XPG欠損マウスを用いたヌクレオチド除去修復と塩基除去修復の相互作用の解析

• 研究課題/領域番号: 12143208
• 研究種目: 特定領域研究
• 配分区分: 補助金
• 審査区分: 生物系
• 研究機関: 独立行政法人放射線医学総合研究所
• 研究代表者: 塩見 忠博 独立行政法人放射線医学総合研究所, 低線量生体影響プロジェクト, 研究員 (40162573)
• 研究分担者: 高萩 真彦 独立行政法人放射線医学総合研究所, 低線量生体影響プロジェクト, 研究員 (30260235) ; 森 雅彦 独立行政法人放射線医学総合研究所, 放射線障害研究グループ, 研究員 (30270614) ; 小池 学 放射線医学総合研究所, 放射線障害研究グループ, 研究員 (70280740) ; 原田 良信 放射線医学総合研究所, 第2研究グループ, 研究員 (90192707)
• 研究期間 (年度): 2000 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 23,700千円 (直接経費: 23,700千円); 2004年度: 5,400千円 (直接経費: 5,400千円); 2003年度: 5,500千円 (直接経費: 5,500千円); 2002年度: 6,400千円 (直接経費: 6,400千円); 2001年度: 6,400千円 (直接経費: 6,400千円)
• キーワード: 色素性乾皮症 A群 / 色素性乾皮症 G群 / 二重変異マウス / 疾患モデルマウス / ヌクレオチド除去修復 / 塩基除去修復 / 早期死亡 / 色素性乾皮症G群 / 老化 / ノックイン / 色素性乾皮症 / 突然変異 / 造血細胞系 / 骨髄キメラ

研究概要

色素性乾皮症(XP)G群患者では成長阻害や早期死亡を特徴とするコケイン症候群(CS)を併発する場合がある。CS発症に関係するXpg領域を特定するためエクソン15を欠損したXpgΔexl5、811番目のアミノ酸(アスパラギン酸)をストップコドンあるいはアラニンに置き換えたXpgD811stopとXpgD811Aの3系統の変異マウスを作製した。XpgD811stopでは明らかな成長阻害がみられ早期(誕生後約4週間以内)に死亡したが、他の2系統のマウスでは成長阻害はみられなかった。成長阻害のみられなかった2系統のマウスではヌクレオチド除去修復能(NER)が部分的に残されていたので、NER完全欠損のXpaヌルマウスと交配し、NER活性を失った二重変異マウスを作出した。これらの二重変異マウスでは、ともにNER活性は失っていたが、エクソン15欠損マウスとの二重変異マウスのみCSの症状を示した。このことからCSを発症するためには、NER活性を完全に消失することとXpgのエクソン15(C末183アミノ酸に相当)を欠損することが必要であることが明らかになった。

研究成果

• [雑誌論文] Severe growth retardation and short life span of double-mutant mice lacking Xpa and exon 15 of Xpg (2005)
  • 著者名/発表者名: Shiomi, N., Mori, M., Kito, S., Harada, Y-N., Tanaka, K., Shiomi.T
  • 雑誌名: DNA Repair 4 ページ: 351-357
  • NAID: 130006999900
• [雑誌論文] Nucleosomal structure of undamaged DNA regions suppresses the non-specific DNA binding of the XPC complex (2005)
  • 著者名/発表者名: Yasuda, T., Sugasawa, K., Shimizu, Y., Iwai, S., Shiomi.T., Hanaoka, F.
  • 雑誌名: DNA Repair 4 ページ: 389-395
• [雑誌論文] Identification of the XPG region that causes the onset of Cockayne syndrome using Xpg mutant mice generated by the cDNA-mediated knock-in method (2004)
  • 著者名/発表者名: Shiomi, N., Kito, S., Oyama, M., Matsunaga, T., Harada, Y-N., Ikawa, M., Okabe, M., Shiomi T.
  • 雑誌名: Molecular and Cellular Biology 24(9) ページ: 3712-3719
• [文献書誌] N.Shiomi, S.Kito, M.Oyama, T.Matsunaga, Y-N.Harada, M.Ikawa, M.Okabe, T.Shiomi: "Identification of the XPG region that causes onset of Cockayne syndrome using Xpg mutant mice generated by the cDNA-mediated knock-in method"Molecular and Cellular Biology. 24(9)(In press). (2004)
• [文献書誌] Seiji Kito, Yoshiko Noguchi, Yuki Ohta, Tatsuya Ohhata1, Masumi Abe, Naoko Shiomi, Tadahiro Shiomi: "Evaluation of Developmental Competence of Vitrified-warmed Early Cleavage Stage Embryos and their Application for Chimeric Mouse Production."Exp.Anim.. 52. 179-183 (2003)
• [文献書誌] Kito, S., Noguchi, Y., Ohta, Y., Ohhata, T., Abe, M., Shiomi, N., Shiomi, T.: "Evaluation of Developmental Competence of Vitrified-warmed Early Cleavage Stage Embryos and their Application for Chimeric Mouse Production"Experimental Animals. 52(2)(In press). (2003)
• [文献書誌] Shiomi, N., Hayashi, E., Sasanuma, S., Mita, K., Shiomi, T.: "Disruption of Xpg increases spontaneous mutation frequency,particularly A : T-to-C:G transversion"Mutation Research. 487. 127-135 (2001)
• [文献書誌] Koike M, Kuroiwa A, Koike A, Shiomi T, Matsuda Y.: "Expression and chromosome mapping of hamster Ku70 and Ku80.93"Cytogenetics and Cell Genetics. 93. 52-56 (2001)
• [文献書誌] Sun, X.-Z., Harada, Y.-N., Takahashi, S., Shiomi, N., Shiomi, T.: "Purkinje cell degeneration in mice lacking the xeroderma pigmentosum group G gene"J.Neurosci.Res.. 64. 348-354 (2001)
• [文献書誌] Koike, M., Shiomi, T., Koike, A.: "Dimerization and nuclear localization of Ku proteins"J.Biol.Chem.. 276. 11167-11173 (2001)
• [文献書誌] 小池,塩見,小池: "Ku70 can translocate to the nucleus independent of Ku80 translocation and DNA-PK autophosphorylation"Biochem.Biophys.Res.Comm.. 276. 1105-1111 (2000)