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コブラ科とクサリヘビ科蛇毒の新規神経毒および血栓毒蛋白質の探索とその生化学的研究

研究課題

研究課題/領域番号 12575035
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分海外学術
研究分野 構造生物化学
研究機関明治薬科大学

研究代表者

森田 隆司  明治薬科大学, 薬学部, 教授 (90128108)

研究分担者 小池 恒  明治薬科大学, 薬学部, 助手 (50328978)
鳥羽 通久  日本蛇族学術研究所, 所長 (40109856)
阿刀田 英子  明治薬科大学, 薬学部, 助教授 (20221046)
研究期間 (年度) 2000 – 2003
研究課題ステータス 完了 (2003年度)
配分額 *注記
12,300千円 (直接経費: 12,300千円)
2003年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円)
2002年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
2001年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
2000年度: 4,000千円 (直接経費: 4,000千円)
キーワード神経毒蛋白質 / 血栓毒蛋白質 / C型レクチン様蛋白質 / コブラ科蛇 / クサリヘビ科蛇毒 / コブラ科蛇毒
研究概要

アジア大陸、アフリカ大陸、南アメリカ大陸等の大陸に生息するヘビ毒中の神経毒成分を単離し、その性質を明らかにした。国内外共に、研究材料であるヘビ毒の入手が最近困難になってきたので、現地を訪問し、ヘビ毒と毒腺を採取した。ヘビ毒からのタンパク質の単離はC型レクチン様タンパク質と新規神経毒タンパク質を単離した。生理的に必要だと判断したタンパク質は毒腺よりRT-PRCまたはcDNAライブラリーを作成し、そのタンパク質の全アミノ酸配列を決定した。さらに、粗毒からそれぞれのタンパク質を大量に精製し結晶化した。ヘビの毒腺と粗毒の入手を試み、C型レクチン様タンパク質と新規神経毒タンパク質の単離を試みた。森田はオーストラリア大陸の東部を訪れ、オーストラリアに生息するコブラ科のヘビ(最強のプロトロンビンアクチベータが含まれるタイパンヘビ、タイガーヘビが生息)と、主にPseudechis属ウミヘビの2種、P.australisとP.ployphyriacusの入手経路の情報を入手しその後、後者の毒腺を入手した。森田は2003年7月にLiverpool大学を訪問し、Theakston博士、Aura Kamiguchi博士、Harrison博士とアフリカ産のヘビEchis ocellatus毒を用いての共同研究について協議し、その共同研究が現在開始されている。北米のケンタッキーにある爬虫類動物園のKristen Wiley氏の協力で、インド産のDaboia russelli russelliの毒腺を摘出後、当研究室に送付してもらった。また、アフリカ南部に生息するBitis arietansの毒腺を南アフリカのSA Venom社Beric Muller氏の協力で毒腺を摘出し、入手することができた。

報告書

(5件)
  • 2003 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2002 実績報告書
  • 2001 実績報告書
  • 2000 実績報告書
  • 研究成果

    (65件)

すべて 2003 2002 その他

すべて 雑誌論文 (6件) 文献書誌 (59件)

  • [雑誌論文] Mutations in autolytic loop-2 and at Asp^<554> of human prothrombin that enhance protein C activation by meizothrombin.2003

    • 著者名/発表者名
      小池 恒ら
    • 雑誌名

      J.Biol.Chem. (in press)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [雑誌論文] Cloning and characterization of novel snake venom proteins that block smooth muscle contraction.2002

    • 著者名/発表者名
      山崎 泰男ら
    • 雑誌名

      Eur.J.Biochem. 269

      ページ: 2708-2715

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [雑誌論文] Purification and cloning of toxins from elapid venoms that target cyclic nucleotide-gated ion channels.2002

    • 著者名/発表者名
      山崎 泰男ら
    • 雑誌名

      Biochemistry 41

      ページ: 11331-11337

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [雑誌論文] Prothrombin activation during carbon tetrachloride-induced acute liver injury in mice.2002

    • 著者名/発表者名
      水口 浩一ら
    • 雑誌名

      Thrombosis Res. 106

      ページ: 257-261

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [雑誌論文] Calcium binding analysis and molecular modeling reveal echis coagulation factor IX/factor X-binding protein has the Ca-binding properties and Ca ion-independent folding of other C-type lectin-like proteins.2002

    • 著者名/発表者名
      阿刀田 英子ら
    • 雑誌名

      FEBS Lett. 531

      ページ: 229-234

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [雑誌論文] A new gene structure of disintegrin family : A subunit of dimeric disintegrin has short coding region.2002

    • 著者名/発表者名
      奥田 大樹ら
    • 雑誌名

      Biochemistry 41

      ページ: 14248-14253

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] 福田耕一ら: "Crystal structure of flavocetin-A, a platelet glycoprotein Ib-binding protein, raveals a novel cyclic tetramer of C-type lectin-like heterodimers."Biochemistry. 39. 1915-1923 (2000)

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  • [文献書誌] 奥田 大樹ら: "Comparative biochemistry of disintegrins isolated from snake venom : Consideration of the taxonomy and geographical distribution of the snakes in the genus Echis."J.Biochem.. 129. 615-620 (2001)

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  • [文献書誌] 岩橋 英彦ら: "The determination of plasma prothrombin level by Ca^<2+>-dependent prothrombin activator (CA-1) during warfarin anticoagulation."J.Heart Valve Dis.. 10. 388-392 (2001)

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  • [文献書誌] 水野 洋ら: "Crystal structure of an anticoagulant protein in complex with the Gla domain of factor X."Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 98. 7230-7234 (2001)

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  • [文献書誌] 奥田 大樹ら: "Purification and characterization of a new RGD/KGD-containing dimeric disintegrin, piscivostatin, from the venom of Agkistrodon piscivorus piscivorus : The unique effect of piscivostatin on platelet aggregation."J.Biochem.. 130. 407-415 (2001)

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  • [文献書誌] 広津 晶子ら: "Crystal structure of bitiscetin, a von Willebrand factor-dependent platelet aggregation inducer."Biochemistry. 40. 13592-13597 (2001)

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  • [文献書誌] 白石 ら: "A Defect in collagen receptor-Ca^<2+> signaling system in platelets from cattle with Chediak-Higashi syndrome."Thromb.Haemost.. 87. 334-341 (2001)

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  • [文献書誌] 山崎 泰男ら: "Cloning and characterization of novel snake venom proteins that block smooth muscle contraction."Eur.J.Biochem.. 269. 2708-2715 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 山崎 泰男ら: "Purification and cloning of toxins from elapid venoms that target cyclic nucleotide-gated ion channels."Biochemistry. 41. 11331-11337 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 水口 浩一ら: "Prothrombin activation during carbon tetrachloride-induced acute liver injury in mice."Thrombosis Res.. 106. 257-261 (2002)

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    • 関連する報告書
      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 阿刀田 英子ら: "Calcium binding analysis and molecular modeling reveal echis coagulation factor IX/factor X-binding protein has the Ca-binding properties and Ca ion-independent folding of other C-type lectin-like proteins."FEBS Lett.. 531. 229-234 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 奥田 大樹ら: "A new gene structure of disintegrin family : A subunit of dimeric disintegrin has short coding region."Biochemistry. 41. 14248-14253 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 小池 恒ら: "Mutations in autolytic loop-2 and at Asp^<554> of human prothrombin that enhance protein C activation by meizothrombin."J.Biol.Chem.. 15015-15022 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 鹿本 泰生ら: "Crystal structure of Mg^<2+> and Ca^<2+>bound Gla domain of factor IX complexed with binding protein."J Biol Chem. 278(26). 24090-24094 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 真板 宣夫ら: "Crystal structure of von Willebrand factor Al domain complexed with snake venom, bitiscetin : insight into glycoprotein Ibalpha binding mechanism induced by snake venom proteins."J Biol Chem. 278(39). 37777-37781 (2003)

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  • [文献書誌] 藤井 佳史ら: "Crystal structure of trimestatin, a disintegrin containing a cell adhesion recognition motif RGD."J.Mol.Biol.. 332(5). 1115-1122 (2003)

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  • [文献書誌] 堀井 克紀ら: "Structural characterization of EMS16,an antagonist of collagen receptor (GPIa/IIa) from the venom of Echis multisquamatus."Biochemistry. 42(43). 12497-12502 (2003)

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  • [文献書誌] 奥田 大樹ら: "Characterization and preliminary crystallographic studies of EMS16, an antagonist of collagen receptor (GPIa/IIa) from the venom of Echis multisquamatus."J.Biochem.. 134(1). 19-23 (2003)

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  • [文献書誌] 山崎 泰男ら: "Snake venom vascular endothelial growth factors (VEGFs) exhibit potent activity through their specific recognition of KDR VEGF receptor 2)."J.Biol.Chem.. 278(5). 51985-51988 (2003)

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  • [文献書誌] 森田 隆司: "Use of snake venom inhibitors in studies of the function and tertiary structure of coagulation factor."International Journal of Hematology. 7 (2004)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Fukuda K., Mizuno H., Atoda H., Morita T.: "Crystal structure of flavocetin-A, a platelet glycoprotein Ib-binding protein, reveals a novel cyclic tetramer of C-type lectin-like heterodimers."Biochemistry. 39. 1915-1923 (2000)

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  • [文献書誌] Shin Y., Okuyama I., Hasegawa J., Morita T.: "Molecular cloning of glycoprotein lb-binding protein, flavocetin-A, which inhibits platelet aggregation."Thrombosis Res.. 99. 239-247 (2000)

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  • [文献書誌] Inoue-Suzuki K., Ozaki Y., Kainoh M., Shin Y., Wu Y., Yatomi Y., Ohmori T., Tanaka T., Satoh K., Morita T.: "Rhodocytin induces platelet aggregation by interacting with glycoprotein Ia/IIa (GPIa/IIa, integrin α_2β_1): involvement of GPIa/IIa-associated Src and protein tyrosine phosphorylation."J.Biol.Chem.. 276. 1643-1652 (2001)

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  • [文献書誌] Okuda D., Nozaki C., Sekiya F., Morita T.: "Comparative biochemistry of disintegrins isolated from snake venom : Consideration of the taxonomy and geographical distribution of the snakes in the genus Echis."J.Biochem.. 129. 516-620 (2001)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Iwahashi H., Kimura M., Nakajima N., Yamada D., Morita T.: "The determination of plasma prothrombin level by Ca^<2+>-dependent prothrombin activator (CA-1) during warfarin anticoagulation."J. Heart Valve Dis. 10. 388-392 (2001)

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  • [文献書誌] Mizuno H., Fujimoto Z., Atoda H., Morita T.: "Crystal structure of an anticoagulant protein in complex with the Gla domain of factor X."Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 98. 7230-7234 (2001)

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  • [文献書誌] Okuda D., Morita T.: "Purification and characterization of a new RGD/KGD-containing dimeric disintegrin, piscivostatin, from the venom of Agkistrodon piscivorus piscivorus : The unique effect of piscivostatin on platelet aggregation."J.Biochem.. 130. 407-415 (2001)

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  • [文献書誌] Hirotsu S., Mizuno H., Fukuda K., Ma C.Q., Matsui T., Hamako J., Morita T., Titani, K.: "Crystal structure of bitiscetin, a von Willebrand factor-dependent platelet aggregation inducer."Biochemistry. 40. 13592-13597 (2001)

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  • [文献書誌] Shiraishi M., Kawashima S., Moroi M., Shin Y., Morita T., Horii Y., Ikeda M., Ito K.: "A Defect in collagen receptor-Ca^<2+> signaling system in platelets from cattle with Chediak-Higashi syndrome."Thromb.Haemost.. 87. 334-341 (2002)

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  • [文献書誌] Yamazaki Y., Koike H., Sugiyama Y., Motoyoshi K., Wada T., Hishinuma S., Mita M., Morita T.: "Cloning and characterization of novel snake venom proteins that block smooth muscle contraction."Eur.J.Biochem.. 269. 2708-2715 (2002)

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  • [文献書誌] Yamazaki Y., Brown R.L., Morita T.: "Purification and cloning of toxins from elapid venoms that target cyclic nucleotide-gated ion channels."Biochemistry. 41. 11331-11337 (2002)

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  • [文献書誌] Mizuguchi H., Yamazaki Y., Shikamoto Y., Shin Y., Sonoda J., Morita T.: "Prothrombin activation during carbon tetrachloride-induced acute liver injury in mice."Thrombosis Res.. 106. 257-261 (2002)

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  • [文献書誌] Atoda H., Kaneko H., Mizuno H., Morita T.: "Calcium binding analysis and molecular modeling reveal echis coagulation factor IX/factor X-binding protein has the Ca-binding properties and Ca ion-independent folding of other C-type lectin-like proteins."FEBS Lett.. 531. 229-234 (2002)

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  • [文献書誌] Okuda D., Koike H., Morita T.: "A new gene structure of the disintegrin family : A subunit of dimeric disintegrin has short coding region."Biochemistry. 41. 14248-14254 (2002)

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  • [文献書誌] Koike H., Okuda D., Morita T.: "Mutations in the autolytic loop-2 and at Asp554 ーf human prothrombin that enhance protein C activation by meizothrombin."J.Biol.Chem.. 278. 15015-15022 (2002)

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  • [文献書誌] Shikamoto Y., Morita T., Fujimoto Z., Mizuno H.: "Crystal structure of Mg^<2+>-and Ca^<2+>-bound Gla domain of factor IX complexed with binding protein."J.Biol.Chem.. 278. 24090-24094 (2003)

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  • [文献書誌] Maita N., Nishio K., Nishimoto E., Matsui T., Shikamoto Y., Morita T., Sadler J.E., Mizuno H.: "Crystal Structure of von willebrand factor Al domain complexed with snake venom, Bitiscetin."J.Biol.Chem.. 278. 37777-37781 (2003)

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公開日: 2000-04-01   更新日: 2016-04-21  

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