| 研究課題/領域番号 |
12671120
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
代謝学
|
|---|
| 研究機関 | 名古屋市立大学 |
|---|
研究代表者 |
堂前 純子 名古屋市立大学, 医学部, 講師 (70227700)
|
|---|
| 研究分担者 |
横山 信治 名古屋市立大学, 医学部, 教授 (10142192)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2000 – 2001
|
| 研究課題ステータス |
完了 (2001年度)
|
| 配分額 *注記 |
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2001年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
2000年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
|
|---|
| キーワード | HDL / コレステロール / ABCA1 / アポリポタンパク質 / apolipoprotein / cholesterol / ABCAl |
|---|
| 研究概要 |
細胞コレステロール搬出にかかわるアポリポタンパク質レセプターの同定と解析のため、各種細胞株を用いた実験を行い、以下の成果を得た。
1)RAW264にはdBcAMP投与に伴い、新たなRNAと蛋白質の合成を経て特異的なアポAI結合部位とアポAI依存性のコレステロールとリン脂質を含むHDL形成を認めた。ABCA1mRNAとタンパク質は無処理細胞でも検出されたが、dBcAMPで約10倍に増加した。各種薬物のABCA1陰イオン輸送阻害能は、アポAI依存性HDL生成反応へ及ぼす効果と必ずしも一致しなかった。
2)THP-1はアポAI依存性にリン脂質のみを含むHDLを生成するが、PMA処理後には、コレステロールとリン脂質を含むHDLが生成された。ABCA1mRNAとタンパク質は無処理THP-1にはほとんど検出されず、PMAで発現が誘導された。
3)アポAI依存性HDL形成のない293由来のABCA1導入株のうち、低発現株ではリン脂質のみ、高発現株ではコレステロールとリン脂質の放出が認められた。特異的なアポAI結合は293には見られなかったが、ABCA1導入株には低発現株と高発現株の両方で検出された。
4)Tangier病患者で報告されたものを含む各種変異を導入したABCA1cDNAを293に一過性に発現させると、野生型ABCA1に比べアポAI依存性コレステロール放出は減少したが、リン脂質放出の減少は一様ではなかった。
以上より、RAW264にはAキナーゼで転写の活性化されるアポAI結合タンパク質が存在し、アポAI依存性HDL新生をもたらすと考えられた。ABCA1はこの過程に必要と考えられたが、得られた実験結果からは他の因子の関与も否定できない。HDL生成ならびにHDLへのコレステロール組み込みの有無には、ABCA1の構造、発現の程度や分布、細胞の状態等多数の因子の関与するものと推定される。
|
