| 研究概要 |
冬眠哺乳動物シマリスで発見された冬眠特異的タンパク質HP-20,-25,-27はN末端側にコラーゲン様の繰り返し配列をもつ,同一ファミリーに属するタンパク質である.これらの遺伝子は,リス科の冬眠動物であるシマリスやジリスでは肝臓特異的に発現し,冬眠に伴う発現調節を受けており,冬眠時にはその発現は抑制されている.一方,非冬眠動物のタイワンリスでは偽遺伝子化しており,発現していない.本研究では,これら冬眠特異的遺伝子の肝臓特異的な転写調節機構およびタイワンリスにおいて偽遺伝子化している原因の解明を目的として,シマリスHP-20,-25,27遺伝子とタイワンリスHP-25,-27遺伝子について,遺伝子クローンを単離し,遺伝子構造と5'上流配列の肝細胞におけるプロモーター活性について解析を行った.その結果として,以下の成果を得ることができた。
(1)シマリスHP-20,-25,27遺伝子は3つのエクソンにより構成されており,その遺伝子構造が保存されてことから,遺伝子重複により生じたものと推測される。
(2)シマリスHP-25遺伝子の肝細胞特異的な転写には-80までの5'上流領域が必要であり,-75〜46領域に結合するHNF-4がそのプロモーター活性において重要な働きを担っている。
(3)タイワンリスでHP-25遺伝子が発現していない主要な原因は,-57の塩基置換によりプロモーター領域にHNF-4が結合できないことにあると考えられた。
(4)シマリスHP-20遺伝子の肝細胞での転写には転写開始点から-57までの5'上流領域が必要であり,その転写活性化にはHNF-1が関与していることが明らかになった。
(5)シマリスHP-27遺伝子の肝細胞での転写には転写開始点から-160までの5'上流領域が必要であることが明らかになった。一方,タイワンリスHP-27遺伝子では-160〜-130領域の塩基置換により発現していないものと考えられた。
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