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光電変換インターカレータ分子による遺伝子検出とDNAアレイ法への展開

研究課題

研究課題/領域番号 12305054
研究種目

基盤研究(A)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 工業分析化学
研究機関九州大学

研究代表者

高木 誠  九州大学, 大学院・工学研究院, 教授 (90037739)

研究分担者 野島 高彦  九州大学, 大学院・工学研究院, 助手 (00291930)
中村 成夫  宮崎大学, 工学部, 助教授 (00264078)
竹中 繁織  九州大学, 大学院・工学研究院, 助教授 (60188208)
研究期間 (年度) 2000 – 2002
研究課題ステータス 完了 (2002年度)
配分額 *注記
23,960千円 (直接経費: 20,600千円、間接経費: 3,360千円)
2002年度: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円)
2001年度: 9,620千円 (直接経費: 7,400千円、間接経費: 2,220千円)
2000年度: 9,400千円 (直接経費: 9,400千円)
キーワード光電流 / 遺伝子検出 / DNAチップ / インターカレータ / ルテニウム錯体 / 縫い込み型
研究概要

本研究では、光電変換という新しい手法によるDNA検出の基礎技術の確立を目指すとともに、さらなる高感度化をはかる。DNAの検出は原理的には、ターゲットDNAとそれに相補的なDNAプローブによる二本鎖の特異的形成を利用する。
まず、光電変換部位であるルテニウム錯体をもつインターカレータ分子Ru^<II>(bpy)_2dppzを合成した。これを用いて、DNAの二本鎖形成時の光電流変化を測定したところ、DNAが二本鎖を組んだときに光電流が増加した。これは、DNA二本鎖に親和性を持つ光電変換インターカレータが、電極表面に濃縮された結果と考えられる。
次に、より二本鎖選択性を高めるために、ルテニウム錯体を分子内に含む縫い込み型インターカレータを設計し、合成した。このような化合物はDNAインターカレート部位の両側にかさ高い置換基を有するため、いったん二本鎖DMに結合すると解離速度が著しく遅くなる。ナフタレンジイミドを基本骨格とし、アミド結合によりRu(bpy)_3型のルテニウム錯体をつないだNDI-Ru_2を合成した。
ルテニウム錯体の二本鎖検出能を比較したところ、Ru(bpy)_3では二本鎖形成時の光電流増幅はまったく見られなかったが、Ru(bpy)_2dppzでは36%の増幅が見られた。さらにNDI-Ru_2を用いた場合、86%の電流増幅が起こった。NDI-Ru_2が高い電流増幅能を持っていることは、縫い込み型であることと同時に、分子内電子移動反応により効率が高まっていることによると考えている。

報告書

(4件)
  • 2002 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2001 実績報告書
  • 2000 実績報告書
  • 研究成果

    (27件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (27件)

  • [文献書誌] B.Juskowiak, et al.: "Fluorescence energy transfer study of interstrand DNA cross-linking caused by rigid bisintercalator"Supramolecular Chemistry. 14. 477-485 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Nakamura, et al.: "Light-to-electric conversion as a new method for DNA duplex detection"Analytical Sciences. 17. 431-432 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] B.Juskowiak, et al.: "Isomerization of DNA-bound distilbazolium ligand induced by electron transfer photoexcited tris(1,10-phenanthroline)Ru(II)"Photochemistry and Photobiology. 74. 391-400 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] A.Kumasaki, et al.: "A cyclic sugar unit interacts more strongly with DNA than do open-chain polyol coun erparts in sugar-linked synthetic DNA intercalators"Chemistry Letters. 2001. 370-371 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] B.Mathew, et al.: "Lipophilic peptide as novel sensory material for chiral amine recognition"Chemistry Letters. 2000. 1029-1030 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Kuboyama, et al.: "Lipophilic peptide as novel building material of molecular sensor"Chemistiy Letters. 2000. 552-553 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] B.Juskowiak, et al.: "Fluorescence energy transfer study of interstrand DNA cross-linking caused by rigid bisintercalator"Supramolecular Chemistry. 14. 477-485 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Nakamura, et al.: "Light-to-electric conversion as a new method for DNA duplex detection"Analytical Sciences. 17. 431-432 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] B.Juskowiak, et al.: "Isomerization of DNA-bound distilbazolium ligand induced by electron transfer photoexcited tris(1, 10-phenanthroline)Ru(II)"Photochemistry and Photobiology. 74. 391-400 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] A.Kumasaki, et al.: "A cyclic sugar unit interacts more strongly with DNA than do open-chain polyol counterparts in sugar-linked synthetic DNA intercalators"Chemistry Letters. 370-371 (2001)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] B.Mathew et al.: "Lipophilic peptide as novel sensory material for chiral amine recognition"Chemistry Letters. 1026-1027 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Kuboyama et al.: "Lipophilic peptide as novel building material of molecular sensor"Chemistry Letters. 552-553 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Yamashita, M.Takagi, H.Kondo, S.Takenaka: "Electrochemical detection of nucleic base mismatches with ferrocenyl naphthalene diimide"Analytical Biochemistry. Vol. 306. 188-196 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] H.Miyahara, K.Yamashita, M.Kanai, K.Uchida, M.Takagi, H.Kondo, S.Takenaka: "Electrochemical analysis of single nucleotide polymorphisms of p53 gene"Talanta. Vol. 56. 829-835 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] S.Sato, T.Nojima, M.Takagi, H.Kondo, S.Takenaka: "Synthesais of adamantly naphthalene diimide and its interaction with double stranded DNA"Nucleic Acids Research Supplement. 2. 213-214 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] S.Fujii, N.Okimoto, T.Ebisuzaki, T.Nojima, M.Takagi: "Molecular dynamics investigation of the double stranded oligonucleotide d(AT)6d(AT)6"Nucleic Acids Research Supplement. 2. 175-176 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] H.Torigoe, S.Sato, K.Yamashita, S.Okiba, T.Imanishi, S.Takenaka: "Binding of threading intercalator to nucleic acids : Thermodynamic analysis"Nucleic Acids Research Supplement. 2. 55-56 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] S.Takenaka: "Small Molecule DNA and RNA Binders : From Synthesis to Nucleic Acid"Wiley-VCH. 23 (2003)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] S.Nakamura et al.: "Light-to-Electric Conversion as a New Method for DNA Duplex Detection"Anal. Sci.. (in press).

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] H.Miyahara et al.: "Electrochemical array (ECA) as an integrated multi-electrode DNA sensor"Trans. IEE of Japan. 121-E・4. 187-191 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] S.Takenaka: "Highly sensitive probe for gene analysis by electrochemical approach"Bull. Chem. Soc. Jpn. 74・2. 217-224 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] K.Yamashita et al.: "Visualization of DNA micro arrays by scanning electrochemical microscopy (SECM)"Analyst. 126. 1201-1202 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] M, Takagi: "Threading intercalation to double-stranded DNA and the application to DNA sensing. Electrochemical array technique"Pure Appl. Chem.. 73・10. 1573-1577 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] S.Takenaka et al.: "Base mutation analysis by a ferrocenyl naphthalene diimide drivative"Nucleotides & Nucleic Acids. 20・4・7. 1429-1432 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] 竹中繁織: "分析化学便覧 h.DNAおよびRNA"丸善. 7 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] S.Takenaka et al.: "DNA Sensing on a DNA Probe-Modefied Electrode Using Ferrocenylnaphthalene Diimide as the Electrochemically Active Ligand"Analytical Chemistry. 72(6). 1334-1341 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] K.Yamashita et al.: "Electrochemical Detection of Base Pair mutation"Chemistry Letters. (9). 1038-1039 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書

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公開日: 2000-04-01   更新日: 2016-04-21  

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