| 研究課題/領域番号 |
12557079
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(B)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 展開研究 |
|---|
| 研究分野 |
血液内科学
|
|---|
| 研究機関 | 京都大学 |
|---|
研究代表者 |
伊藤 克彦 京都大学, 医学研究科, 講師 (90281097)
|
|---|
| 研究分担者 |
辻 孝 東京理科大学, 基礎工学部, 助教授
東辻 宏明 京都大学, 医学研究科, 助手 (60281094)
藤田 潤 京都大学, 医学研究科, 教授 (50173430)
森田 慶子(西村 慶子) 日本たばこ株式会社, 医薬探索研究所, 研究員
MORITA Keiko (NISHIMURA Keiko) Pharmscentical Frontier Inst, JT Inc., Research Scientist
森田 慶子 (西村 慶子) 日本たばこ産業株式会社, 医薬探索研究所, 研究員
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2000 – 2001
|
| 研究課題ステータス |
完了 (2001年度)
|
| 配分額 *注記 |
13,300千円 (直接経費: 13,300千円)
2001年度: 5,700千円 (直接経費: 5,700千円)
2000年度: 7,600千円 (直接経費: 7,600千円)
|
|---|
| キーワード | FMEV / レトロウイルス / ベクター / LTR / cis-element / P14OK / NFAT5 / 遺伝子治療 / 造血細胞 / レトロ・ウイルス |
|---|
| 研究概要 |
本研究では、FMEVタイプのレトロウイルスベクターを用いて、遺伝子発現に関する検討を行なうため、以下のことを行なった。
(1)標的細胞の検討 ヒトCD34陽性分画の細胞を標的に遺伝子導入し、SRCへの遺伝子導入効率、遺伝子発現量を、従来のモロニー白血病ウイルスを土台としたベクターと比較検討した。その結果、FMEVタイプのベクターでは、より幼弱な造血系細胞でより多くの遺伝子発現が認められた。また、その他の、組織においてもベクター間での遺伝子発現の違いを検討した。その結果、肝臓細胞で、FMEVタイプのベクターの強い遺伝子発現が確認できた。
(2)導入遺伝子の長期に渡る発現の観察 種々のLTRを持つベクターを用いて、造血細胞株に遺伝子導入し、長期にわたる発現量の変化を評価検討中である。
(3)遺伝子発現細胞の再濃縮 制癌剤耐性遺伝子を用いて、生体内で、遺伝子発現細胞を再濃縮することを目指している。薬剤耐性遺伝子として、ヒトO6-alkylguanine-DNA alkyltransferaseの変異体であるP140Kが、有用であることを確認し、この遺伝子を組み込んだベクターを作成した。
(4)種々のLTR、ベクターの作成 種々のレトロウイルス・ベクター、種々のウイルスのLTRの部分を用いたキメラLTR、SFFVの部分欠失LTRを作成し、これらのLTRを持つベクターを作成した。これらを用いた解析結果から、SFFVのLTRのU3領域に、強いcis活性があることを見いだした。更に、解析を進めた結果、転写因子NFAT5の結合する、新たな転写制御領域を同定した。
|
