| 研究課題/領域番号 |
12215150
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| 研究種目 |
特定領域研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 審査区分 |
生物系
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| 研究機関 | 日本医科大学 |
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研究代表者 |
坂本 長逸 日本医科大学, 医学部, 教授 (30196092)
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| 研究期間 (年度) |
2000
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| 研究課題ステータス |
完了 (2000年度)
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| 配分額 *注記 |
4,600千円 (直接経費: 4,600千円)
2000年度: 4,600千円 (直接経費: 4,600千円)
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| キーワード | fomoregulin / 胃癌細胞 / 胃線維芽細胞 / erbB2 / EGF受容体 / follistatin |
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| 研究概要 |
(1)TRのerbBリン酸化作用の解析
sf9細胞にTRcDNAを導入して、培養上清からTRモノクローナル抗体を用いてTR全長を精製した。精製TR細胞外ドメインは胃癌細胞株MKN28やerbB4を高発現させたCHO-erbB4のerbB4チロシンリン酸化を刺激するが、EGF受容体、erbB2、erbB3のリン酸化は刺激しなかった。TRのMKN28胃癌細胞erbB4リン酸化刺激作用は極めて弱いため、erbB4を高発現するその他の癌細胞株を用いて検討したが、これまでの所充分なerbB4のリン酸化刺激作用を認めていない。follistatinドメインによるEGFドメインに対する修飾作用を考慮して、TR-EGFドメインの作用を解析するためTR-EGFドメインcDNAのsf9細胞、COS7細胞への導入を試みているが、未だ充分なEGFドメインの精製に成功していない。
(2)TRのMKN-1胃癌細胞増殖抑制作用の解析
全長TRはerbB4のリン酸化刺激作用を認めないMKN1胃癌細胞株のDNA合成、及び細胞増殖を抑制する。この作用はerbB4のリン酸化が観察されないので、follistatinドメインを介する可能性を考え、follistatinドメインの精製を試みた。follistatinドメインcDNAをsf9細胞に導入しfollistatinドメインに対するモノクローナル抗体を用いて培養上清からfollistatinドメインを精製した。現在、follistatinドメインの細胞増殖に対する作用を観察中である。
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