| 研究課題/領域番号 |
12670993
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
血液内科学
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
前田 隆浩 長崎大学, 医学部・附属病院, 助教授 (40284674)
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| 研究分担者 |
上平 憲 長崎大学, 医学部, 教授 (80108290)
森内 良三 長崎大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (60210142)
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| 研究期間 (年度) |
2000 – 2001
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| 研究課題ステータス |
完了 (2001年度)
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| 配分額 *注記 |
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2001年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2000年度: 2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
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| キーワード | Fas / 成人T細胞白血病 / ATL / アポトーシス / 遺伝子変異 / 三量体 |
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| 研究概要 |
1.抗Fas抗体抵抗性の成人T細胞白血病(ATL)細胞株RSO4
RSO4にIgM抗Fas抗体を添加培養してもapoptosisは起こさない。さらにproteosomeの特異的阻害剤であるlactacystinによってcaspase 8が活性化されapoptosisを誘導できることから、RSO4細胞質のapoptosisのpathwayには異常がないことが確認された。RSO4のFas遺伝子解析の結果、179番目の塩基アデニンがチミンへ変化する点突然変異を検出した。この結果、60番目のヒスチジンがアルギニンに変異し、三次元解析によって細胞外部分の52〜58アミノ酸付近の構造に大きな変化が生じることが判明した。この構造変化によってFasタンパクの正常な三量体形成が阻害され、apoptosisのシグナル伝達がdominant negativeに抑制された結果、RSO4は抗Fas抗体抵抗性を獲得したものと考えられた。
2.抗Fas抗体抵抗性のATL細胞株OMT
OMT細胞株のFas遺伝子解析の結果、1132番目のチミンからシトシンへの点突然変異を検出し、この結果exon9の313番目のアミノ酸がイソロイシンからトレオニンへ変異することが判明した。この変異によってdeath domainに構造変化をきたし、下流のFADDとの正常なassociationが阻害された結果、OMTが抗Fas抗体抵抗性を獲得した可能性が考えられる。
3.膜型Fasタンパク低発現ATL細胞
膜Fasタンパク陰性のATL症例7例の腫瘍細胞について検討した結果、ATL細胞は明らかに抗Fas抗体に抵抗性であり、7例中4例で遺伝子変異(point mutation、2bpのdeletion)を検出した。ATL細胞のapoptosis制御機構の一つとして、Fas遺伝子の様々な変異が深く関与していることが判明した。
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