| 研究課題/領域番号 |
12671286
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
消化器外科学
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| 研究機関 | 福岡大学 |
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研究代表者 |
志村 英生 福岡大学, 医学部, 助教授 (80178996)
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| 研究分担者 |
池田 靖洋 福岡大学, 医学部, 教授 (40038758)
中村 浩 福岡大学, 医学部, 助手 (60309911)
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| 研究期間 (年度) |
2000 – 2001
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| 研究課題ステータス |
完了 (2001年度)
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| 配分額 *注記 |
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2001年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
2000年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
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| キーワード | 肝細胞増殖因子 / アンタゴニスト / 遺伝子治療 / 膵胆道癌 / 腹膜中皮細胞 / 腹膜播種 |
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| 研究概要 |
膵胆道癌は消化器癌の中でも予後の悪い癌であるが、その理由の一つとして浸潤や転移が制御できないことにある.我々はこれまで、ヒト胆道癌細胞株を用いて肝細胞増殖因子(HGF)がその浸潤転移を著明に誘導することを明らかにしてきたが、本研究ではHGFのアンタゴニストであるHGF/NK4を用いた遺伝子治療の可能性を検討した.HGF/NK4を細胞に導入する方法として直接導入法とアデノウイルスベクターAdCMV.NK4を用いる方法を比較し、以下に示すように、アデノウイルス感染がNK4の産生効率が良く、ヌードマウスの胆道癌転移を抑制することを明らかにした.
モデルには(1)ヌードマウスの腹膜播種転移モデルと(2)皮下接種モデルを用い、癌転移の発生と腫瘍の増大を指標にウイルスの効果を判定した.
(1)ヌードマウスを開腹して腹壁に貫通創を作成し皮膚を縫合閉鎖したあとで胆道癌細胞GB-d1を腹腔内に注入すると、創部に一致して癌の転移結節が形成される.このマウスに精製したAdCMVNK4のmoiを変えて腹腔内に投与した.2週間後、コントロールに用いたウイルスAdCMVLacZに比べてmoiが100-200で癌結節の成長が著明に抑制された.ウイルス投与後の腹水中のNK4量を測定したが、発現量は少なく最大1ng/ml程度しか得られなかった.そこでIn vitroでの効果を確認するため腹膜中皮細胞を採取培養してウイルスを感染させた.癌細胞と中皮細胞ともに効率よく感染し培養上清に数100ng/mlのNK4産生が認められ、この上清はHGFにより誘導されるGB-d1細胞の運動能や浸潤性をgel invasion assayで著明に阻害した.
(2)皮下結節モデルを作成して、腹腔内にウイルスを注入感染し、癌の発育を経時的に測定した.AdCM VNK4の腹腔内への注入によって癌の発育に大きな影響はなく増殖阻止効果はなかった.
腹腔内に投与されたAdCMVNK4ウイルスは癌細胞とともに腹膜中皮細胞に感染して腹水中にNK4を分泌して腹壁への腫瘍の転移発育を阻害したものと思われた.アデノウイルス自体の問題点はあるが、遺伝子導入によるNK4産生の誘導は局所的には効果があると考えられる.
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