抗体産生不全症の発症機構とその責任遺伝子の解析

• 研究課題/領域番号: 12470037
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 病態医化学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 塚田 聡 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (60273637)
• 研究分担者: 橋本 章司 大阪大学, 医学部・附属病院, 医員
• 研究期間 (年度): 2000 – 2001
• 研究課題ステータス: 完了 (2001年度)
• 配分額: 7,200千円 (直接経費: 7,200千円); 2001年度: 3,400千円 (直接経費: 3,400千円); 2000年度: 3,800千円 (直接経費: 3,800千円)
• キーワード: 抗体産生不全症 / 無ガンマグロブリン血症 / BtK / BLNK / ホスホリパーゼC / Syk / Btk / ポスホリパーゼC

研究概要

最もポピュラーな免疫不全症である無ガンマグロブリン血症(XLA)の責任遺伝子BtkのB細胞における機能解析をさらに進めた.これまでに我々はB細胞におけるBtkの主要な役割はホスホリパーゼCγ2(PLCγ2)を活性化することによってB細胞抗原レセプター(BCR)刺激後に細胞内カルシウムの動員を生じさせることであることを明らかにしてきた.さらに,Btkがアダプター分子BLNKを介して,もうひとつのチロシンキナーゼSykと協調してPLCγ2を活性化することを示してきた.しかしながら実際にPLCγ2がBtkあるいはSykによってどのような分子メカニズムで活性化されるのかは明らかではなかった.今回我々はBtkによるPLCγ2のリン酸化部位を決定し,その各々のチロシン残基のリン酸化がB細胞内におけるPLCγ2の活性化におよぼす効果を検討した.そしてBtkはPLCγ2の4つのチロシン残基をリン酸化し,PLCγ2の活性化はそれらのリン酸化が協調的にはたらいて生じることを明らかにした.さらに,本邦のXLA患者総計百数十名のBtkの変異の同定およびその蛋白質の解析を行い,一方ではB細胞の著減と低ガンマグロブリン血症を呈する男子症例の80%以上がBtkの変異を有することを明らかにした.

研究成果

• [文献書誌] Sakamoto M., Tsukada S.: "Maternal germline mosaicism of X-linked agammaglobulinemia"Am. J. Med. Genet.. 99. 234-237 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Usui K., Tsukada S.: "Reccurent pneumonia with mild hypogammaglobulinemia diagnosed as X-linked agammaglobulinemia in adults"Respir. Res.. 2. 188-192 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Joe E-K., Tsukada S.: "Characterization of mutations, including a novel regulatory defect in the first intron, in Bruton's tyrosine kinase (Btk) gene from seven Korean X-linked agammaglobulinemia families"J. Immunol.. 167. 4038-4045 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Kanegane H, Tsukada S: "Clinical and genetic characteristics of hypogammaglobulinemic males with Btk mutations detected by flow cytometric assay combined with genetic analysis"J. Allergy. Clin. Immunol.. 108. 1012-1020 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Futatani T., Tsukada S.: "Bruton's tyrosine kinase is present in normal platelets and its absence identifies patients with X-linked agammaglobulinemia and carrier females"Br. J. Haematol.. 114. 141-149 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Watanabe D., Tsukada S.: "Four tyrosine residues in phospholipase C-gamma2, identified as Btd-dependent phodphorylation sites, are required for B cell antigen receptor-coupled calcium signaling"J. Biol. Chem.. 276. 38595-38601 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Tsukada, S. and Kurosaki, T.: "Central linker protein and cytoplasmic tyrosine kinases in B cell activation"Modern Asp. Immunobiol.. 1. 75-77 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Kurosaki, T. and Tsukada, S.: "BLNK : Connecting Syk and Btk to calcium signals"Immunity. 12. 1-5 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Kanegane, H., Tsukada, S., Iwata, T., Futatani, T., Nomura, K., Yamamoto, J., Yoshida T., Agematsu, K. and Komiyama, A. and Miyawaki, T.: "Detection of Mutations in Bruton's tyrosine kinase in hypogammaglobulinemic individuals registered as common variable immunodeficiency in the Japan immunodeficiency registry"Clin. Exp. Immunol.. 120. 512-517 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Nomura, K., Kanegane H., Karasuyama, H., Tsukada, S., Agematsu, K., Murakami, G., Sakazume, S., Sako, M., Tanaka R., Kuniya, Y., Komeno, T., Ishihara, S., Hayashi, K., Kishimoto, T. and Miyawaki, T.: "The genetic defect in human X-linked agammaglobulinemia impedes a maturational evolution of pro-B cells into later stage of pre-B cells in B cell differentiation pathway"Blood. 96. 610-617 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Sakamoto, M., Kanegane, H., Fujii, H., Tsukada, S., Miyawaki, T. and Shinomiya, N.: "Maternal germline mosaicism of X-linked agammaglobulinemia"Am. J. Med. Genet.. 99. 234-237 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Baba,Y., Hashimoto,S., Matsushita,M., Watanabe,D., Kishimoto,T., Kurosaki,T. and Tsukada,S.: "BLNK mediates Syk-dependent Btk activation"Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98. 2582-2586 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Usui,K., Sasahara,Y., Tazawa,R., Hagiwara,K., Tsukada,S., Miyawaki,T., Tsuchiya,S. and Nukiwa,N.: "Reccurent pneumonia with mild hypogammaglobulinemia diagnosed as X-linked agammaglobulinemia in adults"Respir. Res.. 2. 188-192 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Joe, E-K., Kanegane, H., Nonoyama, S., Tsukada, S., Lee, J-H., Lim, K., Shong, S., Song, C-H., Kim, H-J., Park, J-K., and Miyawaki, T.: "Characterization of mutations, including a novel regulatory defect in the first intron, in Bruton's tyrosine kinase (Btk) gene from seven Korean X-linked agammaglobulinemia families"J. Immunol.. 167. 4038-4045 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Tsukada, S., Baba, Y., and Watanabe, D.: "Btk and BLNK in B cell development"Adv. Immunol.. 77. 123-162 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Kanegane, H., Futatani, T., Wang, Y., Nomura, K., Shinozaki, K., Kubota, T., Tsukada, S. and Miyawaki, T.: "Clinical and genetic characteristics of hypogammaglobulinemic males with Btk mutations detected by flow cytometric assay combined with genetic analysis"J. Allergy. Clin. Immunol.. 108. 1012-1020 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Futatani,T., Watanabe,C., Baba,Y., Tsukada,S. and Ochs,H.D.: "Bruton's tyrosine kinase is present in normal platelets and its absence identifies patients with X-linked agammaglobulinemia and carrier females"Br. J. Haematol.. 114. 141-149 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Wang,Y., Kanegane, H., Sanal, O., Ersoy, F., Teczcan, I., Futatani, T., Tsukada, S. and Miyazaki, T.: "Bruton's tyrosine kinase gene mutations in Turkish patients with presumed X-linked agammaglobulinemia"Hum. Mutat.. 18. 356 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Watanabe, D., Hashimoto, S., Ishiai, M., Matsushita, M., Baba, Y., Kishimoto, T., Kurosaki, T. and Tsukada, S.: "Four tyrosine residues in phospholipase C-gamma2, identified as Btk-dependent phosphorylation sites, are required for B cell antigen receptor-coupled calcium signaling"J. Biol. Chem.. 276. 38595-38601 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Sakamoto M., Tsukada S.: "Maternal germline mosaicism of X-linked agammaglobulinemia."Am.J.Med.Genet.. 99. 234-237 (2001)
• [文献書誌] Usui K., Tsukada S.: "Reccureut pneumonia with mild hypogammaglobulinemia diagnosed as X-linked agammaglobulinemia in adults"Respir.Res.. 2. 188-192 (2001)
• [文献書誌] Joe E-K., Tsukada S.: "Characterization of mutations, including a novel regulatory dcfect in the first intron, in Bruton's tyrosine kinase (Btk) gene from seven Korean X-linked agammaglobulinemia families"J.Immunol.. 167. 4038-4045 (2001)
• [文献書誌] Kanegane H, Tsukada S.: "Clinical and genetic characteristics of hypogammaglobulinemic males with Btk mutations detected by flow cytometric assay combined with genetic analysis"J.Allergy.Clin.Immunol. 108. 1012-1020 (2001)
• [文献書誌] Futatani T., Tsukada S.: "Bruton's tyrosine kinase is present in normal platelets and its absence identifies patients with X-linked agammaglobulinemia and carrier females"Br.J.Haematol.. 114. 141-149 (2001)
• [文献書誌] Watanabe D., Tsukada S.: "Four tyrosine residues in phospholipase C-gamma2, identified as Btk-dependent phodphorylation sites, are required for B cell antigen receptor-coupled calcium signaling"J.Biol.Chem.. 276. 38,595-389,601 (2001)
• [文献書誌] Kurosaki,T.and Tsukada,S.: "BLNK : Connecting Syk and Btk to calcium signals."Immunity.. 12. 1-5 (2000)
• [文献書誌] Tsukada,S.and Kurosaki,T.: "Central linker protein and cytoplasmic tyrosine kinases in B cell activation."Modem Asp.Immunobiol.. 1. 75-77 (2000)
• [文献書誌] Kanegane,H.,Tsukada,S.: "Detection of Mutations in Bruton's tyrosine kinase in hypogammaglobulinemlc individuals registered as common variable immunodeficiency in the Japan immunodeficiency registry."Clin.Exp.Immunol.. 120. 512-517 (2000)
• [文献書誌] Nomura,K.,Kanegane,H.,Tsukada,S.: "The genetic defect in human X-linked agammaglobulinemia impedes a maturational evolution of pro-B cells into later stage of pre-B cells in B cell differentiation pathway."Blood.. 96. 610-617 (2000)
• [文献書誌] Baba,Y.,Hashimoto,S.Tsukada,S.: "BLNK mediates Syk-dependent Btk activation."Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. (in press). (2001)
• [文献書誌] Tsukada,S.,Baba,Y.,and Watanabe,D.: "Btk and BLNK in B cell development."Adv.Immunol.. (in press). (2001)