メラノーマに対する新しい免疫療法の開発

• 研究課題/領域番号: 12217132
• 研究種目: 特定領域研究
• 配分区分: 補助金
• 審査区分: 生物系
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 河上 裕 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50161287)
• 研究分担者: 藤田 知信 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (20199334) ; 松崎 ゆり子 (鈴木 ゆり子) 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (40255435) ; 桜井 敏晴 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (20101933) ; 塚本 真 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (50365441) ; 住本 秀敏 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (00306838) ; 千葉 滋 東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (60212049)
• 研究期間 (年度): 2000 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 91,000千円 (直接経費: 91,000千円); 2004年度: 16,500千円 (直接経費: 16,500千円); 2003年度: 16,700千円 (直接経費: 16,700千円); 2002年度: 14,000千円 (直接経費: 14,000千円); 2001年度: 19,800千円 (直接経費: 19,800千円); 2000年度: 24,000千円 (直接経費: 24,000千円)
• キーワード: 腫瘍抗原 / メラノーマ / T細胞 / 樹状細胞 / 免疫療法 / 網羅的遺伝子解析 / siRNA / DNAクローニング / DNAチップ / SAGE / SEREX / レンチウイルス / 癌抗原 / 色素細胞 / 慢性骨髄性白血病 / ペプチド

研究概要

本研究は、メラノーマにおける腫瘍抗原の同定、免疫応答の解析、免疫療法の実施と評価などを行うことにより、メラノーマに対する免疫療法の開発を目指す。本年度は、網羅的遺伝子解析法として、cDNAチップ解析によりメラノーマ高発現分子Skp-2を、CGH(comparative genomic hybridization)解析によりメラノーマ高発現分子BRAFを同定し、BRAFはメラノーマ患者に免疫原性をもつ腫瘍抗原であることを明らかにした。さらに、新たに開発したヘアピンタイプsiRNA組換えウイルス(レンチ・アデノウイルスベクター)を用いて、BRAFとSkp-2が内在性にメラノーマの増殖浸潤に関与すること、また、免疫療法だけでなく遺伝子治療や分子標的治療の標的になることを明らかにした。特に両者の同時阻害により強力な抗腫瘍効果が得られることを明らかにした。また、前年度までに同定したメラノーマ抗原PAX3、FCRL/FREB、CAGEにおいて、日本人に頻度の高いHLA-A24に結合するT細胞エピトープを、新規HLA-A24結合ペプチド予測アルゴリズムとHLA-A24遺伝子導入マウスを用いた方法により同定した。既知のメラノーマ抗原T細胞エピトープと今回同定したT細胞エピトープにおいて、3つの予測プログラムの比較をしたところ、本ペプチド予測プログラムは、従来のプログラムに比較して、効率よくHLA-A24結合性T細胞エピトープを同定できる可能性が示唆された。第IV期メラノーマ患者に対するHLA-A24結合性gp100ペプチドの単独免疫の臨床試験では、安全性、免疫誘導能、一部で抗腫瘍効果が認められたので、次の段階として、本年度からIL2を併用したgp100ペプチド免疫の臨床試験を開始しているが、現在までに、重篤な有害事象なく、1例で免疫誘導効果と抗腫瘍効果が認められている。

研究成果

• [雑誌論文] Genomic alterations in primary cutaneous melanomas detected by metaphase comparative genomic hybridization with laser capture or manual microdissection:6p gains may predict poor outcome. (2005)
  • 著者名/発表者名: Namiki T, Kawakami Y, et al.
  • 雑誌名: Cancer Gene Cytogenetics 157 ページ: 1-11
• [雑誌論文] Novel melanoma antigen, FCRL/FREB, identified by cDNA profile comparison using DNA chip are immunogenic in multiple melanoma patients. (2005)
  • 著者名/発表者名: Inozume T, Kawakami Y, et al.
  • 雑誌名: Int J Cancer 114 ページ: 283-290
• [雑誌論文] Gene therapy for human small cell lung carcinoma by inactivation of Skp-2 with virally mediated RNA interference. (2005)
  • 著者名/発表者名: Sumimoto H, Kawakami Y, et al.
  • 雑誌名: Gene Ther 12 ページ: 95-100
• [雑誌論文] Systematic identification of human melanoma antigens using serial analysis of gene expression (SAGE). (2005)
  • 著者名/発表者名: Matsuzaki Y, Kawakami Y, et al.
  • 雑誌名: J Immunother 28 ページ: 10-19
• [雑誌論文] Optimization of a siRNA-expression system with an improved hairpin and its significant suppressive effects in mammalian cells. (2004)
  • 著者名/発表者名: Miyagishi M, Kawakami Y, et al.
  • 雑誌名: J Gene Med 6 ページ: 715-723
• [雑誌論文] Augmentation of Antitumor Immune Responses by Multiple Intratumoral Inoculations of Replication-Conditional HSV and Interleukin-12. (2004)
  • 著者名/発表者名: Iizuka Y, Kawakami Y, et al.
  • 雑誌名: J Immunother 27 ページ: 92-98
• [雑誌論文] Involvement of overexpressed wild-type BRAF in the growth of malignant melanoma cell lines. (2004)
  • 著者名/発表者名: Tanami H, Kawakami Y, et al.
  • 雑誌名: Oncogene 23 ページ: 8796-8804
• [雑誌論文] Inhibition of growth and invasive ability of melanoma by inactivation of mutated BRAF with lentivirus-mediated RNA interference. (2004)
  • 著者名/発表者名: Sumimoto H, Kawakami Y, et al.
  • 雑誌名: Oncogene 23 ページ: 6031-6039
• [産業財産権] Skp-2発現抑制を利用した癌の治療 (2004)
  • 発明者名: 住本 秀敏, 河上 裕, 宮岸 真, 田比良 和誠
  • 権利者名: 住本 秀敏, 河上 裕, 宮岸 真, 田比良 和誠
  • 出願年月日: 2004-03-31
• [文献書誌] Ito K., Kawakami Y., et al.: "Identification of novel bladder cancer antigen, human lipoic acid synthetase, recoginized by antibodis in serum of a patient with metastatic bladder cancer."Int.J.Cancer.. 108. 712-724 (2004)
• [文献書誌] Ueda R., Kawakami Y., et al.: "Identification of a human glioma antigen, SOX6, recognized by patients' sera."Oncogene.. 22. 8823-8834 (2004)
• [文献書誌] Iizuka Y., Kawakami Y., et al.: "Multiple in situ cancer vaccinations with herpes simplex virus and IL-12 synergize to facilitate tumor regression."J Immunother.. 27. 92-98 (2004)
• [文献書誌] Nagayama H., Kawakami Y., et al.: "Aberrant development of monocvyte-derived dendritic obtained from advanced melanoma patients : Results of phase I clinical trail of immunotherapy with tumor lysate-pulsed monocyte-derived dendritic cells plus IL2 for stage IV malignant melanoma patients."Melanoma Res.. 13. 521-530 (2003)
• [文献書誌] Ishikawa T., Kawakami Y., et al.: "Tumor-specific Immunological Recognition of Frameshift-mutated Peptidesan Colon Cancer with Microsatellite Instability."Cancer Res.. 63. 5564-5572 (2003)
• [文献書誌] Kawakami Y.: "Identification of Human Tumor Antigens Recognized by T-cells and Their Use for Immunotherapy."Int.J.Hematol.. 77. 427-434 (2003)
• [文献書誌] Matsushita M., Kawakami Y., et al.: "Molecular Diagnosis of Cancer"Humana press. (in press). (2004)
• [文献書誌] Toda M., Kawakami Y., et al.: "Immuno-Viral Therapy of Brain Tumors by Combination of Viral Therapy with Cancer Vaccination Using a Replication-Conditional HSV"Cancer Gene Ther.. 9. 356-364 (2002)
• [文献書誌] Sumimoto H., Kawakami Y., et al.: "Rapid and efficient generation of lentivirally gene modified dendritic cells from DC progenitors with bone marrow stromal cells"J Immunological Methods. 271. 153-165 (2002)
• [文献書誌] Matsushita M., Kawakami Y., et al.: "Preferentially Expressed Antigen of Melanoma (PRAME) in the Development of Diagnostic and Therapeutic Methods for Hematological Malignancies"Leukemia and Lymphoma,. 44・3. 439-444 (2003)
• [文献書誌] Endo T., Kawakami Y., et al.: "In Situ Cancer Vaccination with a Replication-Conditional HSV for the Treatment of Liver Metastasis of Colon Cancer"Cancer Gene Ther.. 9. 142-148 (2002)
• [文献書誌] Kuwana M., Kawakami Y., et al.: "Identification of an immunodominant epitope on RNA polymerase III recognized by systemic sclerosis sera : application to enzyme-linked immunosorbent assay"Arthritis Rheum.. 46・10. 2742-2747 (2002)
• [文献書誌] Yoshida K., Kawakami Y., et al.: "Restricted T cell receptor b-chain usage by T cells autoreactive to b2-glycoprotein I in patients with antiphospholipid syndrome"Blood. 99・7. 2499-2504 (2002)
• [文献書誌] Kawakami Y.: "Human melanoma antigens recognized by CD8+ T cells, in "Tumor Antigens Recognized by T cells and Antibodies""Taylor & Francis. 28 (2003)
• [文献書誌] Kiniwa Y, Kawakami Y, et al.: "Tumor antigens isolated from a patient with vitiligo and T-cell-infiltrated melanoma"Cancer Res.. 61. 7900-7907 (2001)
• [文献書誌] Kawakami Y, et al.: "Isolation of a new melanoma antigen, MART-2, containing a mutated epitope recognized by autologous tumor infiltrating T lymphocytes"J Immunolgy. 166. 2871-2877 (2001)
• [文献書誌] Kageshita T, Kawakami Y, et al.: "Clinical significance of MART-1 and HLA-A2 expression and CD8+ T cellinfiltration in melanocytic lesions in HLA-A2 phenotype patients"J Dermatol Science. 25. 36-42 (2001)
• [文献書誌] Kuwana M, Kawakami Y, et al.: "Induction of antigen-specific human CD4+ T cell anergy by peripheral blood DC2 precursors"Eur.J.Immunol. 31・9. 2547-2557 (2001)
• [文献書誌] Kuwana M, Kawakami Y, et al.: "Immunodominant epitopes on glycoprotein IIb-IIIa recognized by autoreactive T cells in patients with immune thrombocytopenic purpura"Blood.. 98・1. 130-139 (2001)
• [文献書誌] Arai T, Kawakami Y, et al.: "Autoreactive CD4+ T cell clones to β2-glycoprotein I in patients with antiphospholipid syndrome : preferential recognition of the major phospholipid-binding site"Blood.. 98・6. 1889-1896 (2001)
• [文献書誌] Kawakami,Y. et al.: "Recognition of shared melanoma antigens in association with major HLA-A alleles By tumor infiltrating T lymphocytes from 123 patients with melanoma."J.Immunother.. 27. 17-27 (2000)
• [文献書誌] Kawakami,Y. et al.: "T cell responses to melanoma and melanocytes."Pigment Cell Research. 13. 163-169 (2000)
• [文献書誌] Kawakami,Y. et al.: "Isolation of a new melanoma antigen, MART-2, containing a mutated epitope recognized by autologous tumor infiltrating T lymphocytes."J Immunol.. 166. 2871-2877 (2001)
• [文献書誌] Toda,M.,Kawakami,Y. et al.: "Expression of the Neural RNA-Binding Protein Musashil in Human Gliomas."Glia. (in press).
• [文献書誌] M.Matsushita,Kawakami,Y.: "Quantitative monitoring of the PRAME gene for the detection of minimal residual disease in leukaemia."Br J Heamatology.. (in press).
• [文献書誌] Chiba,S. et al.: "Binding of Delta1, Jagged1, and Jagged2 to Notch2 rapidly induces cleavage, nuclear translocation, and hyperphosphorylation of Notch2."Mol Cell Biol. 20. 6913-6922 (2000)
• [文献書誌] Takahashi T,Chiba S, et al.: "Immunogene therapy against mouse leukemia using B7 molecules."Cancer Gene Therapy. 7. 144-150 (2000)
• [文献書誌] Tanaka Y,Chiba.S. et al.: "Generation of HLA-DRB1^*1501-restricted p190 minor bcr-abl (ela2) -specific CD4+ t-lymphocytes."Br J Haematol. 109. 435-437 (2000)