| 研究課題/領域番号 |
12671004
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
血液内科学
|
|---|
| 研究機関 | 北里大学 |
|---|
研究代表者 |
東原 正明 北里大学, 医学部, 教授 (80165084)
|
|---|
| 研究分担者 |
高石 雅章 北里大学, 医学部, 助手 (10256307)
秋山 暢 北里大学, 医学部, 助手 (50286358)
堀江 良一 北里大学, 医学部, 講師 (80229228)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2000 – 2001
|
| 研究課題ステータス |
完了 (2001年度)
|
| 配分額 *注記 |
3,800千円 (直接経費: 3,800千円)
2001年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
2000年度: 2,400千円 (直接経費: 2,400千円)
|
|---|
| キーワード | ミオシン / ミオシン重鎖 / ミオシン軽鎖 / アイソフォーム / クローニング / 血小板 / 単球 / 非古典的ミオシン / 血液細胞 / リン酸化 |
|---|
| 研究概要 |
今回、ヒト血小板およびリンパ球におけるミオシンスーパーファミリーの発現についての新しい所見を得ると共に、ミオシン20-kDa軽鎖の3つのアイソフォームを発見した。
1)ヒト血小板に発現するミオシン重鎖のアイソフォームは、MHC-IIAのみであることを転写レベルで証明した。
2)ヒト臍帯血および末梢血のリンパ球にはMHCIIAが他のミオシンスーパーファミリー構成分子に比し優位に発現している。しかも、報告されている7.5kbpに加え、臍帯血リンパ球では6.5kbp、末梢血リンパ球では6.0kbpというサイズの異なるメッセージが同定された。非筋細胞においては、最近非古典的ミオシンが14種報告されている。今回、RT-PCRおよびノザンブロットにより、リンパ球には一部の非古典的ミオシン(I-c、brush border-I、I-β、V、VI、VIIA、IXA、IXB、XV)がいずれも低レベルの発現であったが、遺伝子レベルで確認した。
3)ヒト白血病細胞株Meg-01およびU937、ヒト血小板より3つのisoform(MLC-2A,-2B,-2C)をクローニングした。MLC-2A, MLC-2Bは、調べた血液細胞およびcell lineにすべてに構成的に発現していた。ゲノムの解析結果より、MLC-2AおよびMLC-2Bは各々3つのexonからなり、18番目染色体にコードされていることが明かとなった。MLC-2Cは、chicken gizzardのMLC20と全く同一のものであったが、単球系細胞および血小板のみに発現し、またHL60をTPAで単球系に分化させた時に誘導されてくることも判明した。
MLC-2Cは、3つのexonよりなり、20番目染色体にコードされていた。これらの軽鎖の機能解析および転写因子解析が進行中である。
|
