| 研究課題/領域番号 |
12670425
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
内科学一般
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
中田 安成 岡山大学, 医学部, 教授 (80112150)
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| 研究分担者 |
森 秀治 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教授 (50220009)
唐下 博子 岡山大学, 医学部, 助教授 (10197840)
片岡 幹男 岡山大学, 医学部, 教授 (50177391)
崎山 順子 岡山大学, 医学部, 助手 (40204599)
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| 研究期間 (年度) |
2000 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
2,900千円 (直接経費: 2,900千円)
2002年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
2001年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
2000年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
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| キーワード | サルコイドーシス / プロピオニバクテリウム-アクネス / サルコイド肉芽腫 / サイコイドーシス / プロピオニバクテリウムーアクネス |
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| 研究概要 |
1.気管支肺胞洗浄液中細胞よりのP.acnesDNAの検出;
サルコイドーシス患者の気管支肺胞洗浄液中細胞をGAM平板培地に播き、コロニーが認められたものは半流動高層培地で増菌した。分離したP.acnesからSepa Gene DNA抽出キットを用いてDNAを抽出・精製した。PCRは22塩基対と21塩基対からなる2組のP.acnes特異的プライマーを用いて、40サイクルづつ、2回のPCRを行う、Nested PCR法により行った。使用したプライマーの特異性をP.acnes標準株ATCC11828株、臨床分離株3株、対照として結核菌臨床分離株10株、非定型抗酸菌分離株10株にて検討したが、P.acnes株ではいずれもバンドは検出されたが、対照とした菌株からはバンドは検出されなかった。サ症患者30例の気管支肺胞洗浄液細胞からは21例(70%)にバンドが認められたが、対象患者30例からは7例(23%)と低率であり、サルコイドーシス患者において有意に高率(P<0.001)であった。
2.病巣におけるP.acnes局在の検討;
塗沫した気管支肺胞洗浄液液中細胞をAmeXで固定し、除蛋白したのちpolymeraseの混合液と共にサーモサイクラーでPCRし、ジゴキシゲニンでラベルしたプローブhybridizさせて、抗ジゴキシゲニン抗体結合アルカリフォスファターゼを反応した後、発色させ、P.acnesの局在を検討した。気管支肺胞洗浄液細胞にP.acnes DNAが検出された3例のサルコイドーシス患者肺胞マクロファージに陽性所見が認められたが、2例の非サルコイドーシス患者ではいずれも陰性であった。
以上の結果からサルコイドーシス患者の肺病巣にP.acnesの存在が明らかで、サルコイド肉芽腫の形成に強く関与していることが示唆された。
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