| 研究課題/領域番号 |
12671202
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
消化器外科学
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| 研究機関 | 千葉大学 |
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研究代表者 |
小林 進 千葉大学, 大学院・医学研究院, 講師 (50234828)
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| 研究分担者 |
落合 武徳 千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (80114255)
西郷 健一 千葉大学, 医学部付属病院, 助手 (60323424)
白澤 浩 千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (00216194)
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| 研究期間 (年度) |
2000 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
2002年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2001年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2000年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
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| キーワード | DPC4 / Smad4 / 癌関連遺伝子 / 膵癌 / アデノウイルスベクター / 遺伝子治療 / 遺伝子発現 / コスミッド |
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| 研究概要 |
DPC4(Deleted in Pancreas Carcinoma, Locus4)遺伝子は1996年、ジョンズホプキンス大学S.E.Kern博士らにより、クローニングされた。そのDPC4/Smad4, cDNA遺伝子(pDPC4-wt3,4.4kb)をS.E.Kern博士より提供を受け、E.Coliを用い,pBluescript II SK(+) phagemidの形で遺伝子を複製した。それをBamH1(Start codonより10塩基)EcoR1(Stop codonより18塩基)で切断しDPC4/Smad4 cDNA(1660bp)を回収し、アデノウイルス発現ベクター作成用コスミッドDNAにDPC4/Smad4,cDNA遺伝子を、In-vitro Packageを用いて逆向きに組み込みを試みた。しかし、Large Scale, Small Scaleに戻り、再度、cDNAの取り出しを繰り返し行なったが、遺伝子の確認がとれなかった。S.E.Kern博士に連絡をとるも、原因は判明せず、現在はPCR法に変更し、DPC4/Smad4 cDNA(1660bp)を回収を試みており、DPC4/Smad4発現アデノウイルスベクターを作製する作業を繰り返し行っているが、未だ完成に至っていない。
また、このDPC4/Smad4発現アデノウイルスベクターの作成と平行して、膵癌を含め、消化器癌のp21^<WAF1/CIP1>、K_<-ras>の遺伝子発現、変異の検討を行ない、英文誌上で発表した。
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