| 研究課題/領域番号 |
12671646
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
耳鼻咽喉科学
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
小池 卓二 (2001) 東北大学, 大学院・工学研究科, 講師 (10282097)
欠畑 誠治 (2000) 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (90261619)
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| 研究分担者 |
小池 卓二 東北大学, 大学院・工学研究科, 講師 (10282097)
大島 猛史 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (40241608)
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| 研究期間 (年度) |
2000 – 2001
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| 研究課題ステータス |
完了 (2001年度)
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| 配分額 *注記 |
3,900千円 (直接経費: 3,900千円)
2001年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
2000年度: 2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
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| キーワード | 蝸牛外有毛細胞 / 細胞骨格 / 細胞長変化 / 原子間力顕微鏡 / 運動能 / stiffness |
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| 研究概要 |
モルモット蝸牛より単離した外有毛細胞を用いて、以下の如き結果を得た。
1.Dispaseを用いて酵素処理し単離した後、Glutaraldehydeにて固定した。
2.原子間力顕微鏡(Atomic Force Microscope ; AFM)のtapping modeを用いて、固定した外有毛細胞の細胞側壁を調べた。
3.細胞側壁はモーター蛋白が密に存在する細胞膜と、その内側に細胞骨格、更にそれらを結びつけると考えられているピラーからなることが知られている。
4.細胞膜内に存在する膜内粒子の観察はできなかった。
5.外有毛細胞基底部から頂部にわたる全長において、円周方向に周期的に現れるフィラメントを観察した。その間隔は15-103nmと分布しており、平均間隔は49±18mm(平均±標準偏差)であった。
6.基底部から0.85-1.0(基底部を0、頂部を1とした場合)の頂部に近い部分と、それ以外の部分では、このフィラメントの間隔は有意に異なり、それぞれ44nmと54nmであった。
7.triton X100にて細胞膜を破壊し、細胞膜の影響を除外した条件で観察したところ、同様のフィラメントが観察された。
8.外有毛細胞の細胞骨格としては、円周方向にスプリング状に存在するactin filament、それに直交するspectrinが知られている。今回観察した円周方向のフィラメントの間隔は、これまで、他の方法で報告されているactin filamentの間隔(61.6±8.Onm、56.2±7.3nm)に近い値であった。
以上のことより、今回観察した円周方向のフィラメントはactin filamentであると考えられ、外有毛細胞はその頂部でactin filamentがより密に存在していることがわかった。
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