| 研究課題/領域番号 |
12670474
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
消化器内科学
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| 研究機関 | 岐阜大学 |
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研究代表者 |
安藤 量基 岐阜大学, 医学部・附属病院, 助手 (20265276)
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| 研究期間 (年度) |
2000 – 2001
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| 研究課題ステータス |
完了 (2001年度)
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| 配分額 *注記 |
3,000千円 (直接経費: 3,000千円)
2001年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
2000年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
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| キーワード | TNF-α / CTL / HBV / ウイルス排除 / 増殖 |
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| 研究概要 |
近年の研究からTNF-αは、細胞障害やウイルス排除機構に深く関わっているだけでなく、細胞の分化・増殖にも影響していることがわかってきた。このため、肝細胞の破壊やウイルス排除において中心的役割を担っているCTLの増殖に対するTNF-αの影響を検討する必要がある。
我々の検討では、TNF wild type(WT)マウスでHBV特異的CTLを誘導できる免疫法では、TNF-αknockout(KO)マウスからは極めて低いCTL活性を示すlineしか誘導できなかった。また、免疫したTNF-αKOの脾細胞に含まれる、HBV特異的CD8陽性細胞のflequencyは低かった。In vitroの培養系においても、TNF-α WT CTL lineは増殖も良好で、細胞障害活性も極めて高く維持されるのに比して、TNF-α KO CTL lineは増殖能が低く、細胞障害活性も低値のまま推移した。これらのデータから、in vivoおよびin vitroにおけるウイルス特異的CTLの誘導には、TNF-αの存在は極めて重要であると考えられる。しかしながら、TNF-α KO CTL lineを限界希釈法でクローニングしたところ、高い細胞障害活性を有するTNF-α KO CTL cloneが存在することが判明した。すなわちTNF-α KOマウスにおいても、HBV特異的CTLは分化することはできることを意味している。この事実から、TNP-αはCTLの分化ではなく、増殖に深く関与していることが考えられた。筆者らが樹立した、極めて高い増殖能と細胞障害活性を有するHBV特異的CTLである、clone 6C2(TNF WTを用いた実験では、feeder cellをTNF-α KO脾細胞を用いてTNF-αの培養系への供給を抑制したところ(CTL自身が産生するTNF-αは存在する)、明らかに6C2の増殖は低下した。可溶型TNF-α(sTNF-α)は消失させるが、膜型TNF-α(mTNF-α)を増加させる、MMPs inhibitorを添加すると、clone 6C2の増殖は強く抑制された。また、MMPs inhibitorの存在下で、rmTNF-αを添加すると、その増殖は有意に回復したことから、CTLの増殖にはsTNF-αが関与していることが明らかとなった。
以上の実験結果から、HBV特異的CTLはTNF-αはなくとも分化することはできるものの、増殖するためには不可欠な存在であると言え、またこの増殖にはsTNF-αが特に重要な役割を果たしていることがわかった。
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