| 研究課題/領域番号 |
12671751
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
形成外科学
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
平野 明喜 長崎大学, 医学部, 助教授 (90208835)
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| 研究分担者 |
藤井 徹 長崎大学, 医学部, 教授 (60136661)
秋田 定伯 長崎大学, 医学部・附属病院, 助手 (90315250)
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| 研究期間 (年度) |
2000 – 2001
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| 研究課題ステータス |
完了 (2001年度)
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| 配分額 *注記 |
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2001年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2000年度: 2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
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| キーワード | サイトカイン / 頭蓋欠損モデル / 間葉系幹細胞 / インスリン様成長因子 / 白血病抑制因子 / 免疫寛容 / 幹細胞 / 骨再生 / in vitro / in vivo / 骨代謝 / 頭蓋骨欠損 / 細胞内情報伝達 |
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| 研究概要 |
サイトカインの情報伝達系の骨再生への関与について検討するにあたり、ヒトケロイド由来線維芽細胞初代培養系を用いて、セラミド誘導のアポトーシスヘの抵抗性について実験した。セラミドは通常、時間依存性に、容量依存性にヒト線維芽細胞をアポトーシス誘導するが、ケロイド由来の細胞は細胞周期の中でもG2期での停止を引き起こす。しかも、WST-1アッセイでは細胞数の減少を来たした。インスリン様成長因子(IGTF-1)を添加するとケロイド由来線維芽細胞はセラミド誘導アポトーシスに抵抗した。また、同時に、IGF-1受容体発現とも相関していた。PI-3キナーゼの阻害因子であるWortmaninnの前処置にてIGF-1系のアポトーシス誘導抵抗性は減少した。本実験では、IGF-1は受容体経由の情報伝達に関与し、分子レヴェルで制御されていることが分かった。次いで、同種皮膚移植の生着延長実験では、サイトカイン遺伝子治療が試みられた。即ち、同種マウス間(BALB/c, B6D2F1)で白血病抑制因子(LIF) cDNAプラスミドを用いて皮膚移植片内への遺伝子治療により、移植片の動態を検討した。LIF発現は治療後24時間、21日間で認められ、LIFの情報伝達受容体であるgp130はLIFと同様の発現を認めた。B6D2F1からBALB/cへの移植では、LIF遺伝子導入移植片でヘルパー2型T細胞サイトカイン(IL-10)の発現を認め、免疫寛容が認められた。
骨代謝では、LIFの頭蓋骨欠損モデルでの検討により、LIFが骨細胞の活性化により骨形成に関与することが明らかになった。骨形成サイトカイン(bFGFとBMP-2)とヒト間葉系幹細胞の頭蓋骨欠損モデルへの使用でスポンジ担体とともに、有意な骨再生を認めた。
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