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培養不能細菌の分子メカニズム

研究課題

研究課題/領域番号 12490009
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 広領域
研究機関東京大学

研究代表者

木暮 一啓  東京大学, 海洋研究所, 教授 (10161895)

研究分担者 山本 啓之  海洋科学技術センター, 研究主幹 (30182645)
千浦 博  国際基督教大学, 教養学部, 準教授 (00103698)
水之江 義充 (水之江 義之)  九州大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (20157514)
石浜 明  国立遺伝学研究所, 名誉教授 (80019869)
研究期間 (年度) 2000 – 2002
研究課題ステータス 完了 (2002年度)
配分額 *注記
14,300千円 (直接経費: 14,300千円)
2002年度: 4,100千円 (直接経費: 4,100千円)
2001年度: 3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
2000年度: 7,000千円 (直接経費: 7,000千円)
キーワードVNC / 細菌 / 生理状態 / 分子レベル / 微生物生態 / 定常期 / 培養能 / シグマ因子 / 培養不能状態 / 酸素ストレス / ウイルス様粒子 / 化学合成生態系 / 密度勾配 / シグマファクター / 増殖期 / VNC状態 / 海洋細菌 / Percoll密度勾配 / 酸化的ストレス / 培養不能 / 発現 / 遺伝子 / ストレス
研究概要

細菌学が確立したのは、19世紀の後半で、寒天平板培地を用いた培養と細菌の単離技術の確立と時を同じくする。この技術は、寒天平板培地上にコロニーを作らせることによって個々の細胞レベルでは目に見えない細菌の存在を可視化すること、さらにそれらの計数することを可能にした。この技術が細菌学の基本となったため、細菌学者は寒天平板培地を細菌の有無の判定にも用いるようになった。つまり寒天平板培地にコロニーを作らなければ、その試料の中には細菌はいないか、死滅した、と判断する。この考え方は、医学、衛生学、食品細菌学などを含む実質的にほぼ全ての細菌学の分野の常識となっていた。
こうした常識と違う常識を持っていたのは、生態学の分野である。天然の土壌や水の中の細菌を対象にしてきた研究者は、1950年代から既に天然の細菌の大部分は培養できないことに気が付いていた。すなわち、天然環境中で生きて増殖していることと、培養できることは同義ではないのである。
これらの二つの常識を繋いだのが、VNC (Viable but Nonculturable)つまり、培養できないものの生きている細菌の存在についての概念である。この概念は1985年にアメリカメリーランド大学のRita R.Colwell教授によって提案され、その後多くの研究が始まった。しかしこの概念は今だに分子レベルできちんと記述されたとは言い難く、それが多くの疑念を抱かせることになっている。
本研究はVNCとはどのような生理状態であるかについて、分子レベルでその解明を目指したものである。この研究を通じ、以下のことを明らかにした。(1)混菌状態から、VNC状態の菌を選択的に分取する方法論を作った。(2)VNC状態と酸素ストレスとの関係を明らかにした。(3)天然の共生状態の菌のVNC状態について知見を得た。(4)細菌の死滅あるいはVNC状態を誘導する要素としてのウイルス様粒子の動態を明らかにした。(5)大腸菌のシグマ因子と定常期の細胞の生理状態との関わりについて明らかにした。

報告書

(4件)
  • 2002 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2001 実績報告書
  • 2000 実績報告書
  • 研究成果

    (88件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (88件)

  • [文献書誌] Wai SN, Mizunoe Y, Takade A, Yoshida, S: "A comparison of solid and liquid media for resuscitation of starvation- and low-temperature-induced nonculturable cells of Aeromonas hydrophila."Arch Microbiol. 173. 307-310 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mizunoe Y, Wai SN, Ishikawa T, Takade A, Yoshida S: "Resuscitation of viable but nonculturable cells of Vibrio parahaemolyticus induced at low temperature under starvation."FEMS Microbiol Lett. 186. 115-120 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Lai XE, Arencibia I, Johansson A, Wai SN, Oscarsson J, Kalfas S, Sundqvist KG, Mizunoe Y, Sjostedt A, Uhlin BE: "Cytocidal and apoptotic effects of the ClyA protein from Escherichia coli on primary and cultured monocytes and macrophages."Infect Immun. 68. 4363-4367 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Westermark M, Oscarsson J, Mizunoe Y, Urbonaviciene J, Uhlin BE: "Silencing and activation of the ClyA cytotoxin expression in Escherichia coli."J Bacteriol. 182. 6347-6357 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Iida K, Mizunoe Y, Wai SN, Yoshida S: "Type 1 fimbriation and its phase switching in diarrheagenic Escherichia coli strains."Clin Diagn Lab Immun. 8. 489-495 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Saito M, Ohga S, Endoh M, Nakayama H, Mizunoe Y, Hara T, Yoshida S: "H2O2-nonproducing Streptococcus strains : Survival in stationary-phase and virulence in chronic granulomatous disease."Microbiology. 147. 2469-2477 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kawabata S, Beisel HG, Huber R, Bode W, Gokudan S, Muta T, Tsuda R, Koori K, Kawahara T, Seki N, Mizunoe Y, Wai SN, Iwanaga S: "Role of tachylectins in host defense of the Japanese horseshoe crab Tachypleus tridentatus"Adv Exp Med Biol.. 484. 195-202 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Oscarsson J, Westermark M, Lofdahl S, Olsen B, Palmgren H, Mizunoe Y, Wai SN, Uhlin BE: "Characterization of a pore-forming cytotoxin expressed by Salmonella enterica serovars typhi and paratyphi A."Infection and Immunity. 70. 5759-5769 (2002)

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  • [文献書誌] Ishikawa T, Mizunoe Y, Kawabata S, Takade A, Harada M, Wai S N, Yoshida S: "The iron-binding protein Dps confers hydrogen peroxide stress resistance to Campylobacter jejuni"J.Bacteriol.. 185. 1010-1017 (2003)

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  • [文献書誌] Yamamoto, Hiroyuki, Katsunori Fujikura, Akira Hiraishi, Kenji Kato, Yonosuke Maki: "Phylogenetic characterization and biomass estimation of bacterial endosymbionts associated with invertebrates dwelling in chemosynthetic communites of hydrothermal vent and cold seep fields."Mar.Ecol.Prog.Ser.. 245. 61-67 (2002)

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  • [文献書誌] Chiura, Hiroshi Xavier.: "Broad Host Range Xenotrophic Gene Transfer by Virus-Like Particles from a Hot Spring"Microbes and Environments. 17. 53-58 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Chiura, Hiroshi Xavier, Hiroyuki Yamamoto, Daisuke Koketsu, Hiroki Naito, Kenji Kato: "Virus-Like Particle derived from a Bacterium belonging to the Oldest Lineage of the Domain Bacteria."Microbes and Environments. 16. 191-196 (2001)

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  • [文献書誌] Chiura, Hiroshi X., Kumiko Kita-Tsukamoto: "Purification and Characterisation of a Novel Agarase Secreted by a Marine Bacterium, Pseudoalteromonas sp.Strain CKT1."Microbes and Environments. 15. 11-22 (2000)

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  • [文献書誌] Wada, M., K.Kogure: "Membrane bioenergetics in reference to marine bacterial culturability"Nonculturable Microorganisms in the Environment. 47-55 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Suzuki, S., K.Kogure, E.Tanoue: "Bacterial porin in the ocean and its ecological implications."Microbial Biosystems : New Frontiers. 175-178 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Chiura, H.X., B.Velimirov, K.Kogure.: "Virus-like particles in microbial population control and horizontal gene transfer in aquatic environment"Microbial Biosystems : New Frontiers. 167-173 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kazuhiro Kogure: "What is marine bacterium?"Kaiyo. 23. 32-37 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nagata, Erina, Kazuhiro Kogure, Kumiko Kita-Tsukamoto, Minoru Wada, Mitsuru Eguchi.: "Na+ dependent respiratory chain in Vibrio anguillarum, a fish pathoge n, isolated from a freshwater area."FEMS Microbial Ecology. 44. 225-230 (2003)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishino, T., B.B.Nayak, K.Kogure: "Density dependent sorting of physiologically different cells of Vibrio parahaemolyticus"Applied and Environmental Microbiology. 69. 3569-3572 (2003)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishino, T., E.Ikemoto, K.Kogure.: "Application of atomic force microscopy to observation of marine bacteria"Journal of Oceanography. 60. 219-225 (2004)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Gowrishankar J, Yamamoto K, Subbarayan PR, Akira Ishihama.: "In vitro properties of RpoS (sigma(S)) mutants of Escherichia coli with postulated N-terminal subregion 1.1 or C-terminal region 4 deleted."J Bacteriol. 185. 2673-2679 (2003)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Makinoshima H, Aizawa SI, Hayashi H, Takeyoshi M, Nishimura A, Ishihama A.: "Growth phase-coupled alterations in cell structure and function of Escherichia coli"J.Bacteriol.. 185. 1338-1345 (2003)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoshida M, Kashiwagi K, Kawai G, Ishihama A, Igarashi K.: "Polyamines enhance synthesis of the RNA polymerase sigma(38) subunit by suppression of an amber termination codon in the open reading frame"J Biol.Chem. 277. 37139-37146 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ghosh P, Ishihama A, Chatterji D: "Escherichia coli RNA polymerase subunit omega and its N-terminal domain bind full-length beta ' to facilitate incorporation into the alpha (2)beta subassembly"Eur.J.Biochem. 268. 4621-4627 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Rai, V.Samuel, Hideyuki Tomitori, Madoka Yoshida, Auayporn Apirakaramwong, Keiko Kashiwagi, Koji Takio, Akira Ishihama, Kazuei Igarashi: "Properties of a revertant of Escherichia coli viable in the presence of spermidine accumulation : Increase in L-glycerol 3-phosphate."J.Bacteriol.. 183. 4493-4498 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Culham DE, Lu A, Jishage M, Krogfelt KA, Ishihama A, Wood JM: "The osmotic stress response and virulence in pyelonephritis isolates of Escherichia coli : contributions of RpoS, Prop, ProU and other systems"Microbiology. 147. 1657-1670 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sujatha S, Ishihama A, Chatterji D: "Functional complementation between mutations at two distant positions in Escherichia coli RNA polymerase as revealed by second-site suppression."Mol.Gen.Genet.. 264. 531-538 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Fujita N, Endo S, Ishihama A: "Structural requirements for the interdomain linker of alpha subunit of Eseherichia coli RNA polymerase."Biochemistry -US. 39. 6243-6249 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kimura M, Ishihama A.: "Involvement of multiple subunit-subunit contacts in the assembly of RNA polymerase II."Nucleic Acid Res.. 28. 952-959 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ozoline ON, Fujita N, Ishihama A.: "Transcription activation mediated by the carboxyl-terminal domain of the RNA polymerase alpha-subunit - Multipoint monitoring using a fluorescent probe."J.Biol.Chem.. 275. 1119-1127 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Wai SN, Mizunoe Y, Takade A, Yoshida, S: "A comparison of solid and liquid media for resuscitation of starvation-and low-temperature-induced nonculturable cells of Aeromonas hydrophila."Arch Microbiol. 173. 307-310 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mizunoe Y, Wai SN, Ishikawa T, Takade A, Yoshida S: "Resuscitation of viable but nonculturable cells of Vibrio parahaemolyticus induced at low temperature under starvation."FEMS Microbiol Lett. 186. 115-120 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Lai XE, Arencibia I, Johansson A, Wai SN, Oscarsson J, Kalfas S, Sundqvist KG, Mizunoe Y, Sjostedt A, Uhlin BE: "Cytocidal and apoptotic effects of the ClyA protein from Escherichia coli on primary and cultured monocytes and macrophages."Infect Immun. 68. 4363-4367 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Westermark M, Oscarsson J, Mizu roe Y, Urbonaviciene J, Uhlin BE: "Silencing and activation of the ClyA cytotoxin expression in Escherichia coli."J Bacteriol. 182. 6347-6357 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Iida K, Mizunoe Y, Wai SN, Yoshida S: "Type 1 fimbriation and its phase switching in diarrheagenic Escherichia coli strains."Clin Diagn Lab Immun. 8. 489-495 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Saito M, Ohga S, Endoh M, Nakayama H, Mizunoe Y, Hara T, Yoshida S: "H2O2-nonproducing Streptococcus strains : Survival in stationary-phase an virulence in chronic granulomatous disease."Microbiology. 147. 2469-2477 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kawabata S, Beisel HG, Huber R, Bode W, Gokudan S, Muta T, Tsuda R, Koori K, Kawahara T, Seki N, Mizunoe Y, Wai SN, Iwanaga S: "Role of tachylectins in host defense of the Japanese horseshoe crab Tachypleus tridentatus"Adv Exp Med Biol.. 484. 195-202 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Oscarsson J, Westermark M, Lofdahl S, Olsen B, Palmren H, Mizunoe Y, Wai SN, Uhlin BE: "Characterization of a pore-forming cytotoxin expressed by Salmonella enterica serovars typhi and paratyphi A."Infection and Immunity. 70. 5759-5769 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ishikawa T, Mizunoe Y, Kawabata S, Takade A, Harada M, Wai SN. Yoshida S: "The iron-binding protein Dps confers hydrogen peroxide stress resistance to Campylobacter jejuni"J.Bacteriol.. 185. 1010-1017 (2003)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yamamoto, Hiroyuki, Katsunori Fujikura, Akira Hiraishi, Kenji Kato, Yonosuke Maki: "Phylogenetic characterization and biomass estimation of bacterial endosymbionts associated with invertebrates dwelling in chemosynthetic communites of hydrothermal vent and cold seep fields."Mar.Ecol.Prog.Ser.. 245. 61-67 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Chiura, Hiroshi Xavier.: "Broad Host Range Xenotrophic Gene Transfer by Virus-Like Particles from a Hot Spring"Microbes and Environments. 17. 53-58 (2002)

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  • [文献書誌] Chiura, Hiroshi Xavier, Hiroyuki Yamamoto, Daisuke Koketsu, Hiroki Naito, Kenji Kato: "Virus-Like Particle derived from a Bacterium belonging to the Oldest Lineage of the Domain Bacteria."Microbes and Environments. 16. 191-196 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Chiura, Hiroshi X., Kumiko Kita-Tsukamoto: "Purification and Characterization of a Novel Agarase Secreted by a Marine Bacterium, Pseiidoalteromonas sp.Strain CKT1."Microbes and Environments. 15. 11-22 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Wada, M., K.Kogure: "Membrane bioenergetics in reference to marine bacterial culturability"Nonculturable Microorganisms in the Environment. 47-55 (2000)

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  • [文献書誌] Suzuki, S., K.Kogure, E.Tanoue: "Bacterial porin in the ocean and its ecological implications."Microbial Biosystems : New Frontiers. 175-178 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Chiura, H.X., B.Velimirov, K.Kogure.: "Virus-like particles in microbial population control and horizontal gene transfer in aquatic environment"Microbial Biosystems : New Frontiers. 167-173 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kazuhiro Kogure: "What is marine bacterium?"Kaiyo. 23. 32-37 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nagata, Erina, Kazuhiro Kogure, Kumiko Kita-Tsukamoto, Minoru Wada, Mitsuru Eguchi.: "Nat dependent respiratory chain in Vibrio anguillarum, a fish pathogen, isolated from a freshwater area."FEMS Microbial Ecology. 44. 225-230 (2003)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishino, T., B.B.Nayak, K.Kogure: "Density dependent sorting of physiologically different cells of Vibrio parahaemolyticus"Applied and Environmental Microbiology. 69. 3569-3572 (2003)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishino, T., E.Ikemoto, K.Kogure.: "Application of atomic force microscopy to observation of marine bacteria"Journal of Oceanography. 60. 219-225 (2004)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Gowrishankar J, Yamamoto K, Subbarayan PR., Akira Ishihama.: "In vitro properties of RpoS (sigma(S)) mutants of Escherichia coil with postulated N-terminal subregion 1.1 or C-terminal region 4 deleted."J Bacteriol. 185. 2673-2679 (2003)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Makinoshima H, Aizawa SI, Hayashi H, Takeyoshi M, Nishimura A, Ishihama A.: "Growth phase-coupled alterations in cell structure and function of Escherichia coli"J.Bacteriol.. 185. 1338-1345 (2003)

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  • [文献書誌] Yoshida M, Kashiwagi K, Kawai G, Ishihama A, Igarashi K.: "Polyamines enhance synthesis of the RNA polymerase sigma(38) subunit by suppression of an amber termination colon in the open reading frame"J Biol.Chem. 277. 37139-37146 (2002)

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  • [文献書誌] Ghosh P, Ishihama A, Chatterji D: "Escherichia coil RNA polymerase subunit omega and its N-terminal domain bind full-length beta to facilitate incorporation into the alpha (2)beta subassembly"Eur.J.Biochem. 268. 4621-4627 (2001)

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  • [文献書誌] Rai, V.Samuel, Hideyuki Tomiiori, Madoka Yoshida, Auayporn Apirakaramwong, Keiko Kashiwagi, Koji Takio, Akira Ishihama, Kazuei Igarashi: "Properties of a revertant of Escherichia coil viable in the presence of spermidine accumulation : Increase in L-glycerol 3-phosphate."J.Bacterial.. 183. 4493-4498 (2001)

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公開日: 2000-04-01   更新日: 2016-04-21  

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