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培養肝細胞を用いたC型肝炎ウイルス増殖過程の解析と抗ウイルス薬開発への応用

研究課題

研究課題/領域番号 12670477
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 消化器内科学
研究機関三重大学

研究代表者

垣内 雅彦  三重大学, 医学部, 講師 (70214244)

研究分担者 小原 道法  東京都臨床医学総合研究所, 感染生体防御研究部門, 室長 (10250218)
渡邉 省三  三重大学, 保健管理センター, 教授 (20134934)
生駒 次朗  三重大学, 医学部附属病院, 助手 (80283521)
研究期間 (年度) 2000 – 2002
研究課題ステータス 完了 (2002年度)
配分額 *注記
3,700千円 (直接経費: 3,700千円)
2002年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2001年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
2000年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
キーワードC型肝炎ウイルス / 培養細胞 / 電子顕微鏡 / 免疫電子顕微鏡 / 免疫組織化学 / ウイルスベクター / ラクトフェリン / 鉄制限食 / 鉄製限食
研究概要

HCVの培養細胞系では、ヒト肝細胞とHepG2細胞を紫外線照射にて不活化したセンダイウイルスを用いて融合し、ヒト肝細胞由来IMY細胞を樹立しました。この細胞にC型慢性肝炎患者血清を添加するとHCV(10^4copies/ml程度)の培養が可能となりました。IMY細胞はNativeなHCVの増殖が可能な細胞です。この細胞にHCV全長遺伝子(type 1b)のcDNAを遺伝子工学的手法を用い、効率よくHCV(10^<10>copies/ml以上)を複製することができるようになりました。このシステムを用い、HCVの増殖は細胞質内で行われ、滑面小包体内へHCV粒子が出芽し、細胞外へと排出されることを電子顕微鏡下に明らかとし、更に培養細胞の上清中に多数のHCVが存在することを免疫電子顕微鏡下にとらえた。この研究結果を第51回と第52回米国肝臓学会に発表した。現在、分担研究者小原道法先生がNature medicineに投稿中である。更に牛ラクロフェリンがGenotype 1b,高ウイルス量のC型慢性肝炎患者のウイルス量を低下させることを明らかとし、第52回米国肝臓学会に発表し、American Journal of Gastroenterology, 97(3), 766-777, 2002.に報告しました。さらに鉄制限食がC型慢性肝炎の治療に有効であることを明らかにし、Hepato-Gastroenterology, 49(44):537-539, 2002に報告し、第6回日本肝臓学会大会のシンポジウム3(肝臓学会・消化器病学会合同)難治性C型慢性肝炎の治療法update.に「難治性C型慢性肝炎に対するUDCA併用鉄制限食療法とラクトフェリン療法」という演題で発表しました。

報告書

(4件)
  • 2002 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2001 実績報告書
  • 2000 実績報告書
  • 研究成果

    (34件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (34件)

  • [文献書誌] Motoh Iwasa, Masahiko Kaito, Jiro Ikoma, Shozo Watanabe et al.: "Dietary Iron Restriction Improves Aminotransferase Levels in Chronic Hepatitis C Patients"Hepato-Gastroenterology. 49(44). 537-839 (2002)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Jiro Ikoma, Masahiko Kaito, Shozo Watanabe, et al.: "Early Diagnosisi of Hepatocellular Carcinoma Using a Sensitive Assay for Serum Des-γ-Carboxy Prothrombin : a Prospective Study"Hepato-Gastroenterology. 49(43). 235-238 (2002)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Motoh Iwasa, Masahiko Kaito, Jiro Ikoma, Shozo Watanabe et al.: "Lactoferrin inhibits hepatitis C virus (HCV) viremia in chronic hepatitis C patients with a high viral load and HCV genotype 1b"American Journal of Gastroenterology. 97(3). 766-767 (2002)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Naoki Fujita, Masahiko Kaito, Jiro Ikoma, Shozo Watanabe, et al.: "Non-Immune Complexed HCV RNA Titer in Serum as a Predictor of Interferon Response in Patients with Chronic Hepatitis C. Gastroenterology"American Journal of Gastroenterology. 98(3)(In press). (2003)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 垣内雅彦: "IMY細胞上清中のHCV粒子に関する免疫電子顕微鏡的研究"西部肝臓フォーラム 01'記録集編集 原田尚/谷川久一. 122-137 (2002)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 垣内雅彦, 岩佐元雄, 足立幸彦他: "難治性C型慢性肝炎に対するUDCA併用鉄制限食療法とラクトフェリン療法"消火器科 特集II「難治性C型慢性肝炎の治療法」. (In press).

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Masahiko Kaito, Naoki Fujita, Jiro Ikoma, Shozo Watanabe, et al.: "Hepatitis C Virus Particles Detected by Immunogold Electron Microscopy"Science, Technology and Education of Microscopy, an Overview. A. Mendez Vilas編集(In press). (2003)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Naoki Fujita, Masahiko Kaito, Satoshi Ishida, Naoki Nakagawa, Jiro Ikoma, Yukihiko Adachi, and Shozo Watanabe: "Paraformaldehyde Protects of Hepatitis C Virus Particles During Ultracenrifugation"Journal of Medical Virology. 63. 108-116 (2001)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Satoshi Ishida, Masahiko Kaito, Michinori Kohara, KyoKo Tsukiyama-Kohara, Naoki Fujita, Jiro Ikoma, Yukihiko Adachi, Shozo Watanabe: "Hepatitis C virus core particle detected by immunoelectron microscopy and optical rotation technique"Hepatology Research. 20. 335-347 (2001)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Motoh Iwasa, Masahiko Kaito, Jiro Ikoma, Yoshinao Kobayashi, Yuji Tanaka, Kunihiro Higuchi, Keisuke Takeuchi, Kazuko Iwata, Shozo Watanabe and Yukihiko Adachi: "Dietary Iron Restriction Improves Aminotransferase Levels in Chronic Hepatitis C Patients"Hepato-Gastroenterology. 49(44). 537-539 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Jiro Ikoma, Masahiko Kaito, Tomoaki Ishihara, Naoki Nakagawa, Akira Kamei, Naoki Fujita, Motoh Iwasa,Shigenori Tamaki, Shozo Watanabe, Yukihiko Adachi: "Early Diagnosis of Hepatocellular Carcinoma Using a Sensitive Assay for Serum Des-γ-Carboxy Prothrombin : a Prospective Study"Hepato-Gastroenterology. 49(43). 235-238 (2002)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Motoh Iwasa, Masahiko Kaito, Jiro Ikoma, Masaki Takeo, Ichiro Imoto, Yukihiko Adachi, Koji Yamagucji, Reiko Koixumi, Susumu Teraguchi: "Lactoferrin inhibits hepatitis C virus (HCV) viremia in chronic hepatitis C patients with a high viral load and HCV genotype 1b"American Journal of Gastroenterology. 97:3. 766-767 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Masahiko Kaito, Noriko Yasui-Kawamura, Motoh Iwasa, Yoshinao Kobayashi, Naoki Nakagawa, Naoki Fujita, Jiro Ikoma, Esteban C.Gabazza, Shozo Watanabe, Yukihiko Adachi: "Twice-a-day versus one-a-day interferon-β therapy in chronic hepatitis C"Hepato-Gastroenterology. 50. 775-778 (2003)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Naoki Fujita, Masahiko Kaito, Masaki Takeo, Motoh Iwasa, Jiro Ikoma, Shozo Watanabe, and Yukihiko Adachi: "Non-Immune Complexed HCV RNA Titer in Serum as a Predictor of Interferon Response in Patients with Chronic Hepatitis C"The American Journal of Gastroenterology. 98(3)(in press). (2003)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Masahiko Kaito, Shozo Watanabe, Michinori Kohara, Kyoko Tsukiyama-Kohora, Satoshi Ishida, Masaki Takeo, Hideaki Tanaka, Shinichiro Horiike, Naoki Fujita, Motoh Iwasa, Esteban C Gabazza, Jiro Ikoma and Yukihiko Adachi: "Hepatitis C Virus Particles Detected by Immunogold Electron Microscopy"Science, Technology and Education of Microscopy : An Overview. (in press).

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Masahiko KAITO, Shozo WATANABE, Satoshi ISHIDA, Kyoko,TSUKIYAMA-KOHARA, Takayoshi ITO, Kotaro YASHUI, Naoki NAKAGAWA, Naoki FUJITA, Jiro IKOMA, Yukihiko ADACHI and. Michinori Kohara: "HEPATITIS C VIRUS PARTICLES DETECTED IN THE IMY CELL CULTURE SUPERNATANT BY IMMUNOELECTRON MICROSCOPY"Hepatology(AASLD ABSTRACTS). 32(4). 175-175 (2000)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Masahiko KAITO, Shozo WATANABE, Kyoko TSUKIYAMA-KOHARA, Takayoshi ITO, Kotaro YASHUI, Masaki TAKEO, Naoki FUJITA, Jiro IKOMA, Yukihiko ADACHI and. Michinori Kohara: "PROPAGATION FEATURES OF HEPATITIS C VIRUS IN IMY CELL BY IMMUNOGOLD ELECTRON MICROSCOPY"Hepatology(AASLD ABSTRACTS). 34(4). 489-489 (2001)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Motoh lwasa, Masahiko Kaito, Jiro Ikoma, Shozo Watanabe et al.: "Dietary Iron Restriction Improves Aminotransferase Levels in Chronic Hepatitis C Patients"Hepato-Gastroenterology. 49(44). 537-839 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Jiro Ikoma, Masahiko Kaito, Shozo Watanabe, et al.: "Early Diagnosis of Hepatocellular Carcinoma Using a Sensitive Assay for Serum Des-γ-Carboxy Prothrombin : a Prospective Study"Hepato-Gastroenterology. 49(43). 235-238 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Motoh Iwasa, Masagiko Kaito, Jiro Ikoma, Shozo Watanabe et al.: "Lactoferrin inhibits hepatitis C virus (HCV) viremia in chronic hepatitis C patients with a high viral load and HCV genotype 1b"American Journal of Gastroenterology. 97(3). 766-767 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Naoki Fujita, Masahiko Kaito Jiro Ikoma, Shozo Watanabe, et al.: "Non-Immune Complexed HCV RNA Titer in Serum as a Predictor of Interferon Response in Patients with Chronic Hepatitis C. Gastroenterology"American Journal of Gastroenterology. 98(3)(In press). (2003)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] 垣内雅彦: "IMY細胞上清中のHCV粒子に関する免疫電子顕微鏡的研究"西部肝臓フォーラム 01'記録集編集 原田 尚/谷川久一. 122-137 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] 垣内雅彦, 岩佐元雄, 足立幸彦他: "難治性C型慢性肝炎に対するUDCA併用鉄制限食療法とラクトフェリン療法"消化器科 特集II 「難治性C型慢性肝炎の治療法」. (In press).

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Masahiko Kaito, Naoki Fujita, Jiro Ikoma, Shozo Watanabe, et al.: "Hepatitis C Virus Particles Detected by Immunogold Electron Microscopy"Science, Technology and Education of Microscopy, an Overview. A. Mendez Vilas 特集(In press). (2003)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Satoshi Ishida, Masahiko Kaito, Michinori Kohara, Shozo Watanabe et al: "Hepatitis C virus core particle detected by immunoelectron microscopy and rotation technique"Hepatology Research. 20. 335-347 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Naoki Fujita, Masahiko Kaito, Jiro Ikoma, Shozo Watanabe et al.: "Paraformaldehyde protects of hepatitis C virus particles during ultacentrifugation"Journal of Medical Virology. 63・2. 108-116 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Kaito Masahiko, Jiro Ikoma, Shozo Watanabe, Michinori Kohara et al: "Hepatitis C virus particles detected in the IMY cell culture supernatant by immunoelectron microscopy"Hepatology(AASLD ABSTRACTS). 32・4. 175-175 (2000)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Masaki Takeo, Masahiko Kaito, Motoh Iwasa, Naoki Fujita, et al.: "Lactoferrin inhibits hepatitis C virus(HCV)viremia in chronic hepatitis C patients with a high viral load and HCV genotype 1b"Hepatology(AASLD ABSTRACTS). 34・4. 331-331 (2000)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Masahiko Kaito, Shozo Watanabe, Kyoko Tsukiyama-Kohara, et al.: "Propagation feature of hepatitis C virus in IMY cell by immunogold electron microscopy"Hepatology(AASLD ABSTRACTS). 34・4. 489-489 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Motoh Iwasa, Masahiko Kaito, Yukihiko Adachi, et al.: "Lactoferrin inhibits hepatitis C virus(HCV)viremia in chronic hepatitis C patient with a high viral load and HCV genotype Ib"American Journal of Gastroenterology. 97・3. 766-767 (2002)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Satoshi Ishida,Masahiko Kaito,Michinori Kohara,Shozo Watanabe et al: "Hepatitis C virus core particle detected by immunoelectron microscopy and rotation technique."Hapatology Research. (In press). (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Naoki Fujita,Masahiko Kaito,Jiro Ikoma,Shozo Watanabe et al.: "Paraformaldehyde protects of hepatitis C virus particles during ultacentrifugation."Journal of Medical Virology. 63・2. 108-116 (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Kaito Masahiko,Jiro Ikoma,Shozo Watanabe,Michinori Kohara et al: "Hepatitis C virus particles detected in the IMY cell culture supernatant by immunoelectron microscopy."Hepatology (AASLDABSTRACTS). 32・4. 175-175 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Naoki Fujita,Masahiko Kaito,Jiro Ikoma,Shozo Watanabe et al.: "Clinical significance of serum levels of non-immune complexed hepatitis C virus in patients with chronic hepatitis C : Correlation with genotype and response to IFN therapy"Hepatology (AASLDABSTRACTS). 32・4. 288-288 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書

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公開日: 2000-04-01   更新日: 2016-04-21  

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