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ヒト尿細管細胞における結石関連蛋白質の発現に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号 12671566
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 泌尿器科学
研究機関金沢医科大学

研究代表者

森山 学  金沢医科大学, 医学部, 講師 (50278131)

研究分担者 宮澤 克人  金沢医科大学, 医学部, 講師 (60219772)
鈴木 孝治  金沢医科大学, 医学部, 教授 (70064615)
研究期間 (年度) 2000 – 2001
研究課題ステータス 完了 (2001年度)
配分額 *注記
900千円 (直接経費: 900千円)
2001年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
キーワード尿路結石症 / ヒト尿細管培養細胞 / RPTF-1 / バイクーニン / オステオポンチン / 蓚酸カルシウム / プロトロンビンF1 / バイクニン / 炎症カスケード / 遺伝子導入
研究概要

実験計画に示したようにこれまではMDCK細胞やNRK細胞のようなヒト以外の動物の培養細胞を用いた実験系が主であったが,今回我々はより臨床への関連を目指し,予定していた培養細胞よりHK-2細胞(正常ヒト近位尿細管上皮細胞由来)を選択し尿路結石症に関連する蛋白質に関して生物学的な変化を確認した.まずHK-2細胞をが様々な施設で検討されている結石関連蛋白,中でも分子生物学的によく検討されている(分子生物学的な検討が今回の我々の手法であるため)物質がcontrolの状態で発現しているかを検討した.それによりHK-2細胞は検討対象であるRPTF-1(prothrombin fragment 1),Bikunin, OPN(osteopontin)それぞれのmRNAの発現をRT-PCRを用いて確認した.により至適とされる培養液を用いて培養しこれまでに報告のある生物学的に考えられる濃度の蓚酸を添加する事でそれぞれの発現率の差をreal time PCR方を用いて定量した.同じくHK-2細胞に対しての免疫染色の結果もコントロールと蓚酸負荷との間にそれら蛋白の局在に明らかな差を認めた.さらに検討した蛋白質がすべて炎症系の物質であることに着目し細胞への蓚酸の刺激がどういう形でイニシエーションしているかを確認すべく活性酸素の発生有無を確認したところコントロール群に比較して蓚酸添加群で細胞に活性酸素の発生を確認し、それぞれの蛋白質の発現機転となりうる可能性を示し、今後さらにそのmRNAの発現にいたる経路を解明に対する研究への展開が期待される.

報告書

(3件)
  • 2001 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2000 実績報告書
  • 研究成果

    (20件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (20件)

  • [文献書誌] 森山 学: "過蓚酸ラット腎および尿中Inter-α-tripsin inhibitor familyの検討"日本尿路結石症研究会 第9回学術集会記録集. 9. 99-102 (2000)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 芝 延行: "ヒト腎におけるprothrombin遺伝子発現についての検討"日本尿路結石症研究会 第9回学術集会記録集. 9. 67-71 (2000)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Moriyama MT: "Expression of inter-alpha-inhibitor-related proteins in kidneys and urine of hyperoxaluric rats"Journal of Urology. 165. 1687-1692 (2001)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 相原衣江: "ヒト腎尿細管培養細胞の蓚酸刺激による反応性についての検討-尿路結石関連蛋白について-"金沢医科大学雑誌. (印刷中).

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 鈴木孝治: "学会印象記 第9回国際尿路結石症シンポジウム"臨床泌尿器科. 54. 656-657 (2000)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Moriyama M: "Urolithiasis 2000"AL Rodgers, BE Hibbert, B Hess, SR Khan and GM Pleminger (Eds.). 868 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shiba N: "Urolithiasis 2000"AL Rodgers, BE Hibbert, B Hess, SR Khan and GM Pleminger (Eds.). 868 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Suzuki K: "Urolithiasis 2000"AL Rodgers, BE Hibbert, B Hess, SR Khan and GM Pleminger (Eds.). 868 (2000)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Suzuki K: "Urolithiasis 2000"AL Rodgers, BE Hibbert, B Hess, SR Khan and GM Pleminger (Eds.). 868 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Miyazawa K: "Urolithiasis 2000"AL Rodgers, BE Hibbert, B Hess, SR Khan and GM Pleminger (Eds.). 868 (2000)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 鈴木孝治: "Urological Today"エクセプタ・メディカ(印刷中).

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Moriyama M, Shiba N, Suzuki K, Khan SR.: "In over oxalic acid urine rat kidneys and the inside of the urine, the examination of Inter-α-tripsin inhibitor family."Japan society of urolithiasis research. 9. 99-109 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shiba N, Suga K, Moriyama M, Miyazawa K, Ikeda R, Suzuki K: "An examination about the prothrombin genetic expression in Human kidney tissues"Japan society of urolithiasis research. 9. 67-71 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Moriyama M, Aihara K, Suga K, Shiba N, Miyazawa K, Ikeda R and Suzuki K: "Analysis of prothrombin mRNA expression level in the normal and stone forming rat kidneys by competitive real time quantitative PCR"In AL Rodgers, BE Hibbert, B Hess, SR Khan and GM Pleminger (Eds.) Urolithiasis 2000. 156-157 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shiba N, Aihara K, Moriyama M, Suzuki K: "Nucleotide sequence of renal prothrombin is different from the liver prothrombin"In AL Rodgers, BE Hibbert, B Hess, SR Khan and GM Pleminger (Eds.) Urolithiasis 2000. 162-163 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Suzuki K, Aihara K, Shiba N and Moriyama M: "Gene expression of prothrombin in human and rat kidney"In AL Rodgers, BE Hibbert, B Hess, SR Khan and GM Pleminger (Eds.) Urolithiasis 2000. 160-161 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Suzuki K, Aihara K, Shiba N and Moriyama M: "Detection of new quinolones included in urinary stones : HPLC analysis and identification Urolithiasis"In AL Rodgers, BE Hibbert, B Hess, SR Khan and GM Pleminger (Eds.) Urolithiasis 2000. 520-521 (2000)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Miyazawa K Suzuki K Ueda Y and Katsuda S: "Demonstration of apoptosis and its rerated genes in rat renal tubular epithelium of calcium oxalate crystal formation"In AL Rodgers, BE Hibbert, B Hess, SR Khan and GM Pleminger (Eds.) Urolithiasis 2000. 253-254 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Moriyama MT, Johson-Tardieu JM, Glenton PA and Khan SA: "Expression of inter-alpha-inhibitor-related proteins in kidneys and urine of hyperoxaluric rats."J Urol. 165. 1687-1692 (2001)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Aihara K, Moriyama M, Suzuki K: "Study of cell reaction by oxalate stimulation in a human kidney tubule epithelial cell line - in reaction to urolithic proteins -"(it is being printed).

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      2001 研究成果報告書概要

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公開日: 2001-04-01   更新日: 2016-04-21  

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