| 研究課題/領域番号 |
12671790
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
形態系基礎歯科学
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| 研究機関 | 神奈川歯科大学 |
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研究代表者 |
吉本 尚 神奈川歯科大学, 歯学部, 助教授 (60084787)
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| 研究分担者 |
高橋 祐介 神奈川歯科大学, 歯学部, 助手 (20267511)
浜田 信城 神奈川歯科大学, 歯学部, 講師 (20247315)
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| 研究期間 (年度) |
2000 – 2002
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| 研究課題ステータス |
完了 (2002年度)
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| 配分額 *注記 |
3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
2002年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2001年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2000年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
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| キーワード | Porphyromonas gingivalis / 線毛 / 付着性 / リコンビナント線毛 / fimA / Prevotella intermedia / pYHBi1 / 伝達能 |
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| 研究概要 |
(1)前研究で開発したP. gingivalisの遺伝伝子伝達システム(宿主ベクター系)を応用し、線毛発現に関与する遺伝子fimAの伝達を行ったところ、電子顕微鏡的に可視的な線毛(リコンビナント線毛)の発現が確認された。
(2)fimA遺伝子伝達によりリコンビナント線毛が発現した菌(トランスフォーマント)では本来の線毛(親株が発現する天然線毛)の量が低下していた。
(3)リコンビナント線毛を発現した菌は、付着性、共凝集性、並びに自己凝集性のいずれもが親株より低下していた。
(4)トランスフォーマントからリコンビナント線毛を精製し、構成蛋白質成分を分画のうえ抗体を作成して同抗体のリコンビナント線毛および天然線毛に対する反応性とそれら構成成分の局在を調べたところ、リコンビナント線毛は、線毛の基本骨格であるフィンブリリンに対する抗体とは反応性を有するものの、天然線毛上に存在する少なくとも2種類の微量成分に対する抗体とは反応せず、それら成分を欠くことが推定された。このことから、本菌の線毛はfimA遺伝子がコードするフィンブリリン蛋白以外に、いくつかの成分が加わった上で正常な付着活性を有する線毛となることが明らかとなった。
(5)P. gingivalisと類縁のいくつかの菌種(黒色色素産生製嫌気性桿菌)から検出されたプラスミドの中からP. intermedia由来プラスミドpYHBi1の塩基配列を決定し、複製遺伝子の所在ならびにMob遺伝子の存在を確認した。また、同プラスミドが大腸菌に伝達可であることなど、遺伝子伝達ツールとしての基本的性状を明らかにした。
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