分化を誘導・制御するシグナル伝達機構

• 研究課題/領域番号: 12051243
• 研究種目: 特定領域研究
• 配分区分: 補助金
• 審査区分: 生物系
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 烏山 一 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (60195013)
• 研究分担者: 反町 典子 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 講師 (30217468) ; 生田 宏一 京都大学, ウイルス研究所, 教授 (90193177) ; 塚田 聡 大阪大学, 大学院・医学研究科, 助手 (60273637)
• 研究期間 (年度): 2000 – 2002
• 研究課題ステータス: 完了 (2002年度)
• 配分額: 165,500千円 (直接経費: 165,500千円); 2002年度: 57,200千円 (直接経費: 57,200千円); 2001年度: 58,500千円 (直接経費: 58,500千円); 2000年度: 49,800千円 (直接経費: 49,800千円)
• キーワード: B細胞分化 / チロシンリン酸化 / Btk / Sab / T細胞レセプター遺伝子 / ヒストンアセチル化 / 抗原提示細胞 / Ly49Q / シグナル伝達 / PLCγ2 / IL-7レセプター / マクロファージ活性化 / プレB細胞レセプター / BLNK / サイトカイン / STAT / NK細胞 / CD94

研究概要

(1)プロB細胞よりクローニングしたTPP36とそのアイソフォームであるTPP32がともにチロシンキナーゼAb1によって効率よくチロシンリン酸化されること、しかも120番目チロシン残基のリン酸化によって立体構造変化がひきおこされることが判明した。両分子ともN末端近傍に典型的な核移行シグナル配列をもつが、核ではなく細胞質に局在しており、リン酸化にともなう核移行の可能性が示唆された。
(2)我々は以前、BtkのSH3ドメインに結合し、Btkの活性を抑制する新規分子Sab (SH3BP5)を同定したが、今回はSabがミトコンドリア内に局在し、活性型のJNKと会合し、さらにJNKによってリン酸化される事を示した。これらのことにより、B細胞のアポトーシスに機能すると考えられるBtkとJNKの両分子のクロストークにおけるSabの介在の可能性を示した。
(3)TCRγ遺伝子座において、サイトカイン非刺激下では調節領域のヒストンH3Lys9がメチル化されていたが、刺激後数日間で徐々に低下し、代わりにアセチル化レベルが上昇した。この時、Jγ領域のgermline転写とクロマチンのaccessibilityも同様に上昇した。以上の結果からTCRγ遺伝子座のクロマチンの閉じた状態とヒストンH3Lys9のメチル化が良く相関することが示された。
(4)マクロファージおよび未熟樹状細胞に発現する新規抑制性レセプターLy49Qの性状解析を行った。Ly49Qは細胞内ITIMのリン酸化依存的にSHP-2を会合した。マクロファージおよびプラスマ細胞様樹状細胞は抗Ly49Q抗体処理により速やかに接着伸展し、極性を形成した。さらにLy49Qの過剰発現によって、細胞接着が抑制されたことから、Ly49Qはこれらの細胞で細胞接着能の制御に関与することが示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Wang, Y-H., et al.: "Differential surrogate light chain expression governs B cell differentiation"Blood. 99. 2459-2467 (2002)
• [文献書誌] Taguchi, T., et al.: "Pre-BCR-mediated signal inhibits CD24-induced apoptosis in human pre-B cells"J. Immunol. 170. 252-260 (2003)
• [文献書誌] Kubo, S., et al.: "Long-term maintenance of IgE-mediated memory in mast cells in the absence of detectable serum IgE"J. Immunol.. 170. 775-780 (2003)
• [文献書誌] Sato, E., et al.: "Chronic inflammation in skin can be induced in IgE transgenic mice by a single challenge of multivalent antigen"J. Allergy Clin. Immunol.. 111. 143-148 (2003)
• [文献書誌] Saijo, K., et al.: "Essential role of Src-family protein tyrosine kinases in NF-κB activation during B cell development"Nature Immunol.. 4. 274-279 (2003)
• [文献書誌] Tsuchiya, K., et al.: "Molecular cloning and characterization of TPP36 and its isoform TPP32,_novel substrates of Abl tyrosine kinase"FEBS lett.. 537. 203-209 (2003)
• [文献書誌] 烏山 一: "プレB細胞レセプターを介するB細胞分化誘導"蛋白質核酸酵素増刊号. 47. 2182-2187 (2002)
• [文献書誌] 烏山 一: "B細胞発生・分化の分子制御機構とその破綻"感染炎症免疫. 32. 18-27 (2002)
• [文献書誌] Wiltshire, C., et al.: "A new c-Jun N-terminal kinase (JNK)-interacting protein, Sab(SH3BP5), associates with mitochondria"Biochem J.. 367. 577-585 (2002)
• [文献書誌] Agematsu, K., et al.: "Absence of memory B cells in patients with common variable immunodeficiency"Clin Immunol.. 103. 34-42 (2002)
• [文献書誌] Inabe, K., et al.: "Bruton's tyrosine kinase regulates B cell antigen receptor-mediated JNK1 response through Rac1 and phospholipase C-gamma2 activation"FEBS Lett.. 514. 260-262 (2002)
• [文献書誌] Lee, H.-C., et al.: "Seeding of dendritic epidermal T cells in the neonatal skin is reduced in 129 strain of mice"Immunol. Lett.. 81. 211-216 (2002)
• [文献書誌] Han, H., et al.: "Inducible gene knockout of transcription factor recombination signal binding protein-J reveals its essential role in T versus B lineage decision"Int. Immunol.. 14. 637-645 (2002)
• [文献書誌] Watanabe, N., et al.: "Activation and differentiation of autoreactive B-1 cells by interleukin-10 induce autoimmune hemolytic anemia in Fas-deficient anti-erythrocyte immunoglobulin transgenic mice"J. Exp. Med.. 196. 141-146 (2002)
• [文献書誌] Lahn, M., et al.: "MHC class I-dependent Vγ4^+ pulmonary T cells regulate αβ T cell-independent airway responsiveness"Proc. Natl. Acad. Sci. USA.. 99. 8850-8855 (2002)
• [文献書誌] Wang, J.W, et al.: "Influence of SHIP on the NK repertoire and allogeneic bone marrow transplantation"Science. 15. 2094-2097 (2002)
• [文献書誌] 反町典子: "NK細胞の系統発生-missing self認識の起源を求めて 動物界における免疫系の進化 別冊医学のあゆみ"医歯薬出版株式会社. 5 (2002)
• [文献書誌] 反町典子: "抑制性レセプターによる細胞接着制御 蛋白質核酸酵素増刊号 免疫研究の最前線"共立出版. 5 (2002)
• [文献書誌] 反町典子: "NKレセプターファミリー分,CD94とLy49Qの機能 Molecular Medicine増刊号 免疫2002"中山書店. 9 (2002)
• [文献書誌] 烏山 一: "「B細胞の初期分化」標準免疫学第2版(谷口克、宮坂昌之編)"医学書院. 9 (2002)
• [文献書誌] Toyama-Sorimachi, N., et al.: "Mouse CD94 participates in Qa-1-mediated self recognition by NK cells and delivers inhibitory signals independent of Ly49"J.Immunol.. 166. 3771-3779 (2001)
• [文献書誌] Kouro, T., et al.: "Bruton's tyrosine kinase (Btk) is required for signaling the CD79b-mediated pro-B to pre-B cell transition"Int.Immunol.. 13. 485-493 (2001)
• [文献書誌] Agematsu, K., et al.: "Complete arrest from pro-to pre-B cells in a case of B cell-negative severe combined immunodeficiency (SCID) without recombinase activating gene (RAG) mutations"Clin.Exp.Immunol. 124. 461-464 (2001)
• [文献書誌] Kinoshita, T., et al.: "Oncostatin M suppresses generation of lymphoid progenitors in fetal liver by inhibiting the hepatic microenvironment"Exp.Hematol.. 299. 1091-1097 (2001)
• [文献書誌] Kubo, S., et al.: "Drastic up-regulation of high affinity IgE receptor on mast cells is induced by IgE binding through stabilization and accumulation of the receptor on the cell surface"J.Immunol.. 167. 3427-3434 (2001)
• [文献書誌] Stephan, R. P.: "Analysis of VpreB expression during B lineage differentiation in lambda5-deficient mice"J.Immunol. 167. 3734-3739 (2001)
• [文献書誌] Wang, Y-H., et al.: "Differential surrogate light chain expression governs B cell differentiation"Blood. (in press). (2002)
• [文献書誌] Honda, K., et al.: "Molecular basis for hematopoietic/mesenchymal interaction during initiation of Peyer's patch organogenesis"J.Exp.Med.. 193. 621-630 (2001)
• [文献書誌] Agata, Y., et al.: "Histone acetylation determines the developmentally regulated accessibility for T cell receptor-γ gene recombination"J.Exp.Med.. 193. 873-879 (2001)
• [文献書誌] Lee, H.-C., et al.: "Induction of germline transcription in the human T cell receptor γ locus by STAT5"J.Immunol.. 167. 320-326 (2001)
• [文献書誌] Ohba, Y., et al.: "Requirement for C3G-dependent Rap1 activation for cell adhesion and embryogenesis"EMBO J. 20. 3333-3341 (2001)
• [文献書誌] Ye, S.-K., et al.: "Differential roles of cytokine receptors in the development of epidermal γ δ T Cells"J.Immunol.. 167. 1929-1934 (2001)
• [文献書誌] Fagarasan, S., et al.: "In situ class switching and differentiation to IgA-producing cells in the gut lamina propria"Nature. 413. 639-643 (2001)
• [文献書誌] Ye, S.-K., et al.: "The IL-7 receptor controls the accessibility of the TCR γ locus by Stat5 and histone acetylation"Immunity. 15. 813-823 (2001)
• [文献書誌] Lee, H.-C., et al.: "Seeding of dendritic epidermal T cells in the neonatal skin is reduced in 129 strain of mice"Immunol.Lett.. (in press). (2002)
• [文献書誌] Sakamoto, M., et al.: "Maternal germilne mosaicism of X-linked agammaglobulinemia"Am.J.Med Genet.. 99. 234-237 (2001)
• [文献書誌] Baba, Y. et al.: "BLNK mediates Syk-dependent Btk activation"Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 98. 2582-2586 (2001)
• [文献書誌] Usui, K., et al.: "Reccurent pneumonia with mild hypogammaglobulinemia diagnosed as X-linked agammaglobulinemia in adults"Respir.Res.. 2. 188-192 (2001)
• [文献書誌] Joe, E-K., et al.: "Characterization of mutations, including a novel regulatory defect in the first intron, in Bruton's tyrosine kinase (Btk) gene from seven Korean X-linked agammaglobulinemia families"J.Immunol.. 167. 4038-4045 (2001)
• [文献書誌] Tsukada, S., et al.: "Btk and BLNK in B cell development"Adv.Immunol.. 77. 123-162 (2001)
• [文献書誌] Kanegane, H., et al.: "Clinical and genetic characteristics of hypogammaglobulinemic males with Btk mutations detected by flow cytometric assay combined with genetic analysis"J.Allergy.Clin.Immunol.. 108. 1012-1020 (2001)
• [文献書誌] Futatani, T., et al.: "Bruton's tyrosine kinase is present in normal platelets and its absence identifies patients with X-linked agammaglobulinemia and carrier females"Br.J.Haematol.. 114. 141-149 (2001)
• [文献書誌] Wang, Y., et al.: "Bruton's tyrosine kinase gene mutations in Turkish patients wuth presumed X-linked agammaglobulinemia"Hum.Mutat.. 18. 356 (2001)
• [文献書誌] Watanabe, D., et al.: "Four tyrosine residues in phospholipase C-gamma2, identified as Btk-dependent phodphorylation sites, are required for B cell antigen receptor-coupled calcium signaling"J.Biol.Chem.. 276. 38595-38601 (2001)
• [文献書誌] Wang, J.-W., et al.: "SHIP influences the NK repertoire and allogeneic marrow transplantation"Science. (In press). (2002)
• [文献書誌] Toyama-Sorimachi, N., et al.: "Activating and inhibitory immunoglobulin-like receptors"Springer-Verlag(分担分). 5 (2001)
• [文献書誌] Maki, K., et al.: "Activating and inhibitory immunoglobulin-like receptors"Springer-Verlag(分担分). 6 (2001)
• [文献書誌] Maki,K., et al.: "Immunoglobulin β signaling regulates locus accessibility for ordered Ig gene rearrangements."J.Exp.Med.. 191. 1333-1340 (2000)
• [文献書誌] Nomura,K., et al.: "Genetic defect in human X-linked agammaglobulinemia impedes a maturational evolution of pro-B cells into a later stage of pre-B cells in the B-cell differentiation pathway."Blood. 96. 610-617 (2000)
• [文献書誌] Kurosaki,T.and Tsukada,S.: "Connecting Syk and Btk to calcium signals."Immunity. 12. 1-5 (2000)
• [文献書誌] Baba,Y., et al.: "BLNK mediates Syk-dependent Btk activation."Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. (In press).
• [文献書誌] Agata,Y., et al.: "Histone acetylation determines the developmentally regulated accessibility for T cell receptor-γ gene recombination."J.Exp.Med.. (In press).
• [文献書誌] Toyama-Sorimachi,N., et al.: "Mouse CD94 participates in Qa-1-mediated self recognition by NK cells and delivers inhibitory signals independent of Ly-49."J.Immunol.. (In press).