• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 前のページに戻る

染色体工学・発生工学を用いたヒト型MHCマウスの作出

研究課題

研究課題/領域番号 12554036
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分展開研究
研究分野 遺伝
研究機関国立遺伝学研究所

研究代表者

池村 淑道  国立遺伝学研究所, 集団遺伝研究系, 教授 (50025475)

研究分担者 深川 竜郎  国立遺伝学研究所, 集団遺伝研究系, 助教授 (60321600)
鈴木 宏志  中外製薬株式会社, 創薬資源研究所, 主任研究員
研究期間 (年度) 2000 – 2002
研究課題ステータス 完了 (2002年度)
配分額 *注記
13,000千円 (直接経費: 13,000千円)
2002年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
2001年度: 4,100千円 (直接経費: 4,100千円)
2000年度: 6,200千円 (直接経費: 6,200千円)
キーワード人工染色体 / MHC / DT40細胞 / ゲノム工学 / セントロメア / 染色体工学 / 発生工学 / 染色体ベクター / DT-40 / 発光工学 / DT-40細胞 / 複製タイミング
研究概要

遺伝子工学やトランスジェニック動物作成技術が医学、農学、薬学等のあらゆる分野の進歩に多大な貢献をしており、染色体工学や発生工学的技術が注目を受けている。我々は広領域の遺伝子群を解析し、改変する目的で染色体工学的な手法を用いて研究を行った。数Mbから数十Mbレベルの大きさのヒトの小型化染色体を、哺乳類細胞の数十から数百倍の高頻度で相同組み換えを起こすニワトリDT40細胞へ移行させ、宿主DT40細胞中でヒト染色体を効率よく改変した。安定に保持される人工染色体の作出と染色体上遺伝子群の適正な機能発現には、セントロメア部位の役割が重要になり、セントロメアの機能解析を精力的に行った(Fukagawa et al.,2001,Nishihashi et al.,2002)。
4MbのヒトMHC領域は、クラスI、II、IIIの異なった機能領域よりなり、各領域はS期の異なった時期に複製をすることを明らかにした。領域ごとの遺伝子群の発現制御と複製時期の制御とが関連すると想定された。ヒトMHC領域の複製時期の転換は、クラスIIとIII領域の境界で起こる事を明らかにしたが、仏国のグループはブタMHC領域の場合、この境界領域にセントロメアが存在することを明らかにした。ヒトMHC領域における複製と遺伝子発現様式の制御機構に関係するゲノム配列を探索する過程で、我々は三重鎖形成能を持つ特徴的な配列を、複製時期の転換点に見い出した(Kanaya et al.,2000)。この三重鎖構造が細胞核内でも形成され、核内ではセントロメア配列と空間的に近接して配置している事も見い出しており、遺伝子発現や複製の制御機構と関係する可能性が示された(Ohno et al.,2002)。複製時期の測定法の改良を行いながら自律複製する人工染色体上に存在するセントロメアDNAの複製時期を測定し、S期後半に複製すること、宿主の染色体へインテグレートした後の複製時期(S期前半から中間で複製)とは明らかに異なることを見い出した。人工染色体作成にはセントロメアの機能を解析することが重要と考え、遺伝子ノックアウト法を用いて複数のセントロメアタンパク質の解析を行った。遺伝子ノックアウト解析に加え、ヒトMHC領域を持つ第6染色体をDT40細胞へ移行させて、DNAチップを用いてDNA複製タイミングを測定した。
現在、DT40細胞からES細胞を移行させる実験が進行しているが、本研究で得られた知見は、ヒト型MHCを代表例とするヒトの広範囲ゲノム機能領域を保有するマウスの作出に基礎知識を与えている。

報告書

(4件)
  • 2002 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2001 実績報告書
  • 2000 実績報告書
  • 研究成果

    (49件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (49件)

  • [文献書誌] A.Nishihashi: "CENP-I is essential for centromere function in vertebrate cells"Developmental Cell. 2. 463-476 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J.M.Spence: "Co-localisation of Centromere Activity, CEN Proteins and a Topoisomerase II Cleavage Site to a fixed region of limited extent within the Human X-satellite Locus DXZ1"The EMBO Journal. 21. 5269-5280 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Hayashi: "Ubc9 is essential for viability of higher eukaryotic cells"Experimental Cell Research. 280. 212-221 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Watanabe: "Intranuclear arrangement of human chromosome 12 correlates to large-scale replication domains"Human Molecular Genetics. 11. 13-21 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Ohno: "Triplex-forming DNAs in the human interphase nucleus visualized in situ by polypurine/polypyrimidine DNA probes and antitriplex antibodies"Chromosoma. 111. 201-213 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Kanaya: "Analysis of codon usage diversity of bacterial genes with a self-organizing map (SOM) : characterization of horizontally transferred genes with emphasis on the E. coli O157 genome"Gene. 276. 89-99 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Fukagawa: "CENP-H, a constitutive centromere component, is required for centromere targeting of CENP-C in vertebrate cells"The EMBO Journal. 20. 4603-4617 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Fukagawa: "Creation and characterization of temperature-sensitive CENP-C mutants in vertebrate cells"Nucleic Acids Research. 29. 3796-3803 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] A.Okamura: "Gene Structure, chromosomal localization and immunolocalization of chicken centromere proteins CENP-C and ZW10"Gene. 262. 283-290 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Shina: "Genomic anatomy of a premier major histocompatibility complex paralogous region on chromosome 1q21-q22"Genome Research. 11. 789-802 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Nakamura: "Non-B DNA structures spatially and sequence-specifically associated with individual centromeres in the human interphase nucleus"Nucleic Acids Research. 28. 292 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Ohno: "Non-B DNA structures spatially and sequence-specifically associated with individua centromeres in the human interphase nucleus"Chromosomes Today. 13. 57-69 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Nogami: "Intranuclear arrangement of human chromosome 12 correlates to large-scale replication domains"Chromosoma. 108. 514-522 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Nogami: "Relative locations of the centromere and imprinted SNRPN gene within chromosome 15 territories during the cell cycle in HL6O cells"Journal of Cell Science. 113. 2157-2165 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Watanabe: "Replication timing of the human X-inactivation center (XIC) region : correlation with chromosome bands"Gene. 252. 163-172 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Kanaya: "Distribution of polypurine/polypyrimidine tract sequences in the human MHC region and their possible functions"Major Histocompatibillty Complex, Springer-Verlag Berlin Heidelberg New York Tokyo. 13 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ai Nishihashi, Tokuko Haraguchi, Yasushi Hiraoka, Toshimichi Ikemura, Vinciane Regnier, Helen Dodson, William C. Earnshaw, and Tatsuo Fukagawa: "CENP-I is essential. for centromere function in vertebrate cells"Developmental Cell. Vol. 2. 463-476 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Jenny M. Spence, Ricky Critcher, Tom A. Ebersole, Tatsuo Fukagawa, and Christine J. Farr: "Co-localisation of Centromere Activity, CEN Proteins and a Topoisomerase II Cleavage Site to a fixed region of limited extent within the Human X a-satellite Locus DXZ1"The EMBO Journal. Vol. 21. 5269-5280 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tomoko Hayashi, Masayuki Seki, Daisuke Maeda , Wensheng Wang Yoh-ichi Kawabe, Takahiko Seki, Hisato Saitoh, Tatsuo Fukagawa, Hideki Yagi, and Takemi Enomoto: "Ubc9 is essential for viability of higher eukaryotic cells"Experimental Cell Research. Vol. 280. 212-221 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mizuki Ohno, Tatsuo Fukagawa, Jeremy S. Lee, and Toshimichi Ikemura: "Triplex-forming DNAs in the human interphase nucleus visualized in situ by polypurine/polypyrimidine DNA prob es and anu' triplex antibodies"Chromosoma. Vol. 111. 201-213 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Watanabe Y, Fujiyama A, Ichiba Y, Hattori M, Yada T, Sakaki Y, Ikemura T.: "Chromosome-wide assessment of replication timing for human chromosomes 11q and 21q : disease-related genes in timing-switch regions."Human Molecular Genetics.. Vol. 11. 13-21 (2002)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tatsuo Fukagawa, Yoshikazu Mikami , Ai Nishihashi , Vinciane Regnier, Tokuko Haraguchi, Yasushi Hiraoka, Naoko Sugata, Kazuo Todokoro, William Brown, and Toshimichi Ikemura: "CENP-H, a constitutive centromere component, is required for centromere targeting of CENP-C in vertebrate cells"The EMBO Journal. Vol. 20. 4603-4617 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tatsuo Fukagawa, Vinciane Regnier, and Toshimichi Ikemura: "Creation and characterization of temperature-sensitive CENP-C mutants in vertebrate cells"Nucleic Acids Research. Vol. 29. 3796-3803 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Atsushi Okamura, Carlos Pendon, Manuel M. Valdivia, Toshimichi Ikemura, and Tatsuo Fukagawa: "Gene Structure, chromosomal localization and i mmunolocalization of chicken centromere proteins CENP-C and ZW10"Gene. VoL 262. 283-290 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shiina T, Ando A, Suto Y, Kasai F, Shigenari A, Takishima N, Kikkawa E, Iwata K, Kuwano Y, Kitamura Y, Matsuzawa Y, Sano K, Nogami M, Kawata H, Li S, Fukuzumi Y, Yamazaki M, Tashiro H, Tamiya G, Kohd A, Okumura K, Ikemura T, Soeda E, Mizuki H, Kimura M, Bahram S, Inoko H.: "Gfcnomic anatomy of a premier major histocompatibility complex paralogous region on chromosome 1q21-q22"Genome Research.. Vol. 11. 789-802 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kanaya S, Kinouchi M, Abe T, Kudo Y, Yamada Y, Nishi T, Mori H, Ikemura T.: "Analysis of codon usage diversity of bacterial genes with a self-organizing map (SOM) : characterization of horizontally transferred genes with emphasis on the E. coli O157 genome"Gene. Vol. 276. 89-99 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mizuki Ohno, Toyoaki Tenzen, Yossihisa Watanabe, Tetsushi Yamagata, Shigehiko Kanaya, Toshimichi Ikemura: "Non-B DNA structures spatially and sequence-specifically associated with individual centromeres in the human inteiphase nucleus"Chromosomes Today. Vol. 13. 57-69 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura Y, Gojobori T, Ikemura T.: "Codon usage tabulated from international DNA sequence databases : status for the year 2000"Nucleic Acids Res.. Vol. 28. 292 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nogami M, Nogami O, Kagotani K, Okumura M, Taguchi H, Ikemura T, Okumura K: "Intranuclear arrangement of human chromosome 12 correlates to large-scale replication domains."Chromosoma. Vol. 108. 514-522 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nogami M, Kohda A, Taguchi H, Nakao M, Ikemura T, Okumura K.: "Relative locations of the centromere and imprinted SNRPN gene within chromosome 15 territories during the cell cycle in HL60 cells"Journal of Cell Science.. Vol. 113. 2157-2165 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Watanabe Y, Tenzen T, Nagasaka Y, Inoko H, Ikemura T.: "Replication timing of the human X-inactivation center (XIC) region : correlation with chromosome bands"Gene. Vol. 252. 163-172 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ai Nishihashi: "CENP-I is essential for centromere function in vertebrate cells"Developmental Cell. 2. 463-476 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Jenny M. Spence: "Co-localisation of Centromere Activity, CEN Proteins and a Topoisomerase II Cleavage Site to a fixed region of limited extent within the Human X α-satellite Locus DXZI"The EMBO Journal. 21. 5269-5280 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Tomoko Hayashi: "Ubc9 is essential for viability of higher eukaryotic cells"Experimental Cell Research. 280. 212-221 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Yoshihisa Watanabe: "Chromosome-wide assessment of replication timing for human chromosomes 11q and 21q : disease-related genes in timing-switch regions"Human Molecular Genetics. 11. 13-21 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Y.Watanabe: "Chromosome-wide assessment of replication timing for human chromosomes 11q and 21q : disease-related genes in timing-switch regions"Human Molecular Genetics. 11. 13-21 (2002)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] T.Fukagawa: "CENP-H, a constitutive centromere component, is required for centroniere targeting of CENP-C in vertebrate cells"The EMBO Journal. 20. 4603-4617 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] T.Fukagawa: "Creation and characterization of temperature-sensitive CENP-C mutants in vertebrate cells"Nucleic Acids Research. 29. 3796-3803 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] A.Okamura: "Gene Structure, chromosomal localization and immunolocalization of chicken centromere proteins CENP-C and ZW10"Gene. 262. 283-290 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] T.Shina: "Genomic anatomy of a premier major histocompatibility complex paralogous region on chromosome 1q21-q22"Genome Research. 11. 789-802 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] S.Kanaya: "Analysis of codon usage diversity of bacterial genes with a self-organizing map (SOM) : characterization of horizontally transferred genes with emphasis on the E. coli O157 genome."Gene. 276. 89-99 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] 岡村淳: "Gene structure, chromosomal localization and immunolocalization of chicken centromere proteins CENP-C and ZW10."Gene. 262. 283-290 (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 中村保一: "Codon usage tabulated from international DNA sequence databases : status for the year 2000."Nucleic Acids Research. 28. 292 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 大野みずき: "Non-B DNA structures spatially and sequence-specifically associated with individual centromeres in the human interphase nucleus."Chromosomes Today. 13. 57-69 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 野上正弘: "Intranuclear arrangement of human chromosome 12 correlates to large-scale replication domains"Chromosoma. 108. 514-522 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 野上正弘: "Relative locations of the centromere and imprinted SNRPN gene within chromosome 15 territories during the cell cycle in HL60 cells"Journal of Cell Science. 113. 2157-2165 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 渡辺良久: "Replication timing of the human X-inactivation center (XIC) region : correlation with chromosome bands."Gene. 252. 163-172 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 上村隆俊: "Temporal and spatial localization of novel nuclear protein NP95 in mitotic and meiotic cells."Cell Structure and Function. 25. 149-159 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 金谷重彦: "Distribution of polypurine/polypyrimidine tract sequences in the human MHC region and their possible functions."Major Histocompatibillty Complex, Springer-Verlag Berlin Heidelberg New York Tokyo. 13 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書

URL: 

公開日: 2000-04-01   更新日: 2016-04-21  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi