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酵母ゴルジ体の機能制御のための分子機構解析

研究課題

研究課題/領域番号 12460040
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 応用微生物学・応用生物化学
研究機関東京大学

研究代表者

依田 幸司  東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (20143406)

研究分担者 野田 陽一  東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助手 (90282699)
足立 博之  東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (00211699)
研究期間 (年度) 2000 – 2002
研究課題ステータス 完了 (2002年度)
配分額 *注記
16,300千円 (直接経費: 16,300千円)
2002年度: 4,500千円 (直接経費: 4,500千円)
2001年度: 4,300千円 (直接経費: 4,300千円)
2000年度: 7,500千円 (直接経費: 7,500千円)
キーワード酵母 / 小胞輸送 / ゴルジ体 / 膜タンパク質 / 局在化機構 / sly1タンパク質 / Sed5タンパク質 / Tlg2タンパク質 / Sly1タンパク質 / GDP-mannose輸送体 / GDP-mannoseトランスポーター
研究概要

ゴルジ体は複数領域から成り、タンパク質は各領域で異なる修飾やプロセシングを受ける。従って、各領域の組成と成立ちは、ゴルジ体の働きを理解するのに極めて重要である。
初期領域のSed5タンパク質は輸送小胞がゴルジ体に融合するのに重要だが、N末端にSly1タンパク質が結合することを明らかにした。次いで、この結合で、ゴルジ体のSed5と輸送小胞のBet1間の複合体形成が促進されることを発見した。更に、温度感受性sec18変異とsly1変異間に合成致死性を発見し、sly1変異株でSed5-Bet1複合体が安定なことから、Sly1タンパク質が複合体の形成と解離をともに促進することを発見した。
膜蛋白質GDP-mannoseトランスポーターVig4は、C末端親水領域が初期領域局在に大きく関与していることを発見した。本領域を含むGST融合タンパク質がコートマー成分δ-COPと結合したので、配列をさまざまに変化させて検討し、多数存在するリジン残基の位置と数が重要なことを発見した。δ-COPとの結合が低下した配列をVig4に移すと、結合力低下に応じ液胞に誤輸送されるものが増えた。輸送の各種温度感受性変異株を用いて、Vig4が小胞体-ゴルジ体間をダイナミックに移動していることを確認した。
ゴルジ体由来の小胞をSed5並びにTlg2タンパク質の免疫沈降で分離し、初期並びに後期領域を構成する膜タンパク質を調べた。前者から40、後者から37のタンパク質を同定できた。糖転移酵素、小胞のコートタンパク質、ソーティングに関わるものは、それぞれの領域に特異的だが、低分子量Gタンパク質は、両画分にあって特異的でなかった。初期領域特異的なSvp26、後期領域に特異的なTvp38、Tvp23、Tvp18、Tvp15、両領域にみられるGvp36を新発見した。Tvpタンパク質は真核生物に広く保存され、相互作用がある。

報告書

(4件)
  • 2002 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2001 実績報告書
  • 2000 実績報告書
  • 研究成果

    (31件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (31件)

  • [文献書誌] K.Yoda, T.Kawada, C.Kaibara, A.Fujie, M.Abe, H.Hashimoto, J.Shimizu, N.Tomishige, Y.Noda, M.Yamasaki: "Defect in cell wall integrity of the yeast Saccharomyces cerevisiae caused by a mutation of the GDP-mannose pyrophosphorylase gene VIG9"Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 64(9). 1937-1941 (2000)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Yoda, Y.Noda: "Vesicular transport and the Golgi apparatus in yeast"Journal of Bioscience and Bioengineering. 91(1). 1-11 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Kosodo, K.Imai, A.Hirata, Y.Noda, A.Takatsuki, H.Adachi, K.Yoda: "Multicopy suppressors of the sly1 temperature-sensitive mutation in ER-Golgi vesicular transport in Saccharomyces cerevisiae"Yeast. 18(11). 1003-1014 (2001)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Kadokura, H.Kawasaki, K.Yoda, M.Yamasaki, K.Kitamoto: "Efficient export of alkaline phosphatase overexpressed from a multicopy plasmid requires degP, a gene encoding a periplasmic protease of Escherichia coli"Journal of General and Applied Microbiology. 47(3). 113-141 (2001)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J.-H.Cho, Y.Noda, H.Adachi, K.Yoda: "A novel membrane protein complex on the endoplasmic reticulum and early Golgi compartments in the yeast Saccharomyces cerevisiae"Bioscience, Biotechnol, and Biochemistry. 65(10). 2226-2232 (2001)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Inadome, Y.Noda, H.Adachi, K.Yoda: "A novel protein Mpm1 of the mitochondria of the yeast Saccharomyces cerevisiae"Bioscience, Biotechnol, and Biochemistry. 65(11). 2577-2580 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Kosodo, Y.Noda, H.Adachi, K.Yoda: "Binding of Sly1 to Sed5 enhances formation of the yeast early Golgi SNARE complex"Journal of Cell Science. 115(18). 3683-3961 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Imai, T.Kijima, Y.Noda, K.Sutoh, K.Yoda, H.Adachi: "A Rho GDP-dissociation inhibitors is involved in cytokinesis of Dictyostelium"Biochemical and Biophysical Research Communications. 296巻. 305-312 (2002)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Hashimoto, M.Abe, A.Hirata, Y.Noda, H.Adachi, K.Yoda: "Progression of the stacked Golgi compartments in the yeast Saccharomyces cerevisiae by overproduction of GDP-mannose transporter"Yeast. 19(16). 1413-1424 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Kosodo, Y.Noda, H.Adachi, K.Yoda: "Cooperation of Sly1/SM-family protein and Sec18/NSF of Saccharomyces cerevisiae in cis-SNARE complex disassembly"Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 67(2). 448-450 (2003)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Koji Yoda, Tsuyoshi Kawada, Chiaki Kaibara, Akihiko Fujie, Masato Abe, Hitoshi Hashimoto, Jiro Shimizu, Nario Tomishige, Yoichi Noda and Makari Yamasaki: "Defect in cell wall integrity of the yeast Saccharomyces cerevisiae caused by a mutation of the GDP-mannose pyrophosphorylase gene VIG9"Biosci. Biotechnol. Biochem.. 64 (9). 1937-1941 (2000)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Koji Yoda and Yoichi Noda: "Vesicular transport and the Golgi apparatus in yeast"J. Biosci, Bioeng.. 91 (1). 1-11 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoichi Kosodo, Keita Imai, Aiko Hirata, Yoichi Noda, Akira Takatsuki, Hiroyuki Adachi and Koji Yoda: "Multicopy suppressors of the sly1 temperature-sensitive mutation in ER-Golgi vesicular transport in Saccharomyces cerevisiae"Yeast. 18(11). 1003-1014 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hiroshi Kadokura, Hiroyuki Kawasaki, Koji Yoda, Makari Yamasaki and Katsuhiko Kitamoto.: "Efficient export of alkaline phosphatase overexpressed from a multicopy plasmid requires degP, a gene encoding a periplasmic protease of Escherichia coli"J. Gen. Appl. Microbiol.. 47(3). 113-141 (2001)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Jun-Hwa Cho, Yoichi Noda, Hiroyuki Adachi and Koji Yoda: "A novel membrane protein complex on the endoplasmic reticulum and early Golgi compartments in the yeast Saccharomyces cerevisiae"Biosci. Biotechnol. Biochem.. 65 (10). 2226-2232 (2001)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hironori Inadome, Yoichi Noda, Hiroyuki Adachi and Koji Yoda.: "A novel protein Mpml of the mitochondria of the yeast Saccharomyces cerevisiae"Biosci. Biotechnol. Biochem.. 65 (11). 2577-2580 (2001)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoichi Kosodo, Yoichi Noda, Hiroyuki Adachi and Koji Yoda: "Binding of Sly1 to Sed5 enhances formation of the yeast early Golgi SNARE complex"J. Cell Sci.. 115 (18). 3683-3691 (2002)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Keita Imai, Toshirou Kijima, Yoichi Noda, Kazuo Sutoh, Koji Yoda, and Hiroyuki Adachi.: "A Rho GDP-dissociation inhibitors is involved in cytokinesis of Dictyostellum"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 296. 305-312 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hitoshi Hashimoto, Masato Abe, Akiko Hirata, Yoichi Noda, Hiroyuki Adachi and Koji Yoda: "Progression of the stacked Golgi compartments in the yeast Saccharomyces cerevisiae by overproduction of GDP-mannose transporter"Yeast. 19(16). 1413-1424 (2002)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoichi Kosodo, Yoichi Noda, Hiroyuki Adachi and Koji Yoda: "Cooperation of Sly1/SM-family protein and Sec18/NSF of Saccharomyces cerevisiae in cis-SNARE complex disassembly"Biosci. Biotechnol. Biochem.. 67(2). 448-450 (2003)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Kosoda, Y.Noda, H.Adachi, K.Yoda: "Binding of Sly1 to Sed5 enhances formation of the yeast early Golgi SNARE complex"Journal of Cell Science. 115巻・18号. 3683-3961 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] K.Imai, T.Kijima, Y.Noda, K.Sutoh, K.Yoda, H.Adachi: "A Rho GDP-dissociation inhibitors is involved in cytokinesis of Dictyostelium"Biochemical and Biophysical Research Communications. 296巻. 305-312 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] H.Hashimoto, M.Abe, A.Hirata, Y.Noda, H.Adachi, K.Yoda: "Progression of the stacked Golgi compartments in the yeast Saccharomyces cerevisiae by overproduction of GDP-mannose transporter"Yeast. 19巻・16号. 1413-1424 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Y.Kosodo, Y.Noda, H.Adachi, K.Yoda: "Cooperation of Sly1/SM-family protein and Sec18/NSF of Saccharomyces cerevisiae in cis-SNARE complex disassembly"Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 67巻・2号. 448-450 (2003)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] K.Yoda, Y.Noda: "Vesicular transport and the Golgi apparatus in yeast"Journal of Bioscience and Bioengineering. 91(1). 1-11 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Y.Kosodo, K.Imai, A.Hirata, Y.Noda, A.Takatsuki, H.Adachi, K.Yoda: "Multicopy suppressors of the sly1 temperature-sensitive mutation in ER-Golgi vesicular transport in Saccharomyces cerevisiae"Yeast. 18(11). 1003-1014 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] H.Kadokura, H.i Kawasaki, K.Yoda, M.Yamasaki, K.Kitamoto: "Efficient export of alkaline phosphatase overexpressed from a multicopy plasmid requires degP, a gene encoding a periplasmic protease of Escherichia coli"Journal of General and Applied Microbiology. 47(3). 113-141 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] J.-H.Cho, Y.Noda, H.Adachi, K.Yoda: "A novel membrane protein complex on the endoplasmic reticulum and early Golgi compartments in the yeast Saccharomyces cerevisiae"Bioscience, Biotechnol, and Biochemistry. 65(10). 2226-2232 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] H.Inadome, Y.Noda, H.Adachi, K.Yoda: "A novel protein Mpm1 of the mitochondria of the yeast Saccharomyces cerevisiae"Bioscience, Biotechnol, and Biochemistry. 65(11). 2577-2580 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] K.Yoda,T.Kawada,C.Kaibara,A.Fujie,M.Abe,H.Hashimoto,J.Shimizu,N.Tomishige,Y.Noda,and M.Yamasaki: "Defect in cell wall integrity of the yeast Saccharomyces cerevisiae caused by a muntation of the GDP-mannose pyrophosphorylase gene VIG9"Bioscience,Biotechnology,and Biochemistry. 64(9). 1937-1941 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] K.Yoda and Y.Noda: "Vesicular transport and the Golgi apparatus in yeast"Journal of Bioscience and Bioengineering. 91(1). 1-11 (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書

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公開日: 2000-04-01   更新日: 2016-04-21  

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