| 研究概要 |
PC-3にwild-type FGFRlllbを導入し,得られたFGFR2lllb安定発現株は,in vitroにおいてcontrolと比較し有意に,増殖が抑制されており.LigandのFGF-7添加によりさらに増殖抑制効果が認められた.ヌードマウスを用いた造腫瘍能の検討でもcontrolと比較し有意に造腫瘍能は低下していた.FGFR2lllb安定発現株はcontrolやparentでみられていた紡錘形の形態や長く伸びた樹枝状の形態は弱まり,細胞は敷石状に近い形態を示した.ヒト前立腺癌組織では分化度が低くなるに従いlactoferrinの産生は低下する,FGFR2lllb安定発現株はcontrolに比べlactoferrinの発現は増加していた.サイトケラチンの産生は正常前立腺上皮,肥大症組織,前立腺癌組織,前立腺癌細胞株で発現パターンが変化する.Pancytokeratine抗体を用いた検討ではFGFR2lllb安定発現株ではcontrolに比べ発現の増加がみられ現在,各cytokeratine抗体を用いて詳細を検討中である.
Ligandが結合し活性化されたFGFRの細胞内ドメインのリン酸化はFRS2,ドッキングプロテインGRB2らとcomplexを形成しシグナルが伝達される.FGFRlll安定発現株とcontrolをそれぞれFGF-1,FGF-7で刺激し,タンパクを回収,抗GRB2抗体を用いて免疫沈降を行い得られた蛋白をSDS-PAGEしたのちトランスファーし,抗リン酸化チロシン抗体でウェスタンブロッティングを行った.FGFR2lllb安定発現株ではcontrolと比較しFGF-1,FGF-7刺激で90kDaのバンドの減弱が認められFGFR2lllbのシグナルはFGFR下流のシグナルにおいてアダプター蛋白のリン酸化を抑制する可能性が示唆され解析中である.
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