| 研究課題/領域番号 |
12672201
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
人類遺伝学
|
|---|
| 研究機関 | 広島大学 |
|---|
研究代表者 |
松浦 伸也 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助教授 (90274133)
|
|---|
| 研究分担者 |
篠原 美紀 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助手 (80335687)
小松 賢志 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 教授 (80124577)
田内 広 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助手 (70216597)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2000 – 2001
|
| 研究課題ステータス |
完了 (2001年度)
|
| 配分額 *注記 |
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2001年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
2000年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
|
|---|
| キーワード | NBS / AT / NBS1 / 電離放射線 / dsb / ATM / テロメア / フォーカス / 放射線高感受性 / 染色体不安定性 / ノックアウトマウス / Nbs1 / Atm / Ku70 / 高発癌性 / 免疫不全 |
|---|
| 研究概要 |
Nbs1遺伝子欠損および遺伝子二重欠損細胞の作成:Nbs1遺伝子欠損ヘテロマウスをAtmまたはKn70遺伝子ヘテロ欠損マウスとそれぞれ交配してF2マウスを誕生させ、尻尾からDNAを抽出してPCR法で二重ヘテロ欠損マウスを同定した。得られた二重ヘテロ欠損マウスを交配して8.5日齢マウス胚を採取し、Nbs1/AtmおよびNbs1/Ku70の遺伝子二重欠損細胞株同定を進めている。
遺伝子欠損細胞の機能解析:Ku70欠損細胞と、Atm欠損細胞とNbs1欠損細胞について、以下の表現型の差異を比較検討した。
(i)放射線誘発染色体構造異常:細胞に2Gyのガンマ線を照射して24時間培養後、コルセミド処理して染色体標本を作成する。100細胞の染色体核板を観察し染色分体異常の出現頻度を計測した。
(ii)放射線致死感受性:細胞に1、2、4Gyのガンマ線を照射してディシュに播種・培養し、約2週間後に出現するコロニー数を計測して生存率曲線を作成した。いずれの細胞株も正常細胞に比べ、放射線高感受性であることを確認した。
|
