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エナメルタンパク質の硬組織再生誘導作用に関する構造生物学的研究

研究課題

研究課題/領域番号 12557151
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分展開研究
研究分野 形態系基礎歯科学
研究機関東京医科歯科大学

研究代表者

高野 吉郎  東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (90126425)

研究分担者 馬場 麻人  東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (90251545)
坂本 裕次郎  東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (90242205)
寺島 達夫 (寺島 達雄)  東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教授 (20114770)
高橋 信之  生化学工業株式会社, 東京研究所, 研究員
研究期間 (年度) 2000 – 2002
研究課題ステータス 完了 (2002年度)
配分額 *注記
12,700千円 (直接経費: 12,700千円)
2002年度: 2,400千円 (直接経費: 2,400千円)
2001年度: 2,800千円 (直接経費: 2,800千円)
2000年度: 7,500千円 (直接経費: 7,500千円)
キーワードエナメル質 / 象牙質 / 歯周組織 / セメント質 / bishoshonates / HEBP / 再生 / 歯 / bisphosphonates / エナメルタンパク質 / 再生誘導 / 無細胞セメント質 / 有細胞セメント質 / 歯根膜 / モルモット
研究概要

本研究は、エナメルタンパク質の硬組織再生誘導作用の実際を、in vivo実験系を中心に詳細に観察し、セメント質と歯槽骨および歯根膜の形成誘導と、それらの空間配置を制御する仕組みについて検索することを目的に企画され、以下の検討を行った。
1.石灰化阻害モデルを用いた歯根膜腔へのエナメル基質の漏出と硬組織形成誘導:モルモットにbisphosphonateの一種であるHEBPを連続投与して新規に形成される骨や歯の基質の石灰化を完全に阻害すると、基質形成期のエナメル芽細胞層が既存のエナメル質表面から剥離し、歯根膜内にエナメル基質の貯留部(エナメル質プール)が高頻度で出現した。エナメル質プールはエナメル器の細胞で覆われて嚢胞状を呈する場合と、歯根膜組織に直接接する場合があったが、後者ではプール周囲に軟骨様組織が形成されている場合が多く認められた。軟骨様組織は本来の歯根膜組織内に形成されていたことから、少なくともモルモット臼歯に於いては、エナメルタンパク質には歯小嚢由来の未分化間葉細胞を軟骨細胞へと分化させ、軟骨形成を誘導する作用があることが示唆された。
2.新鮮抜去切歯の異所性埋植実験:ラットから切歯を抜歯してエナメル質表面を露出させ、直ちに同系ラットの皮下に移植してエナメル質と結合組織界面での変化を経時的に観察したところ、一部で幼若エナメル質表面に限局性に骨様組織が形成され、エナメル質基質に骨様組織の形成誘導作用がある可能性が示唆された。
3.エナメル質粗抽出物の末梢結合組織への作用:豚エナメル質の粗抽出物(エムドゲイン)をラットの背部皮下組織と筋膜内に直接注入し、あるいは基材に含浸させて長期徐放させても、硬組織の形成誘導は見られなかった。幼若ラット切歯のエナメル質を単離して皮下に埋入した場合も硬組織形成は認められなかった。
以上より、エナメルタンパク質は末梢結合組織の細胞に対しては特段の作用を持たないが、歯小嚢に由来する歯根膜細胞の硬組織形成能を促進し、歯周組織の再生を促す効果を有することが明らかとなった。

報告書

(4件)
  • 2002 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2001 実績報告書
  • 2000 実績報告書
  • 研究成果

    (65件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (65件)

  • [文献書誌] 高野吉郎: "初期石灰化と添加的石灰化機構の検証-Bisphosphonateによる石灰化阻害実験系の解析データから-"解剖学雑誌. 75. 351-2355 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 寺島達夫: "エナメル質形成不全ラット(ami)におけるエナメル質形成について"エナメル質比較発生学懇話会記録. 7. 33-43 (2000)

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  • [文献書誌] Nanci, A.: "Morphological and Immunocytochemical Analysis on the Effects of Diet-Induced Hypocalcemia on Enamel Maturation In the Rat Incisor"J Histochem. Cytochem. 48(8):1043-1057,2000. 48. 1043-1057 (2000)

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  • [文献書誌] Takano, Y.: "Differential Involvement of Matrix Vesicles during the Initial and Appositional Mineralization Processes in Bone, Dentin and Cementum"Bone. 26. 333-339 (2000)

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  • [文献書誌] Satokata, I.: "Msx2 deficiency in mice causes pleiotropic defects in bone growth and ectodermal organ formation"Nature Genetics. 24. 391-395 (2000)

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  • [文献書誌] Ohma, N.: "Distribution of noncollagenous dentin matrix proteins and proteoglycans, and their relation to calcium accumulation in the HEBP-affected rat incisors"Eur. J Oral Sci. 108. 222-232 (2000)

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  • [文献書誌] Yazawa, H.: "Time-related changes of developing enamel crystals after exposure to the tissue fluid in vivo : Analysis of subcutaneously implanted rat incisor"Arch Histol Cyotol. 63. 169-179 (2000)

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  • [文献書誌] Muramoto, T.: "Time-related changes of periodontal mechanoreceptors after loss of occlusal stimuli in rat molars"Arch. Histol Cytol. 63. 369-380 (2000)

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  • [文献書誌] Jayawardena, C.: "Effects of systemic administration of a potential mineralization inhibitor on cementum pearl formation in guinea pig molars"Frontier of Molecular Biology Technology in Biological Reconstructive Dentistry and Medicine. 7-1-7-5 (2000)

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  • [文献書誌] Takano, Y.: "Morphological approach for the study of biological mineralization : Methods for the analysis of calcium localization, calcium movement, and mineral deposition"Frontier of Molecular Biology Technology in Biological Reconstructive Dentistry and Medicine. S-8-1-S-8-10 (2000)

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  • [文献書誌] Sato, Y.: "Demonstration of calcium deposition in duct of submandibular salivary gland using GBHA staining"Hosp. Dent. (Tokyo) 13:29-31,2001. 13. 29-31 (2001)

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  • [文献書誌] Suda, N.: "Parathyroid hormone-related protein (PTHrP) is required for normal intramembranous bone development"J Bone Miner Res 16:2182-2191,2001. 16. 2182-2191 (2001)

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  • [文献書誌] Nakano, Y.: "Phosphatase Activities of Rat Intestinal Enterocytes and Their Reaction to Diverse Luminal pH, with Special References to the Possible Localization of Phytase along Brush Border Membrane"Arch Histol Cytol 64:483-492,2001. 64. 483-492 (2001)

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  • [文献書誌] Garcia-Rocha, M.: "Intracellular distribution of glycogen synthase and glycogen in primary cultured rat hepatocytes"Biochem J. 357(Pt 1). 17-24 (2001)

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  • [文献書誌] Santiwong, P.: "GAP-43 immunohistochemical and ultrastructural changes in jaw muscle spindles of the rat following loss of occlusion"Archs Oral Biol.. 47. 227-237 (2002)

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  • [文献書誌] Kitahara, Y.: "Disturbed Tooth Development in Parathyroid Hormone-related Protein (PTHrP) Gene-knockout Mice"Bone. 30. 48-56 (2002)

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  • [文献書誌] Baba, O.: "Expression of Alternatively Spliced RNA Transcripts of Amelogenin Gene Exons 8 and 9 and its End Products in the Rat Incisor"J. Histochem. Cytochem.. 50. 1229-1236 (2002)

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  • [文献書誌] Jayawardena, C.: "Effects of a potential mineralization inhibitor on formation of cementum pearls, a type of acellular extrinsic fiber cementum in guinea pig molars, with special references to the origin of intrinsic matrix and process of mineralization"Eur. J Oral Sci.. 110. 261-269 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mekaariruk, K.: "Parathyroid hormone-related protein (PTHrP) uis not required for mouse tooth germ development but indispensable for maintenance of osteoclastgenesis in the alveolar bone"Arch Oral Biol.. 47(9). 665-672 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Watanabe, E.: "Ca-binding Domains in the Odontoblast Layer of Rat Molars and Incisors Under Normal and Pathological Conditions"Arch. Histol. Cytol.. 65(3). 233-244 (2002)

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  • [文献書誌] 中野裕紀子: "半導体シリコンセンサーを用いるpHイメージング顕微鏡による生物試料の局所pHマッピングの試み"分析化学. 51. 473-476 (2002)

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  • [文献書誌] Sakamoto, Y.: "Mor ossification in osteogenic disorder Shionogi rat.phological influence of ascorbic acid deficiency on endochondral"Anat. Rec.. 268. 93-104 (2002)

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  • [文献書誌] TAKANO, Y.: "Induction of Functional Innervation Including Mechano-Sensory Receptors in Growing Dental and Periodontal Tissues after Ectopic Transplantation of Teeth and Tooth Germs"Proceedings of International Symposium on Oral Tissue Regeneration at Chulalongcorn Univ. Thailand. 43-46 (2002)

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  • [文献書誌] SANTIWONG, P.: "The influence of occlusal stimuli on structural integrity of periodontal mechanoreceptors and jaw muscle spindles"Proceedings of International Symposium on Oral Tissue Regeneration at Chulalongcorn Univ. Thailand. 47-53 (2002)

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  • [文献書誌] Nanci A.: "Morphological and Immunocytochemical Analysis on the Effects of Diet-Induced Hypocalcemia on Enamel Maturation In the Rat Incisor"J Histochem. Cytochem. 48(8). 1043-1057 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Takano Y.: "Differential Involvement of Matrix Vesicles during the Initial and Appositional Mineralization Processes in Bone, Dentin and Cementum"Bone. 26. 333-339 (2000)

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  • [文献書誌] Satokata I.: "Msx2 deficiency in mice causes pleiotropic defects in bone growth and ectodermal organ formation"Nature Genetics. 24. 391-395 (2000)

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  • [文献書誌] Ohma N.: "Distribution of noncollagenous dentin matrix proteins and proteoglycans, and their relation to calcium accumulation in the HEBP-affected rat incisors"E J Oral Sci.. 108. 222-223 (2000)

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  • [文献書誌] Yazawa R.: "Time-related changes of developing enamel crystals after exposure to the tissue fluid in vivo : Analysis of subcutaneously implanted rat incisor"Arch Histol Cyotol. 63. 169-179 (2000)

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  • [文献書誌] Muramoto T.: "Time-related changes of periodontal mechanoreceptors after loss of occlusal stimuli in rat molars"Arch Histol Cyotol. 63. 369-380 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Jayawardena C.: "Effects of systemic administration of a potential mineralization inhibitor on cementum pearl formation in guinea pig molars"Frontier of Molecular Biology Technology in Biological Reconstructive Dentistry and Medicine. SYMPO7. 1-5 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Takano Y.: "Morphological approach for the study of biological mineralization : Methods for the analysis of calcium localization, calcium movement, and mineral, deposition"Frontier of Molecular Biology Technology in Biological Reconstructive Dentistry and Medicine. S-8. 1-10 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sato Y.: "Demonstration of calcium deposition in duct of submandibular salivary gland using GBHA staining"Hosp. Dent. (Tokyo). 13. 29-31 (2001)

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  • [文献書誌] Suda N.: "Parathyroid hormone-related protein (PTHrP) is required for normal intramembranous bone development"J Bone Miner Res. 16. 2182-2191 (2001)

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  • [文献書誌] Nakano Y.: "Phosphatase Activities of Rat Intestinal Enterocytes and Their Reaction to Diverse Luminal pH, with Special References to the Possible Localization of Phytase along Brush Border Membrane"Arch Histol Cytol. 64. 483-492 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Garcia-Rocha M.: "Intracellular distribution of glycogen synthase and glycogen in primary cultured rat hepatocytes"Biochem J. 357(Pt1). 17-24 (2001)

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  • [文献書誌] Kitahara Y.: "Disturbed tooth development in parathyroid hormone-related protein (PTHrP)-gene knockout mice"Bone. 30(1). 48-56 (2002)

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  • [文献書誌] Santiwong P.: "Growth-associated protein-43 immunohistochemical and ultrastructural changes in jaw muscle spindles of the rat following loss of occlusion"Arch Oral Biol.. 47. 227-237 (2002)

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  • [文献書誌] Nakano Y.: "An attempt of pH mapping on biological speciments by pH-imaging microscope using a semiconductor silicon sensor"BUNSEKIKAGAKU. 51(6). 473-476 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Jayawardena CK.: "On the origin of intrinsic matrix of acellular extrinsic fiber cementum : studies on growing cementum pearls of normal and bisphosphonate-affected guinea pig molars"Eur J Oral Sci. 110(3). 261-269 (2002)

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  • [文献書誌] Jayawardena CK.: "A unique localization of mechanoreceptors in the periodontal tissue of guinea pig teeth"Arch Histol Cytol. 65(3). 233-244 (2002)

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  • [文献書誌] Mekaapiruk K.: "The influence of parathyroid hormone-related protein. (PTHrP) on tooth-germ development and osteoclastogenesis in alveolar bone of PTHrP-knock out and wild-type mice in vitro"Arch Oral Biol.. 47(9). 665-672 (2002)

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  • [文献書誌] Baba O.: "Expression of Alternatively Spliced ; RNA Transcripts of Amelogenin Gene Exons 8 and 9 and its End Products in the Rat Incisor"J. Histochem. Cytochem.. 50. 1229-1236 (2002)

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  • [文献書誌] Sakamoto Y.: "Morphological influence of ascorbic acid deficiency on endochondral ossification in osteogenic disorder Shionogi rat"Anat Rec. 268(2). 93-104 (2002)

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  • [文献書誌] Watanabe E.: "Ca-binding Domains in the Odontoblast Layer of Rat Molars and Incisors under Normal and Pathological Conditions"Arch Histol Cytol. 65(4). 337-346 (2002)

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  • [文献書誌] TAKANO Y. : T.: "Induction of Functional Innervation Including Mechano- Sensory Receptors in Growing Dental and Periodontal Tissues after Ectopic Transplantation of Teeth and Tooth Germs"Proceedings of International Symposium on Oral Tissue Regeneration at Chulalongcorn Univ. Thailand. 43-46 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] SANTIWONG P.: "The influence of occlusal stimuli on structural integrity of periodontal mechanoreceptors and jaw muscle spindles"Proceedings of International Symposium on Oral Tissue Regeneration at Chulalongcorn Univ. Thailand. 47-53 (2002)

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  • [文献書誌] Yazawa Hiroshi: "Time-related changes of developing enamel crystals after exposure to the tissue fluid in vivo : Analysis of subcutaneously implanted rat incisor."Archives of Histology and Cytology. 63. 169-179 (2000)

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  • [文献書誌] Muramoto Takashi: "Time-related changes of periodontal mechanoreceptors after loss of occlusal stimuli in rat molars."Archives of Histology and Cytology. 63. 369-380 (2000)

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公開日: 2000-04-01   更新日: 2016-04-21  

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