遺伝性血液疾患のサラセミア症と異常ヘモグロビン症の迅速診断法の開発

• 研究課題/領域番号: 12672259
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 病態検査学
• 研究機関: 川崎医科大学
• 研究代表者: 原野 昭雄 川崎医科大学, 医学部, 助教授 (60069028)
• 研究分担者: 原野 恵子 川崎医療福祉大学, 医療技術学部, 助教授 (00069072)
• 研究期間 (年度): 2000 – 2001
• 研究課題ステータス: 完了 (2001年度)
• 配分額: 3,800千円 (直接経費: 3,800千円); 2001年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円); 2000年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
• キーワード: 日本人 / ミャンマー人 / βサラセミア / αサラセミア / PCR / Mnl I / ARMS / シケンシング / multiplex PCR / シーケンシング / 血色素異常症 / PCR-RFLP / ミャンマー

研究概要

日本全国からのヘモグロビン異常症の疑われる血液検体や輸血依存性の重篤な貧血症のミャンマー人からの血液についてタンパク化学および分子生物学的手技を用いて迅速診断法の開発を目的に解析を試みた.
Hb分析からβサラセミア症が疑われた患者に対して,日本人に頻発する5種のβサラセミア変異体(-31CapA→G, CD41/42TTCTTT→TT, CD90GAG→TAG, IVS II-1G→A, IVSII654C→T)やミャンマー人に予想された5種の変異体(CD17A→T, IVS I-1G→T, IVS I-5G→C, CD41/42TTCTT→TT, IVSII-654C→T)の検出はARMS(Amplification Refractory Mutation System)法が有効な方法と考えられ,およそ70%の患者に検出された.しかし,スクリーニング法とするには条件設定が困難であり,個々の変異体検出条件の設定が必要であった.未知あるいは稀な変異体の検出にはPCR/シーケンシング法が欠かせない.ミャンマー人の主要な異常HbはHb Eであり,PCR/Mnl I消化法で容易に検出される.今回の検査でHb SとHb Monroeの保因者が検出された.日本ではHb Riyadh, Hb Takamatsu(β鎖異常Hb)やHb J-Cape Town, Hb Ube-2(α鎖異常Hb)は主要な異常Hbであるが,多種多様な異常Hbの検出される我が国ではPCR/シーケンシング法によらねばならなかった.
一方,αサラセミアは両国とも-α4.2,--MED,--Fil,--Thaiの様な変異体は検出されず,ほとんどが-α3.7,--SEA変異体であり,multiplex PCR-アガロースゲル電気泳動法で検出可能と考えられた.

研究成果

• [文献書誌] Oribe, Y.: "Hb Tsukumi [β 117(G19)His→Tyr] : A new hemoglobin variant found in a Japanese male during assay of Hb A1c"Hemoglobin. 24. 117-123 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Hamaguchi, K.: "Hb I-high Wycombe [β 59(E3)LysGlu] : The first instance in Japan"Hemoglobin. 24. 153-156 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Uchida, T.: "Hemoglobin Pitie-Salpetriere [β 34(B16)Val→Phe] causing erythrocytosis and mild hemolysis found in a Japanese male"International J.Haematol.. 71. 221-226 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Harano.T.: "An insight into heterozygous β-thalassemia, Myanmar"Kwasaki med.J.. 26. 127-131 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Harano, T.: "A case report of diagnosis of alpha-thalassemia-2"Kawasaki med.J.. 26. 133-138 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Harano.T.: "Prevalence of hemoglobin E among the children taking regular blood transfusion at the day care room, yangon Children Hospital, Myanmer"Kawasaki Med.J.. 26. 149-154 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Harano, T.: "Adult onset, chronic anemias of undetermined etiology, Myanmar"Kawasaki Med.J.. 26. 155-159 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Harano, K.: "Molecular aspects of transfusion dependent thalassemic children in Myanmar : Analysis of common β-thalassemia in Myanmar by amplification refractory mutation system"Kawasaki Med.J.. 26. 161-164 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Harano, T.: "Aberrant mRNA spliced in a β-thalassemic gene having a G→A mutation at β IVS II-1"Kawasaki med.J.. 26. 165-169 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Moriwaki, Y.: "Abnormal haemoglobins, HbTakamatsu and Hb G-Szuhu, detected during the analysis of glycated haemoglobin (Hb A1c) by high performance liquid chromatography"J.Clin.Pathol.. 53. 854-857 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Harano, T.: "Molecular aspects of α-thalassemia in Myanmar"Kawasaki Med.J.. 27. 33-36 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] 服部幸夫: "本邦臨床統計集(1)血液・造血器疾患・免疫機構の障害.異常ヘモグロビン血症およびサラセミア"日本臨牀. 59. 437-451 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] 原野昭雄: "日本人の異常ヘモグロビン症"自然科学社. 235 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] 原野昭雄: "遺伝子検査外注早わかり辞典"中外医学社. 138 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Oribe, Y., Hamaguchi, K., Kusuda, Y., Harano, K., Harano, T., Iwasaki, Y., Kotegawa, K., and Sakata" T: "Hb Tsukumi [β117(G19)His→Tyr] : A new hemoglobin variant found in a Japanese male during assay of Hb Ale."Hemoglobin. 24(2). 117-123
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Hamaguchi, K., Kusuda, Y., Yoshimichi, G., Harada, R., Harano, K., Harano, T: "Hb I-high Wycombe [β59(E3)Lys→Glu] : The first instance in Japan."Hemoglobin. 24(2). 153-156
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Uchida, T., Kinoshita, K., Hirabayashi, N., Saito, H., Harano, K., and Harano T: "Hemoglobin Pitie-Salpetriere [β34(B16)Val→Phe] causing erythrocytosis and mild hemolysis found in a Japanese male."Internatl. J. Haematol.. 71(3). 221-226
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Harano, T., Ne Win, and Harano, K: "An insight into heterozygous β-thalassemia, Myanmar."Kawasaki Med. J.. 26(3). 127-131
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Harano, T., Harano, K., Cho S-L, and Ne Win.:: "A case report of diagnosis of alpha-thalassemia-2."Kawasaki Med. J.. 26(3). 132-138
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Harano, T., Ne Win, and Harano, K.: "Prevalence of hemoglobin E among the children taking regular blood transfusion at the day care room, Yangon Children Hospital, Myanmar."Kawasaki Med. J.. 26(4). 149-154
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Harano, T., Ne Win, and Harano, K.: "Adult onset, chronic anemias of undetermined etiology, Myanmar"Kawasaki Med. J.. 26(4). 155-159
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Harano, K., Ne Win, and Harano, T: "Molecular aspects of transfusion dependent thalassemic children in Myanmar : Analysis of common β-thalassemia in Myanmar by amplification refractory mutation system (ARMS)."Kawasaki Med. J.. 26(4). 161-164
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Harano, T., Harano, K., and Ne Win: "Aberrant mRNA spliced in a β^0-thalassemic gene having a G→A mutation at βIVS II-1."Kawasaki Med. J.. 25(4). 165-169
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Moriwaki, Y., Yamamoto, T., Shibutani, Y., Harano, T., Takahashi, S, and Hada, T.:: "Abnormal haemoglobins, HbTakamatsu and Hb G Szuhu, detected during the analysis of glycated haemoglobin (Hb Ale) by high performance liquid chromatography."J. Clin. Pathol.. 53(11). 854-857
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Harano, T., Ne Win, and Harano, K: "Molecular aspects of α-thaiassemia in Myanmar."Kawasaki Med. J.. 27(1). 33-136
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Uchida, T.: "Hemoglobin Pitie-Salpetriere [ β 34(B16)Va1→Phe] causing erythrocytosis and mild hemolysis found in a Japanese male"International J. Haematol.. 71(3). 221-226 (2000)
• [文献書誌] Harano, T.: "An insight into heterozygous β-thalassemia, Myanmar"Kwasaki med. J.. 26(3). 127-131 (2000)
• [文献書誌] Harano, T.: "A case report of diagnosis of alpha-thalassemia-2."Kawasaki med. J.. 26(3). 133-138 (2000)
• [文献書誌] Harano, T.: "Prevalence of hemoglobin E among the children taking regular blood transfusion at the day care room, yangon Children Hospital, Myanmar"Kawasaki Med. J.. 26(4). 149-154 (2000)
• [文献書誌] Harano, T.: "Adult onset, chronic anemias of undetermined etiology, Myanmar"Kawasaki Med. J.. 26(4). 155-159 (2000)
• [文献書誌] Harano, K.: "Molecular aspects of transfusion dependent thalassemic children in Myanmar : Analysis of common β-thalassemia in Myanmar by amplification refractory mutation system"Kawasaki Med. J.. 26(4). 161-164 (2000)
• [文献書誌] Harano, T.: "Aberrant mRNA spliced in a β-thalassemic gene having a G→A mutation at β IVS II-1."Kawasaki med. J.. 26(4). 165-169 (2000)
• [文献書誌] Moriwaki, Y.: "Abnormal haemoglobins, HbTakamatsu and Hb G-Szuhu, detected during the analysis of glycated haemoglobin(Hb Alc)by high performance liquid chromatography"J. Clin. Pathol.. 53(11). 854-857 (2000)
• [文献書誌] Harano, T.: "Molecular aspects of α-thalassemia in Myanmar"Kawasaki Med. J.. 27(1). 33-36 (2001)
• [文献書誌] 服部幸夫: "本邦臨床統計集(1)血液・造血器疾患・免疫機構の障害.異常ヘモグロビン血症およびサラセミア"日本臨林. 59(増7). 437-451 (2001)
• [文献書誌] Ne Win: "A wider molecular spectrum of β-thalassemia inMyanmar"Brit. J. Haematol.. (2001)
• [文献書誌] 原野昭雄: "遺伝子検査外注早わかり事典"中外医学社. 138 (2001)
• [文献書誌] Y.Oribe: "Hb Tsukumi [β117 (G19) His→Tys]: A new hemoglobin variant found in a Japanese male during assay of Hb A1c"Hemoglobin. 24(2). 117-123 (2000)
• [文献書誌] K.Hamaguchi: "Hb I-High Wycombe [β59 (E3) Lys→Glu]: The first instance in Japan"Hemoglobin. 24(2). 153-156 (2000)
• [文献書誌] T.Uchida: "Hemoglobin Pitie-Salpetriere [β34 (B16) Val→Phe] causing erythrocytosis and mild hemolysis found in a Japanese male"International J.Hematol.. 71(3). 221-226 (2000)
• [文献書誌] T.Harano: "An Insight into heterozygous beta-thalassemia, Myanmar"Kawasaki Med.J.. 26(3). (2000)
• [文献書誌] T.Harano: "A case report of diagnosis of alpha-thalassemia-2"Kawasaki Med.J.. 26(3). (2000)
• [文献書誌] T.Harano: "Molecular aspects of transfusion dependent thalassemic children in Myanmar : Analysis of common β-thalassemi in Myanmar by amplification refractory mutation system (ARMS)"Kawasaki Med.J. 26. (2000)
• [文献書誌] 原野昭雄: "日本人の異常ヘモグロビン症"(株)自然科学社. 235 (2000)