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顎下腺細胞におけるアポトーシス関連シグナル伝達成分とHSP90との相互作用

研究課題

研究課題/領域番号 12671813
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 機能系基礎歯科学
研究機関岩手医科大学

研究代表者

佐藤 詔子  岩手医科大学, 歯学部, 教授 (00048399)

研究分担者 帖佐 直幸  岩手医科大学, 歯学部, 助手 (80326694)
客本 斉子  岩手医科大学, 歯学部, 講師 (90118274)
加茂 政晴  岩手医科大学, 歯学部, 助教授 (40214564)
永井 雅純  岩手医科大学, 歯学部, 助手 (00217960)
研究期間 (年度) 2000 – 2001
研究課題ステータス 完了 (2001年度)
配分額 *注記
3,900千円 (直接経費: 3,900千円)
2001年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2000年度: 3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
キーワードアポトーシス / HSP90 / Fas / ゲルダナマイシン / 唾液腺細胞 / カスパーゼ / TNF-α
研究概要

細胞の増殖、分化、アポトーシスのシグナルは密接に関連しあって機能している。最近、これらのシグナル伝達成分はシャペロン機能を有するHSPファミリー分子により制御されるとの報告がなされてきている。本研究ではヒト唾液腺腺癌細胞(HSG)におけるアポトーシス誘導経路にあるシグナル伝達成分とHSP90との相互作用を調べることを目的とした。初めにHSG細胞に対するアポトーシス誘導能を検討した。HSG細胞においてTNFα処理はアポトーシスを誘導しなかった。一方、抗FAS抗体処理では30%の細胞がアポトーシスを惹起したが、TNF-αで前処理後に抗FAS抗体で処理すると60%と相加的増加を示した。そこで、アポトーシスシグナル関連遺伝子の発現をRT-PCRで調べた。TNFαはFas発現を数倍に増加したことからTNFαはFasによるアポトーシス誘導を増強させることが示唆された。また、カスパーゼ活性に対する阻害実験から抗Fas抗体誘導アポトーシスにカスパーゼ、特に8と3の関与が示唆された。つぎに抗Fas抗体誘導アポトーシスにおけるHSP90の関与を調べた。HSP90の特異的阻害剤であるgeldanamycinで処理後、抗Fas抗体刺激を行った結果、抗Fas抗体単独刺激で30%だったアポトーシス細胞数が90%に増加した。このことからHSP90がアポトーシスシグナル伝達分子の制御に関与していることが強く示唆された。ついで抗FAS抗体刺激後、ウェスタンプロッティング法によりHSP90アイソフォームを調べた。HSP90αのタンパクレベルは変動しなかったがHSP90βの増加が認められた。さらにHSG細胞のプロテオーム解析を行った。二次元電気泳動で観察されたHSP90のスポットは抗FAS抗体処理により酸性側へとシフトしたことからHSP90のリン酸化の可能性が示唆された。

報告書

(3件)
  • 2001 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2000 実績報告書
  • 研究成果

    (14件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (14件)

  • [文献書誌] Masazumi Nagai: "Cancer cells responsible for humoral hypercalcemia express mRNA encoding a secreted form of ODF/TRANCE that induces osteoclast formation"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 269. 532-536 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 客本斉子: "ヒト顎下腺腺癌細胞(HSG)におけるレチノイン酸依存性増殖抑制機へのCOUP-TFIの関与"口腔組織培養学会誌. 9(1). 77-78 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 加茂政晴: "プロテオーム解析によるヒト顎下腺由来腺癌細胞株とその派生細胞株における発現タンパク質の比較"口腔組織培養学会誌. 9(2). 31-42 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 加茂政晴: "ヒト顎下腺由来腺癌細胞株タンパク質の二次元電気泳動による分離と同定"口腔組織培養学会誌. 10(1). 47-48 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 客本斉子: "ヒト唾液腺腺癌細胞における抗Fas抗体によるアポトーシス誘導機構"口腔組織培養学会誌. (印刷中).

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nagai M., Kyakumoto S. and Sato N.: "Cancer cells responsible for humoral hypercalcemia express mRNA encoding a secreted form of ODF/TRANCE that induces osteoclast formation"Biochem. Biophy. Res. Commun.. 269. 532-536 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kyakumoto S., Nagai M., Kamo M., Sato N. and Ota M.: "Implication of COUP-TFI in retinoic acid-inducible transcription in human salivary gland adenocarcinoma cell line HSG"Jpn. J. Tissue Cult. Dent. Res. (in Japanese). 9 (1). 77-78 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kamo M., Kyakumoto S., Chosa N. and Sato N.: "Comparative analysis of proteins from human salivary intercalated duct cell line and its derived cell line by proteomics"Jpn. J. Tissue Cult. Dent. Res. (in Japanese). 9 (2). 31-42 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kamo M., Kyakumoto S., Chosa N and Sato N.: "Separation and identification of proteins from human salivary intercalated duct cell line by two-dimensional electrophoresis"Jpn. J. Tissue Cult. Dent. Res. (in Japanese). 10 (1). 47-48 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kyakumoto S., Chosa N, Kamo M. and Sato N.: "Mechanism of apoptosis induced by anti-Fas antibody in human salivary gland adenocarcinoma cell line HSG"Jpn. J. Tissue Cult. Dent. Res. (in Japanese). (in press).

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 加茂政晴: "プロテオーム解析によるヒト顎下腺由来腺癌細胞株とその派生細胞株における発現タンパク質の比較"口腔組織培養学会誌. 9(2). 31-42 (2000)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] 加茂政晴: "ヒト顎下腺由来腺癌細胞株タンパク質の二次元電気泳動による分離と同定"口腔組織培養学会誌. 10(1). 47-48 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Masazumi Nagai: "Cancer cells responsible for humoral hypercalcemia express mRNA encoding a secreted form of ODF/TRANCE that induces osteoclast formation."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 269. 532-536 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 客本斉子: "ヒト顎下腺腺癌細胞(HSG)におけるレチノイン酸依存性増殖抑制機構へのCOUP-TFIの関与"口腔組織培養学会誌. 9(1). 77-78 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書

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公開日: 2000-04-01   更新日: 2016-04-21  

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