| 研究概要 |
【目的】培養ヒト脳微小血管内皮細胞(human brain microvascular endothelial cell : HBEC)への活性化血小板の直接粘着・凝集現象に対する選択的トロンビン阻害薬アルガトロバン、抗血小板薬(beraprost)の効果をビデオ強化型(VEC)顕微鏡検討した。
【方法】HBECを観察用カバーグラス上に,confluentな状態に培養し,VEC顕微鏡の観察台に装着した。実験(1):多血小板血漿(PRP)をHBEC上を30分間灌流(shear rate 10/sec)し,洗浄後、HBECに粘着した血小板数を定量評価した(A群)。実験(2)PRP+ADP(2μM)をHBEC上に30分間潅流し、洗浄し、同様の観察をおこなった(B群)。実験(3)PRP+ADP(2μM)+アルガトロパン(5μg/ml)を潅流。洗浄後、同様の観察を行った(C群)。実験(4)PRPをBS 0.1 nMで前処置しADP(2μM)を加え同様の観察を行った(D群)。実験(5)PRPをBS 1 nMで前処置しADP(2μM)を加え同様の観察を行った(E群)。実験(6)PRPをBS 10 nMで前処置しADP(2μM)を加え同様の観察を行った(F群)。
【成績】HBECへの平均粘着血小板数は、A群;0.3±0.6/900μm^2,B群では25.5.1±11.3/900μm^2(p<0.01,vs A群)、C群;1.8±1.8/900μm^2(p<0.01,vsB群)、D群では16.5±18.6/900μm^2、E群;4.1±1.8/900μm^2(p<0.01,vs B群)、F群;2.8±2.4/900μm^2(p<0.05,vs B群)であった。であった。【結論】上記結果は、ADP刺激による活性化血小板の低流速下でのHBECへの粘着・凝集にトロンビンが関与していること、ベラプロストナトリウムはこの粘着・凝集を用量依存性に抑制することを示している。
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