| 研究概要 |
本研究の主要な研究目的は,DNA損傷に対する細胞応答における,ATM(Ataxia Telangiectasia Mutated)蛋白,ATMの上流と下流に働いている蛋白,およびATMファミリーのATRの役割を明らかにすることである.これらの蛋白の機能を細胞レベルで明らかにする目的で,我々はトリB細胞株(DT40)を用いて遺伝子をノックアウトする方法を用いた.この方法により,我々は,p53はATMの重要な標的因子の一つではあるが,多くのATMの重要な機能はp53に依存していないことを明らかにした.また,二重ノックアウト細胞を用いることにより,我々は,ATMのもう一つの重要な標的因子のc-Ablは,放射線によって誘導されたアポトーシスに重要な役割を果たしているが,ゲノム維持におけるATMの機能には必須ではないことも明らかにした.最後に,我々は,DNA損傷以外に活性酸素種に対する細胞応答にもATMが重要な役割を果たしていることを明らかにした.今後我々は,differential display等の方法を用いて,ATMの下流の標的因子の同定を進める.さらに,ATMノックアウト細胞に種々のATM変異体を導入し,その表現型を調べることにより,ATMの新しい機能ドメインを同定したいと考えている.また,活性酸素種に対するATMの保護的役割についての研究をさらに進め,Ataxia Telangiectasia患者での高発がんや小脳のプルキンエ細胞アポトーシスとATMとの関連を分子レベルで明らかにしたいと考えている.最後に,ATRの機能についても研究を進めたいと考えているが,ATRのノックアウトが致死的であったため,conditionalノックアウトや,温度感受性変異体のノックインを試みている.
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