| 研究課題/領域番号 |
12480243
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
神経科学一般
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| 研究機関 | 理化学研究所 |
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研究代表者 |
吉原 良浩 理化学研究所, シナプス分子機構研究チーム, チームリーダー(研究職) (20220717)
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| 研究分担者 |
船木 敦子 理化学研究所, シナプス分子機構研究チーム, テクニカルスタッフ(研究職)
斉藤 美知子 理化学研究所, シナプス分子機構研究チーム, テクニカルスタッフ(研究職)
宮脇 敦史 理化学研究所, 細胞機能探索技術探索チーム, チームリーダー(研究職) (80251445)
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| 研究期間 (年度) |
2000 – 2001
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| 研究課題ステータス |
完了 (2001年度)
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| 配分額 *注記 |
16,200千円 (直接経費: 16,200千円)
2001年度: 4,900千円 (直接経費: 4,900千円)
2000年度: 11,300千円 (直接経費: 11,300千円)
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| キーワード | WGA / 経シナプス性トレーサー / GFP / 蛍光可視化 / 神経回路網 / 嗅覚神経回路 / 小脳遠心性神経回路 / シナプス形成 / 小脳遠心性経路 / 嗅覚経路 / 可視化 |
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| 研究概要 |
私たちは最近、WGA (wheat germ agglutinin:小麦胚芽レクチン)遺伝子をトランスジーンとして特定の神経回路を可視化する新技術を確立した。特異的プロモーターの制御下に特定のタイプのニューロンでWGA遺伝子を強制発現させると、産生されたWGA蛋白質はシナプスを介して2次ニューロンへ、さらには3次ニューロンまで輸送され、WGA発現細胞を起点とする神経回路が可視化された。本研究においては経シナプス性にニューロン間を輸送されるWGAをGFPなどの蛍光蛋白質と融合させることによって、機能的神経回路を蛍光で可視化するという新たな試みに挑戦し、WGAトランスジーン技術の飛躍的発展を目指した。
平成13年度においては、前年度に作製したトランスジェニックマウス(L7-WGA/GFP、OMP-WGA/GFP、OMP-WGA/CFP)の詳細な解析を行ったが、in vivoではGFP蛍光は観察されなかった。またL7-WGA/DsRedトランスジェニックマウスを作製したところ、プルキンエ細胞で強いDsRedの蛍光が検出されたが、シナプスを越えての移動は観察されなかった。現在、より効率よく蛍光を発するGFP誘導体であるVenusを用いた融合遺伝子の作製ならびにin vitro(細胞培養系)においてのWGA/GFPの経シナプス性移行を解析中である。
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