ムチン分子を標的とした上皮性腫瘍の免疫遺伝子療法

• 研究課題/領域番号: 12217097
• 研究種目: 特定領域研究
• 配分区分: 補助金
• 審査区分: 生物系
• 研究機関: 山口大学
• 研究代表者: 日野田 裕治 山口大学, 医学部, 教授 (10165128)
• 研究分担者: 山本 光太郎 山口大学, 医学部, 助手 (50304481) ; 濱中 裕一郎 山口大学, 医学部, 助教授 (40189618) ; 萱野 幸三 山口大学, 医学部, 助手 (90314799) ; 石田 禎夫 札幌医科大学, 医学部, 助手 (20305220)
• 研究期間 (年度): 2000 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 57,800千円 (直接経費: 57,800千円); 2004年度: 11,100千円 (直接経費: 11,100千円); 2003年度: 11,100千円 (直接経費: 11,100千円); 2002年度: 11,000千円 (直接経費: 11,000千円); 2001年度: 12,600千円 (直接経費: 12,600千円); 2000年度: 12,000千円 (直接経費: 12,000千円)
• キーワード: RHAMM / mRNA / dendritic cells / MHC class II / cancer immunotherapy / 樹状細胞 / TRP2 / B16 / EGFP / EL4 / ELISPOT / 免疫遺伝子療法 / MUC1 / ペプチドワクチン / CTL / リポソーム / 膵癌 / O-glycan / GalNAc transferase

研究概要

RHAMM (receptor for hyaluronan-mediated motility) mRNAを腫瘍抗原として樹状細胞療法の基礎的検討を行った。本mRNAはマウスの5種類の腫瘍細胞全てで発現していたが、正常組織では胸腺を除いて発現を認めなかった。RHAMMは細胞質内蛋白であるため、MHC class IIによる提示効率を高める目的でTRP-2との融合mRNAを作成した。RHAMM mRNA導入樹状細胞で免疫したマウスの脾細胞には明らかな殺細胞活性が誘導された。この誘導効果は抗CD4抗体投与で消失したが、抗CD8抗体は影響しなかった。EL4皮卞腫瘍(3日モデル)に対しても顕著な増殖抑制効果が観察されたが、この場合も抗CD8抗体ではなく、抗CD4抗体投与によってのみ治療効果が消失した。これらの結果から、本治療モデルにおいてはCD4+T細胞が抗腫瘍効果を発揮していることが示唆された。mRNA導入樹状細胞の臨床試験については、GMP基準準拠のcell processing center (CPC)で実施すべく手順書の作成が順調に進んでいる。さらに、胃癌および大腸癌において、細胞株・臨床検体のいずれにおいても高率にclass II transactivator (CIITA)遺伝子のメチル化が生じていることを明らかにした。このメチル化は5-azacytidineなどの脱メチル化剤によって解除できることから、class II陰性腫瘍のうちCIITAのメチル化が証明される場合は、脱メチル化剤併用免疫療法が有効である可能性がある。

研究成果

• [雑誌論文] Therapeutic effect of dendritic cells loaded with a fusion mRNA encoding tyrosinase-related protein 2 and enhanced green fluorescence protein on B16 melanoma. (2004)
  • 著者名/発表者名: Fukui M. et al.
  • 雑誌名: Tumor Biol. 25 ページ: 252-257
• [雑誌論文] Monoclonal antibodies as effective therapeutic agents for solid tumors. (2004)
  • 著者名/発表者名: Hinoda Y. et al.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 95 ページ: 621-625
  • NAID: 80016809427
• [雑誌論文] The current status and issues concerning monoclonal antibody therapy. (2004)
  • 著者名/発表者名: Hinoda Y.
  • 雑誌名: Bull.Yamaguchi Med.School 51 ページ: 41-50
  • NAID: 120000863927
• [雑誌論文] Epigenetic inactivation -of class II transactivator (CIITA) is associated with the absence of interferon-gamma-induced HLA-DR expression in colorectal and gastric cancer cells. (2004)
  • 著者名/発表者名: Satoh A. et al.
  • 雑誌名: Oncogene 23 ページ: 8876-8886
• [雑誌論文] Epigenetic inactivation of the SFRP's complements genetic alterations to allow constitutive WNT pathway signaling in human colorectal cancer. (2004)
  • 著者名/発表者名: Suzuki H. et al.
  • 雑誌名: Nature Genet. 36 ページ: 417-422
• [文献書誌] Okano K. et al.: "Evaluation of a mRNA lipofection procedure for human dendritic cells and induction of cytotoxic T lymphocytes against enhanced green fluorescence protein."Tumor Biol.. 24. 317-324 (2003)
• [文献書誌] Hamanaka Y. et al.: "Circulating anti-MUC1 IgG antibodies as a favorable prognostic factor for pancreatic cancer."Int.J.Cancer.. 103. 97-100 (2003)
• [文献書誌] Hinoda Y. et al.: "Increased expression of MUC1 in advanced pancreatic cancer."J.Gastroenterol.. 38. 1162-1166 (2003)
• [文献書誌] Nohara H. et al.: "Association between the interleukin-1 receptor antagonist polymorphism and ulcerative colitis with younger age at diagnosis."Immunol.Lett.. 90. 53-57 (2004)
• [文献書誌] Suzuki H. et al.: "Epigenetic inactivation of the SFRP's complements genetic alterations to allow constitutive WNT pathway signaling in human colorectal cancer."Nature Genet.. (in press). (2004)
• [文献書誌] Hamanaka T. et al.: "Circulating anti-MUC1 IgG antibodies as a favorable prognostic factor for pancreatic cancer. 103:97-100, 2003"Int. J. Cancer. 103. 97-100 (2003)
• [文献書誌] Kodama H et al.: "Specific and effective targeting cancer immunotherapy with a combination of three bispecific antibodies"Immunology Lett. 81. 99-106 (2002)
• [文献書誌] Satoh Y et al.: "Expression of CD66a in multiple myeloma"J. Clin. Lab. Anal.. 16. 79-85 (2002)
• [文献書誌] Okayama N et al.: "Simple genotype analysis of the Asp299Gly polymorphism of the Toll-like receptor-4 gene that is associated with lipopolysaccharide hyporesponsiveness"J. Clin. Lab. Anal.. 16. 56-58 (2002)
• [文献書誌] Nohara H et al.: "Polymorphisms of the IL-1β and IL-1β-inducible genes in Ulcerative colitis"J. Gastroenterol.. 37:Suppl XIV. 107-110 (2002)
• [文献書誌] Hinoda Y et al.: "Association of Functional Polymorphisms of the Matrix Metalloproteinase (MMP)-1 and MMP-3 Genes with Colorectal Cancer"Int. J. Cancer. 102. 526-529 (2002)
• [文献書誌] Kodama H. et al.: "Specific and effective targeting cancer immunotherapy with a combination of three bispecific antibodies"Immunology Lett.. 81. 99-106 (2002)
• [文献書誌] McDermott K.M. et al.: "Overexpression of MUC1 reconfigures the binding properties of tumor cells"Int. J. Cancer. 94. 783-791 (2001)
• [文献書誌] Kodama H. et al.: "Mutated SEA-D227A-conjugated antibodies greatly enhance antitumor activity against MUC1-expressing bile duct carcinoma"Cancer Immunol. Immunother.. 50. 539-548 (2001)
• [文献書誌] Hayashi T. et al.: "MUC1 Mucin core protein binds to the domain 1 of ICAM-1"Digestion. 63 Suppl. 87-92 (2001)
• [文献書誌] McDermott KM et al.: "Overexpression of MUC1 reconfigures the binding properties of tumor cells."Int J Cancer. (in press). (2001)
• [文献書誌] Hayashi T et al.: "MUC1 Mucin core protein binds to the domain 1 of ICAM-1."Digestion. 63 Suppl S1. 87-92 (2001)
• [文献書誌] Hayashi T et al.: "Mucins and immune reactions to mucins in ulcerative colitis."Digestion. 63 Suppl S1. 28-31 (2001)
• [文献書誌] Satoh S et al.: "Enhancement of metastatic properties of pancreatic cancer cells by transfer of MUC1 gene encoding an anti-adhesion molecule."Int J Cancer. 88. 507-518 (2000)