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骨髄間質細胞由来の心筋細胞におけるカテコラミン、アセチルコリン受容体の発現解析

研究課題

研究課題/領域番号 12770351
研究種目

奨励研究(A)

配分区分補助金
研究分野 循環器内科学
研究機関慶應義塾大学

研究代表者

伯野 大彦  慶應義塾大学, 医学部, 助手 (80286476)

研究期間 (年度) 2000 – 2001
研究課題ステータス 完了 (2001年度)
配分額 *注記
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
2001年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2000年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
キーワード幹細胞 / 心筋細胞 / カテコラミン受容体 / アセチルコリン受容体 / シグナル伝達 / 骨髄間葉系幹細胞 / シゲナル伝達
研究概要

1.アセチルコリン受容体の発現解析
CMG細胞におけるムスカリンM_1、M_2受容体の発現をRT-PCRにて解析した結果、M_1、M_2受容体ともに誘導後1週から発現し6週まで持続した。これは以前解析したβ_1、β_2受容体の発現様式と同様であり、心筋細胞としての表現形が完成した後に発現するものと考えられた。
2.受容体の機能解析
(1)α_1受容体 誘導後1週の細胞をα_1刺激薬Phenylephrine(10^<-4>M)で48時間刺激し、細胞肥大の有無を観察した。Phenylephrine刺激によりcell area、perimeterはそれぞれ42%、25%と有意に増加した。したがって、α_1受容体はCMG細胞の肥大に関与することが示唆された。
(2)β受容体 誘導後4週の細胞の収縮能(収縮長、収縮率、収縮速度)をビデオ記録して解析した。β刺激薬Isoproterenol(10^<-7>M)刺激により、収縮能はそれぞれ38%、27%、51%と有意に増加した。この増加はPropranololおよびβ_1選択的遮断薬CGP20712Aの前投与によりほぼ完全に抑制された。したがって、以前解析した拍動数の変化と同様に、Isoproterenolの陽性変力作用は主にβ_1受容体を介することが示された。
(3)ムスカリン受容体 アセチルコリン受容体刺激薬Carbachol負荷後の細胞内IP_3含量をラジオイムノアッセイで解析した結果、Carbachol濃度依存的にIP_3含量の増加を認め、10^<-7>Mで約32倍となった。この増加はムスカリン受容体非選択的遮断薬AtropineおよびM_2受容体選択的遮断薬AFDX116の前投与でほぼ同程度に有意に抑制された。したがって、CMG細胞におけるムスカリン受容体はシグナル伝達機能を有し、主にM_2受容体を介することが示された。

報告書

(2件)
  • 2001 実績報告書
  • 2000 実績報告書
  • 研究成果

    (7件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (7件)

  • [文献書誌] Daihiko Hakuno, et al.: "Bone Marrow-Derived Regenerated Cardiomyocytes (CMG Cells) Express Functional Adrenergic and Muscarinic Receptors"Circulation. 105. 380-386 (2002)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] 伯野 大彦, 福田 恵一: "骨髄間質細胞由来の心筋細胞におけるカテコラミン、アセチルコリン受容体の発現および機能解析"心筋の構造と代謝. 23. 145-154 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] 伯野 大彦, 福田 恵一: "再生の医学:心筋細胞の再生、新生療法"細胞. 33. 80-83 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] 福田恵一: "心筋細胞の再生"医工学治療. 12巻4号. 870-876 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 福田恵一: "骨髄細胞から心筋細胞への分化"Molecular Medicine. 38巻1号. 22-28 (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 福田恵一: "心血管tissue engineeringを目指した再生心筋細胞の開発"心臓. 33巻1号. 47-50 (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 福田恵一: "心臓の組織工学"医学のあゆみ. 196巻5号. 321-326 (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書

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公開日: 2000-04-01   更新日: 2016-04-21  

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